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時(shí)間：2022-08-11 13:15:12
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微生物實(shí)驗(yàn)室純培養(yǎng)在生物技術(shù)中是一個(gè)重要的操作實(shí)驗(yàn)，課題涉及內(nèi)容多、范圍廣，實(shí)驗(yàn)難度很大。為了使學(xué)生更好地了解實(shí)驗(yàn)中的許多工作，包括儀器使用、菌液稀釋、菌株移植、接種等，都要在無(wú)菌的或不被污染的條件下進(jìn)行，才能保證做到純粹培養(yǎng)成功，筆者結(jié)合教學(xué)實(shí)際談?wù)剬?duì)本課題的教學(xué)設(shè)計(jì)。
一、教學(xué)目標(biāo)確立
依據(jù)課程內(nèi)容要求，確立本課題教學(xué)目標(biāo)見(jiàn)表1。
表1
二、教學(xué)實(shí)施設(shè)計(jì)
1.制訂實(shí)驗(yàn)計(jì)劃
依據(jù)課程內(nèi)容要求，確立本課題教學(xué)安排見(jiàn)表2。
表2
2.純化大腸桿菌的原理
微生物的純培養(yǎng)，選用平板劃線法或稀釋涂布平板法，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上操作，經(jīng)培養(yǎng)后可分離得到單個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，即菌落。
3.準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)材料
本課題所用材料、儀器及藥品見(jiàn)表3。
表3
實(shí)驗(yàn)材料 大腸桿菌 配制系列稀釋菌液
實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備 培養(yǎng)皿、試管、酒精燈、試管架、移液管、膠頭滴管、接種環(huán)、涂布器、恒溫箱、無(wú)脂棉、玻璃棒、消毒棉球、超凈工作臺(tái) 培養(yǎng)皿、試管、移液管、接種環(huán)、涂布器等滅菌（已滅菌備用）
實(shí)驗(yàn)藥品 牛肉膏、蛋白胨培養(yǎng)基200ml、無(wú)菌水150ml 提前配制（滅菌備用）
4.實(shí)驗(yàn)操作
（1）指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)操作。本課題實(shí)驗(yàn)可按照下面實(shí)驗(yàn)流程進(jìn)行操作：
超凈工作臺(tái)倒平板、接種培養(yǎng)箱純化培養(yǎng)。
（2）接種法。一般是無(wú)菌培養(yǎng)基在水浴鍋加熱融化后冷卻至50℃左右倒平板。操作必須始終在酒精燈火焰旁進(jìn)行，每皿倒入15ml左右并且不要將皿蓋完全打開(kāi)，冷卻后的平板要倒置。
平板劃線法（圖1）：即用接種環(huán)將菌體沾在平板培養(yǎng)基上。微生物細(xì)胞隨畫(huà)線次數(shù)的增多而減少，將微生物單個(gè)地分離，并最終形成標(biāo)準(zhǔn)的菌落。在畫(huà)線操作時(shí)應(yīng)注意：一是用接種環(huán)取菌種之前、每次畫(huà)線之前和畫(huà)線結(jié)束都要進(jìn)行灼燒滅菌，灼燒后要在酒精燈附近冷卻后再操作；二是畫(huà)線時(shí)不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)基，如果采用分段畫(huà)線法操作從第二次操作應(yīng)總在上一次畫(huà)線末端開(kāi)始，首尾區(qū)不能相連；三是操作必須始終在酒精燈火焰旁進(jìn)行。
稀釋涂布平板法（圖2）：即先將菌液用無(wú)菌水進(jìn)行一系列梯度為（如10-1，10-2，10-3）稀釋液，用無(wú)菌玻璃涂棒將不同稀釋度的菌液均勻地涂布在平板上。聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。在涂布操作時(shí)應(yīng)注意：一是配制系列梯度稀釋液必須用無(wú)菌水配制；二是配制系列梯度稀釋液和轉(zhuǎn)移菌液以及涂布過(guò)程等必須都在酒精燈火焰旁進(jìn)行。
（3）培養(yǎng)操作。 將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基（空白）放入37℃恒溫箱中，培養(yǎng)18～24h后，觀察并記錄。這期間安排學(xué)生代表或?qū)嶒?yàn)小組長(zhǎng)進(jìn)行定期觀察，并做好記錄，以便及時(shí)讓其他學(xué)生觀察到自己的實(shí)驗(yàn)成果。
2實(shí)驗(yàn)教學(xué)準(zhǔn)備工作幾項(xiàng)準(zhǔn)則
2.1嚴(yán)格進(jìn)行每個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的預(yù)實(shí)驗(yàn)
預(yù)備實(shí)驗(yàn)是保證實(shí)驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量的前提，其目的是：檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法及操作規(guī)程是否準(zhǔn)確無(wú)誤，所用溶液、試劑和藥品是否合格；進(jìn)一步確定實(shí)驗(yàn)所需時(shí)間，探索可能出現(xiàn)的問(wèn)題并擬定解決問(wèn)題的方案，根據(jù)實(shí)驗(yàn)難易程度確定評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)等[6]。另外，制片及染色技術(shù)實(shí)驗(yàn)，特別是微生物的生長(zhǎng)與培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，常常出現(xiàn)許多意外現(xiàn)象或不理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。諸如，某種溶液和試劑失效，或某種微生物生長(zhǎng)不好等等。因此，每個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目都應(yīng)當(dāng)提前預(yù)做一次，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確、無(wú)誤，以保證實(shí)驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量。
2.2認(rèn)真做好實(shí)驗(yàn)教學(xué)前期準(zhǔn)備工作
實(shí)驗(yàn)教學(xué)的前期準(zhǔn)備工作，除嚴(yán)格進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)外，尚需認(rèn)真檢查顯微鏡和儀器設(shè)備、玻璃器皿及溶液、試劑等，以及實(shí)驗(yàn)桌凳的完好狀態(tài)。2.2.1顯微鏡的檢查要點(diǎn)實(shí)驗(yàn)課前認(rèn)真檢查：普通光學(xué)顯微鏡機(jī)械部分的鏡臂、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺(tái)、標(biāo)本夾、粗細(xì)調(diào)節(jié)器，以及光學(xué)系統(tǒng)的目鏡、物鏡和聚光鏡的完好情況，尤其是要仔細(xì)檢查調(diào)節(jié)器的靈敏度和油鏡的清晰度。2.2.2實(shí)驗(yàn)用儀器設(shè)備完整性的檢查實(shí)驗(yàn)課前應(yīng)當(dāng)認(rèn)真檢查儀器設(shè)備的完整性。在實(shí)驗(yàn)教學(xué)過(guò)程中最忌諱出現(xiàn)缺東少西，以及儀器設(shè)備和物品質(zhì)量不合要求的現(xiàn)象[7]。每堂實(shí)驗(yàn)課所需的所有物品，都應(yīng)當(dāng)備足有余，所用儀器設(shè)備都要保持運(yùn)轉(zhuǎn)良好。實(shí)驗(yàn)用儀器及物品完整性檢查工作是相當(dāng)繁瑣的，工作量也很大。舉例說(shuō)明，微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課的前3個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，即光學(xué)顯微鏡的使用與革蘭氏染色法、細(xì)菌運(yùn)動(dòng)性及其莢膜觀察、酵母菌的死活鑒別，以及放線菌、霉菌制片與細(xì)菌計(jì)數(shù)，所用的滴瓶總計(jì)200多個(gè)，需要逐個(gè)地進(jìn)行嚴(yán)格檢查：膠頭是否漏氣，瓶中的試劑是否失效、夠用，滴芯是否能順利地取出(發(fā)現(xiàn)沉淀和結(jié)晶應(yīng)及時(shí)清洗)，標(biāo)簽變色嚴(yán)重的還要及時(shí)更換。其他儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)桌凳的完好狀態(tài)也都應(yīng)當(dāng)進(jìn)行認(rèn)真檢查，如逐一檢查每個(gè)實(shí)驗(yàn)凳腳是否松動(dòng)，并及時(shí)擰緊等。2.2.3玻璃器皿一定要洗刷干凈微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)所用的玻璃器皿數(shù)量很大，如試管、培養(yǎng)皿和三角燒瓶及載玻片等數(shù)以千計(jì)。用來(lái)盛裝微生物培養(yǎng)基的大量試管、培養(yǎng)皿和三角燒瓶，有一丁點(diǎn)不干凈就會(huì)生長(zhǎng)霉菌；有的如載玻片上黏附了香柏油，洗刷難度很大。所以，玻璃器皿的洗刷工作是十分重要而艱巨的。玻璃器皿的全部洗刷工作都是教師與同學(xué)們共同完成的。洗刷后的檢查工作采用對(duì)著陽(yáng)光以流水沖洗的方式進(jìn)行，確保每一個(gè)玻璃器皿干凈明亮。其具體安排程序如下：玻璃器皿經(jīng)學(xué)生洗刷后，再由同學(xué)進(jìn)行檢查，最后由教師抽樣檢查。這樣，不僅保證了玻璃器皿的干凈度，還培養(yǎng)了學(xué)生掌握高精度清洗器皿的基本技能及嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)作風(fēng)。
3重視并完善解決實(shí)驗(yàn)課堂上出現(xiàn)的問(wèn)題
對(duì)于在微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)過(guò)程中經(jīng)常出現(xiàn)的一些問(wèn)題，必須認(rèn)真分析原因，并及時(shí)想辦法解決。在出現(xiàn)的問(wèn)題中，有些是屬于實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及其技術(shù)方法問(wèn)題，但常常碰到的是一些由于學(xué)生缺少應(yīng)有的素質(zhì)或經(jīng)驗(yàn)所造成的，都應(yīng)該及時(shí)分析并適當(dāng)解決之。諸如，有的顯微鏡粗鑼旋縫隙里有許多油漬，究其原因是由于同學(xué)們的手不夠清潔所造成的；為此，便要求學(xué)生在使用顯微鏡之前，一定要洗手。再如，個(gè)別同學(xué)有時(shí)將實(shí)驗(yàn)用的標(biāo)本片丟落在載物臺(tái)上，為了避免類(lèi)似情況再次發(fā)生，便要求學(xué)生每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后一定要清點(diǎn)一下標(biāo)本片的數(shù)量。第三，當(dāng)發(fā)現(xiàn)個(gè)別學(xué)生把臺(tái)微尺扔到放有載玻片的鍋里，為此便不再將其擺放到學(xué)生的座位上，而是現(xiàn)場(chǎng)把臺(tái)微尺發(fā)放給每一組同學(xué)，并講明其價(jià)格昂貴，應(yīng)當(dāng)細(xì)心使用，輕拿輕放，課后由課代表統(tǒng)一交給老師核查。第四，有的學(xué)生把雙層瓶（重層瓶）的玻璃帽和裝有結(jié)晶紫的滴蕊擰碎，為了避免類(lèi)似情況再次出現(xiàn)，每次上課前都要把其逐一擦拭，并檢查每一個(gè)滴瓶的滴蕊是否松動(dòng)。
中圖分類(lèi)號(hào)：G647 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1674-9324（2016）38-0277-02
隨著我國(guó)高校教育科研事業(yè)的發(fā)展，為了適應(yīng)新世紀(jì)建設(shè)創(chuàng)新型國(guó)家的需要，高校建立了以團(tuán)隊(duì)為主的科技創(chuàng)新模式，成立了多個(gè)獨(dú)立于本科教學(xué)實(shí)驗(yàn)的科研實(shí)驗(yàn)室。微生物學(xué)是生物科學(xué)的重要分支，微生物結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、操作容易成為高新生物技術(shù)的理論和技術(shù)基石。許多微生物如大腸桿菌、酵母菌等作為研究的模式生物和分子生物學(xué)重要的載體宿主，已經(jīng)成為各個(gè)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)培養(yǎng)的微生物，因此許多高校都成立了微生物科研團(tuán)隊(duì)和科研實(shí)驗(yàn)室。大量的老師，科研人員、研究生和參加大學(xué)生創(chuàng)新立項(xiàng)的本科生長(zhǎng)期在一個(gè)實(shí)驗(yàn)室里面進(jìn)行科學(xué)研究工作。然而，科研實(shí)驗(yàn)室中存在很多危害人身安全和實(shí)驗(yàn)室安全的隱患，這不得不引起我們的高度重視。
教學(xué)實(shí)驗(yàn)室由于實(shí)驗(yàn)本身安全性高，實(shí)驗(yàn)流程固定，安全防護(hù)措施完善等原因，因此發(fā)生安全事故低，教學(xué)實(shí)驗(yàn)室發(fā)生事故造成學(xué)生傷亡的事件鮮有報(bào)道。與本科教學(xué)實(shí)驗(yàn)室不同，科研實(shí)驗(yàn)室往往具有下面幾個(gè)特點(diǎn)：空間有限，實(shí)驗(yàn)室儀器和試劑種類(lèi)多數(shù)量大，人員多且相對(duì)固定，人員在實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)時(shí)間長(zhǎng)?？蒲袑?shí)驗(yàn)室的目的是為了科技創(chuàng)新，因此往往實(shí)驗(yàn)種類(lèi)多，試驗(yàn)新穎，實(shí)驗(yàn)本身的危險(xiǎn)系數(shù)高。由于許多新實(shí)驗(yàn)的步驟和方法來(lái)自于文獻(xiàn)，文獻(xiàn)中缺乏相應(yīng)的安全防護(hù)措施的描述，造成了實(shí)驗(yàn)操作人員對(duì)于實(shí)驗(yàn)安全本身危險(xiǎn)性估計(jì)不足。另一方面由于長(zhǎng)期待在相對(duì)固定的一個(gè)空間，對(duì)周?chē)h(huán)境熟悉，造成安全意識(shí)逐漸減弱；長(zhǎng)期以來(lái)實(shí)驗(yàn)室注重學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)技能的掌握，忽視對(duì)實(shí)驗(yàn)室安全的教育問(wèn)題，也是造成安全隱患的主要原因。
近年來(lái)多起高校實(shí)驗(yàn)室安全事故大多都是來(lái)自科研實(shí)驗(yàn)室：2009年德國(guó)女科學(xué)家在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中被含有埃博拉病毒的注射器刺到，疑似感染埃博拉病毒；2013年04月30日南京理工大學(xué)實(shí)驗(yàn)室爆炸造成1死3傷；2015年4月5日中國(guó)礦業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)室發(fā)生爆燃，造成成1死4傷；2015年12月18日清華大學(xué)實(shí)驗(yàn)室發(fā)生爆炸，造成1名博士后死亡。這些事故大多都是科研實(shí)驗(yàn)室管理不規(guī)范造成的，因此微生物科研實(shí)驗(yàn)室安全問(wèn)題的探索與研究十分重要。
一、微生物科研實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)狀
微生物科研實(shí)驗(yàn)室不僅是科技創(chuàng)新平臺(tái)，還是本科生畢業(yè)設(shè)計(jì)、大學(xué)生創(chuàng)新立項(xiàng)的場(chǎng)所。研究生日常生活的大部分時(shí)間都在實(shí)驗(yàn)室中：做實(shí)驗(yàn)、看文獻(xiàn)、休息、組會(huì)討論等。隨著開(kāi)放課題、大學(xué)生創(chuàng)新立項(xiàng)使大量本科生進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，造成大量人員在有限空間內(nèi)流動(dòng)，這些給實(shí)驗(yàn)室安全管理帶來(lái)巨大的挑戰(zhàn)。人員復(fù)雜，人數(shù)眾多是微生物實(shí)驗(yàn)室安全問(wèn)題管理的重點(diǎn)。
科學(xué)研究是科研實(shí)驗(yàn)室的主要任務(wù)，實(shí)驗(yàn)室往往重點(diǎn)關(guān)注基礎(chǔ)知識(shí)和實(shí)驗(yàn)技能的掌握，而忽視了實(shí)驗(yàn)室安全教育。大多數(shù)科研實(shí)驗(yàn)室并沒(méi)有對(duì)新進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的學(xué)生進(jìn)行過(guò)系統(tǒng)、全面的安全教育培訓(xùn)。學(xué)生對(duì)于實(shí)驗(yàn)室存在的安全隱患缺乏了解，對(duì)于實(shí)驗(yàn)中可能會(huì)發(fā)生的事故缺乏應(yīng)對(duì)的措施，極易將實(shí)驗(yàn)中的小事故演變成大災(zāi)難。
二、微生物科研實(shí)驗(yàn)室存在的安全隱患及其應(yīng)對(duì)措施
1.實(shí)驗(yàn)室水、火、電等的安全。
安全隱患：實(shí)驗(yàn)室水、火、電等的安全是實(shí)驗(yàn)室安全的重點(diǎn)，也是容易忽視和事故常發(fā)的環(huán)節(jié)。在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常用到高壓滅菌鍋、酒精燈、電烘箱等儀器，實(shí)驗(yàn)室中還有大量易燃易爆的有機(jī)溶劑及各種壓縮氣體，如果設(shè)備和試劑擺放不當(dāng)或使用不合理，極易造成危險(xiǎn)事故。實(shí)驗(yàn)室中電器設(shè)備較多，有些設(shè)備如通風(fēng)櫥、搖床、培養(yǎng)箱、烘箱等擺放密集并且常年處于運(yùn)轉(zhuǎn)狀態(tài)，實(shí)驗(yàn)室常常出現(xiàn)插排數(shù)量大，擺放亂的情況，長(zhǎng)期使用容易造成線路老化，產(chǎn)生漏電現(xiàn)象或者自燃造成火災(zāi)。
應(yīng)對(duì)措施：節(jié)約用水，經(jīng)常檢查上下水是否完好；需要使用明火或者易燃易爆品的實(shí)驗(yàn)要在專(zhuān)門(mén)的房間進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，易燃易爆品需要單獨(dú)存放，注意通風(fēng)和溫度；固定儀器的位置，請(qǐng)專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員將涉及的電路進(jìn)行合理設(shè)計(jì)和布排，大功率設(shè)備使用專(zhuān)線，減少插排的使用。安裝防漏電裝置，需要對(duì)設(shè)備和電路進(jìn)行定期檢查和維護(hù)。
2.實(shí)驗(yàn)試劑和藥品的安全。
安全隱患：高校微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、有機(jī)溶劑、核酸染料等有毒有害藥品，這些藥品大多都無(wú)色無(wú)味，且具有極高的毒性和社會(huì)危害性，如果未按照規(guī)定使用，不僅會(huì)給操作者帶來(lái)極大的危害，還會(huì)造成實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的污染，嚴(yán)重威脅實(shí)驗(yàn)室?guī)熒踩?。?qiáng)酸強(qiáng)堿等腐蝕性藥品，可能會(huì)腐蝕操作者的衣服和皮膚；有些試劑易揮發(fā)，通過(guò)呼吸系統(tǒng)吸入后會(huì)對(duì)人體健康造成危害；核酸染料等致畸致突變類(lèi)藥品，這類(lèi)藥品無(wú)色無(wú)味、劑量小，不易察覺(jué)但危害大，應(yīng)設(shè)置專(zhuān)門(mén)操作區(qū)域，禁止在非操作區(qū)域內(nèi)進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)；無(wú)菌操作中常用到無(wú)水乙醇進(jìn)行消毒滅菌，極易引起燃燒，造成燒傷。
應(yīng)對(duì)措施：規(guī)范實(shí)驗(yàn)室試劑的存放，將藥品和試劑集中存放，并對(duì)其進(jìn)行編號(hào)統(tǒng)計(jì)，便于查找和保存。對(duì)于有毒試劑實(shí)行專(zhuān)人保管，嚴(yán)格使用登記使用制度。有條件的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)將藥品集中存放在單獨(dú)的房間內(nèi)；試驗(yàn)操作過(guò)程戴手套戴口罩，對(duì)于揮發(fā)性試驗(yàn)需要在通風(fēng)廚中進(jìn)行；實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生的廢棄物需分類(lèi)后進(jìn)行收集分離處理，不能隨意亂扔亂倒。
3.生物安全。
安全隱患：微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室研究的對(duì)象是微生物，肉眼不可見(jiàn)但是對(duì)人身體健康有很大的影響，有些微生物是條件致病菌，在免疫力低、有開(kāi)放性傷口的情況下容易感染從而加重病情；帶有抗性標(biāo)記的生物材料或者其他有害材料如果不經(jīng)處理就丟棄會(huì)對(duì)環(huán)境造成嚴(yán)重危害。
應(yīng)對(duì)措施：實(shí)驗(yàn)室需指定專(zhuān)門(mén)人員實(shí)驗(yàn)室菌株管理和保藏工作，嚴(yán)格菌種使用登記制度。菌株是微生物實(shí)驗(yàn)室最寶貴的資源，應(yīng)該規(guī)范菌株保藏方法，使每個(gè)學(xué)生都能掌握微生物的菌株保藏方法，并且養(yǎng)成菌株保藏的習(xí)慣。定期地對(duì)菌株進(jìn)行保藏，并在每個(gè)同學(xué)畢業(yè)時(shí)做好菌株的交接工作。對(duì)于實(shí)驗(yàn)過(guò)程中使用過(guò)的任何生物材料在丟棄之前需要進(jìn)行滅菌處理。
4.大型儀器使用安全。
安全隱患：隨著實(shí)驗(yàn)室的發(fā)展，科研實(shí)驗(yàn)室引進(jìn)了許多分子生物學(xué)、蛋白表達(dá)純化、高壓液相色譜等先進(jìn)實(shí)驗(yàn)儀器，這些大型儀器是實(shí)驗(yàn)室寶貴的資源和資產(chǎn)，也是科學(xué)研究的重要工具，儀器設(shè)備的管理水平直接反映實(shí)驗(yàn)室的工作效率。這些大型儀器如果操作不當(dāng)，不僅可能危害操作人員的人身安全，也會(huì)造成儀器的損壞，影響實(shí)驗(yàn)的正常進(jìn)行和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。實(shí)驗(yàn)室大型儀器的安全包含兩個(gè)層次：人員的安全和儀器的安全。氣相色譜儀、液相色譜儀等大型儀器，在使用過(guò)程中會(huì)使用大量揮發(fā)性有機(jī)溶劑。高速離心機(jī)、電轉(zhuǎn)儀等儀器，如果不按照操作流程操作可能會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)人員的身體造成損傷。
應(yīng)對(duì)措施：大型儀器的管理應(yīng)實(shí)行專(zhuān)人負(fù)責(zé)制，每個(gè)人負(fù)責(zé)三到四臺(tái)儀器。在使用前需要經(jīng)過(guò)專(zhuān)門(mén)的培訓(xùn)，通過(guò)培訓(xùn)考試合格后方能上機(jī)使用。在使用過(guò)程中定期對(duì)儀器進(jìn)行清洗保養(yǎng)和維護(hù)，以保障實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。
三、制定安全制度，加強(qiáng)安全管理
1.生活區(qū)與實(shí)驗(yàn)區(qū)分開(kāi)：將學(xué)生在實(shí)驗(yàn)室的生活用品跟實(shí)驗(yàn)用品分開(kāi)，嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)室喝水、吃東西。學(xué)生做實(shí)驗(yàn)必須穿實(shí)驗(yàn)服，并嚴(yán)禁將實(shí)驗(yàn)用品帶入生活區(qū)。
2.實(shí)驗(yàn)區(qū)按照功能進(jìn)行分區(qū)：滅菌區(qū)、無(wú)菌操作區(qū)、蛋白操作區(qū)和電泳區(qū)等。對(duì)每一部分可能涉及的有毒有害物品或存在的安全隱患進(jìn)行標(biāo)注，貼在該區(qū)域醒目的位置，并在提醒標(biāo)語(yǔ)旁設(shè)置手套、口罩、護(hù)目鏡等防護(hù)用品。
3.建立安全值班制度：每天安排人員值班，值班人員最后一個(gè)離開(kāi)，負(fù)責(zé)檢查實(shí)驗(yàn)室的水、電、火及門(mén)窗的安全，檢查儀器是否關(guān)閉，是否處于正常運(yùn)行狀態(tài)，并做好。
4.加強(qiáng)教育：結(jié)合發(fā)生的案例，定期對(duì)學(xué)生進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室安全教育；在可能存在危險(xiǎn)的區(qū)域標(biāo)記危險(xiǎn)警示；在實(shí)驗(yàn)室醒目位置懸掛實(shí)驗(yàn)室安全管理?xiàng)l例；對(duì)可能出現(xiàn)的常見(jiàn)危險(xiǎn)情況進(jìn)行演練，加強(qiáng)對(duì)滅火器使用，提升應(yīng)對(duì)突發(fā)狀況的能力；學(xué)會(huì)割傷、燙傷的急救方法，在實(shí)驗(yàn)室設(shè)立專(zhuān)門(mén)的急救箱。
四、小結(jié)
實(shí)驗(yàn)室安全是微生物科研實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行研究的保障，也是長(zhǎng)期以來(lái)容易被忽視的問(wèn)題。隨著實(shí)驗(yàn)室人員和承擔(dān)的科研項(xiàng)目越來(lái)越多，實(shí)驗(yàn)室儀器的種類(lèi)和數(shù)量大量增加，使實(shí)驗(yàn)室的安全和管理問(wèn)題日益突出。安全有序的實(shí)驗(yàn)環(huán)境是實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的保證。微生物科研實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該牢記始終把安全問(wèn)題放在第一位，按照相關(guān)的生物安全標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范，建立并完善實(shí)驗(yàn)室安全管理制度和規(guī)范微生物安全操作，加強(qiáng)對(duì)學(xué)生的安全教育，并結(jié)合本實(shí)驗(yàn)室本身的情況及時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行規(guī)范和調(diào)整，避免實(shí)驗(yàn)室安全事故的發(fā)生。
參考文獻(xiàn)：
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中圖分類(lèi)號(hào)：R197.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-5336（2013）16-0064-02
現(xiàn)今社會(huì)，在社會(huì)熱點(diǎn)中，微生物及其產(chǎn)生的各類(lèi)毒素引發(fā)的污染備受關(guān)注。因此，做好微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制對(duì)監(jiān)控食品安全至關(guān)重要。本文就微生物實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量控制進(jìn)行探討。
1 專(zhuān)業(yè)人員的素質(zhì)
專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員在微生物檢驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)當(dāng)具有較豐富的專(zhuān)業(yè)知識(shí)和較強(qiáng)的分析判斷能力。同時(shí)要有良好的職業(yè)道德，有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鲬B(tài)度和高度的責(zé)任心；檢驗(yàn)結(jié)果應(yīng)當(dāng)準(zhǔn)確、可靠，因此加強(qiáng)檢驗(yàn)人員質(zhì)量管理教育和技術(shù)業(yè)務(wù)的培訓(xùn)顯得及其必要?？啥ㄆ诮M織專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行培訓(xùn)和進(jìn)修學(xué)習(xí)，促使檢驗(yàn)人員對(duì)新理論、新技術(shù)、新方法及時(shí)掌握，培訓(xùn)工作應(yīng)作為持久的、長(zhǎng)效的專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員提高素質(zhì)的重要工作內(nèi)容。將定期考核納入實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部管理體系，作為檢驗(yàn)員檢驗(yàn)?zāi)芰皹?biāo)準(zhǔn)熟練程度的一個(gè)驗(yàn)收程序。
2 儀器設(shè)備的控制
微生物實(shí)驗(yàn)室主要檢驗(yàn)用設(shè)備有：生物安全柜、冰箱、培養(yǎng)箱、高壓滅菌器、凈化臺(tái)、顯微鏡、蒸餾設(shè)備等。儀器設(shè)備應(yīng)嚴(yán)格按照出廠提供的有關(guān)規(guī)定和方法正確使用，同時(shí)注意儀器設(shè)備的質(zhì)量控制，制定相關(guān)質(zhì)量管理文件，嚴(yán)格對(duì)照其中儀器設(shè)備管理程序的規(guī)定執(zhí)行。
2.1 儀器的采購(gòu)
購(gòu)置儀器過(guò)程中，須對(duì)其技術(shù)指標(biāo)、性能進(jìn)行進(jìn)行考察了解，并經(jīng)過(guò)有效論證后方能采購(gòu)。采購(gòu)貴重、大型設(shè)備儀器時(shí)，供貨方應(yīng)對(duì)儀器進(jìn)行安裝、調(diào)試、核準(zhǔn)。確認(rèn)所有技術(shù)條件符合規(guī)定記錄驗(yàn)收?qǐng)?bào)結(jié)果后，即可交付使用，使用過(guò)程中須明確保管人。
2.2 儀器設(shè)備的建檔備案
對(duì)儀器設(shè)備進(jìn)行建檔備案，建立儀器設(shè)備卡（應(yīng)標(biāo)明設(shè)備名稱(chēng)、編號(hào)、型號(hào)、生產(chǎn)廠名稱(chēng)、產(chǎn)地和價(jià)款、采購(gòu)時(shí)間、啟用時(shí)間、出廠編號(hào)等），歸整使用說(shuō)明書(shū)、 檢定/校準(zhǔn)證書(shū)、合格證和使用維護(hù)記錄等至統(tǒng)一檔案盒內(nèi)管理保存。
2.3 儀器設(shè)備的檢定和校準(zhǔn)
定期對(duì)強(qiáng)制性檢定的儀器和設(shè)備進(jìn)行校準(zhǔn)，檢定的計(jì)量部門(mén)須具有相應(yīng)的資歷，儀器檢定合格后方可使用。儀器被移動(dòng)過(guò)、維修過(guò)或使用一段時(shí)間后，檢測(cè)結(jié)果會(huì)造成一定影響，這時(shí)要對(duì)儀器進(jìn)行期間核查。定期按儀器自校規(guī)程對(duì)不屬于強(qiáng)檢的儀器進(jìn)行自校，據(jù)儀器情況貼"合格”“準(zhǔn)用”或“停用”標(biāo)簽。
3 試劑、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、質(zhì)控物的質(zhì)量控制
3.1 培養(yǎng)基的質(zhì)控
（1）培養(yǎng)基的購(gòu)置與保存。購(gòu)置培養(yǎng)基時(shí)注意選擇質(zhì)量和信譽(yù)好的公司，要購(gòu)買(mǎi)質(zhì)量可靠、未過(guò)期、品質(zhì)優(yōu)良的培養(yǎng)基。
微生物實(shí)驗(yàn)室收到培養(yǎng)基后，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有培養(yǎng)基的收貨記錄，記錄詳單應(yīng)包括生產(chǎn)商家培養(yǎng)基的名稱(chēng)、接收日期、批號(hào)、有效期、包裝及其完整性。培養(yǎng)基在使用前，應(yīng)有專(zhuān)人對(duì)培養(yǎng)基經(jīng)過(guò)驗(yàn)證合格，不同批次的培養(yǎng)基應(yīng)做實(shí)驗(yàn)對(duì)照。培養(yǎng)基一般應(yīng)貯存于陰涼干燥處，避免強(qiáng)光直射。有特別說(shuō)明的培養(yǎng)基須嚴(yán)格按照廠商提供的要求進(jìn)行貯存和使用。
（2）培養(yǎng)基的使用。嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)操作手冊(cè)規(guī)定對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行配制操作。記錄配制量與操作者、日期，并于包裝上標(biāo)明使用期限，定期做質(zhì)量檢查，以保證其有效性。檢驗(yàn)人員應(yīng)熟練掌握高壓蒸汽滅菌技術(shù)，按照相應(yīng)的壓力和溫度要求對(duì)實(shí)驗(yàn)用器材（培養(yǎng)皿、三角瓶、移液管等）及培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌處理。含糖類(lèi)培養(yǎng)基的滅菌應(yīng)注意控制在允許溫度范圍內(nèi)，以避免營(yíng)養(yǎng)成分的喪失。培養(yǎng)基配制用水主要為蒸餾水、離子水或經(jīng)處理后無(wú)干擾劑和抑制劑的水。配置用水的電阻率應(yīng)300000Ω/cm（25℃的情況下）以上，重金屬含量0.05mg/L以下。培養(yǎng)基溶解后，應(yīng)注意調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值符合相應(yīng)要求[2]。定期檢查培養(yǎng)基的顏色和透明度，一旦發(fā)現(xiàn)異常，則舍棄不用。每批培養(yǎng)基均應(yīng)做無(wú)菌試驗(yàn)和已知菌株對(duì)照試驗(yàn)，確保培養(yǎng)基的配制正確、消毒達(dá)到要求以及操作過(guò)程未受污染。如因原料保管不善而變質(zhì)或過(guò)期的試劑應(yīng)棄去。
3.2 試劑及血清制品的質(zhì)量控制
（1）實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，按照要求選用不同等級(jí)試劑。試劑須按照相關(guān)要求定期更換，部分試劑要求現(xiàn)用現(xiàn)配。配好各種試劑后，填寫(xiě)標(biāo)簽均注明試劑名稱(chēng)、配制日期、有效期、配制者及配置日期，并作好相關(guān)記錄。為確保試劑的準(zhǔn)確可靠性，定期應(yīng)做試劑性能測(cè)試，具體間隔時(shí)間視試劑的穩(wěn)定性和使用頻率而定。如氧化酶試劑須每次使用前測(cè)試，靛基質(zhì)試劑相對(duì)穩(wěn)定可每周進(jìn)行1次測(cè)試。每次配制好的染色液應(yīng)當(dāng)進(jìn)行檢測(cè)，常用染色液（如革蘭染液）每周檢測(cè)1次，不常用染色液在每次使用前[1]。為確保試劑穩(wěn)定性，選用適當(dāng)?shù)馁A存方法對(duì)試劑貯存。如：氧化酶試劑一般置于棕色瓶于4℃冰箱保存。
（2）酶、抗血清等生物制品具有生物活性，應(yīng)該注意其有效期，過(guò)期則舍棄不用。按說(shuō)明要求進(jìn)行診斷血清的使用和保存，一般要求置于4℃冰箱貯存。在操作過(guò)程中要盡快取用，暴露室溫過(guò)久則易造成其失效。操作前，尤其要注意這些生物制品的有效期和效價(jià)。一般第一次使用時(shí)，須用相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)菌株檢查抗血清的有效性，常規(guī)工作中每月對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)1次。如出現(xiàn)任何顏色的改變或混濁，即不能使用。
4 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境控制
實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)在室內(nèi)光線，空氣流通，設(shè)施布局等方面應(yīng)符合要求，不能對(duì)檢測(cè)結(jié)果的可靠性、有效性和準(zhǔn)確性造成干擾，同時(shí)還要起到對(duì)工作人員的自身安全和儀器一定的保護(hù)作用。微生物檢驗(yàn)應(yīng)在潔凈區(qū)（包括超凈工作臺(tái)或潔凈實(shí)驗(yàn)室）進(jìn)行，潔凈區(qū)應(yīng)有明顯標(biāo)示。無(wú)菌室潔凈程度要達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)要求，每次使用前需要紫外線燈消毒45min以上，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的檢驗(yàn)方法，定期對(duì)紫外線空氣消毒效果進(jìn)行測(cè)定。微生物實(shí)驗(yàn)室的空氣質(zhì)量、溫濕度要每天進(jìn)行監(jiān)測(cè)，并做好記錄，以確保檢測(cè)結(jié)果的可靠性、有效性和準(zhǔn)確性。
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【中圖分類(lèi)號(hào)】R9【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1671-8801（2012）12-0143-01
在微生物檢驗(yàn)的過(guò)程中，如何避免實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的可變因素對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，評(píng)估檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性、比較結(jié)果和具體設(shè)定的目標(biāo)之間的差距，保證結(jié)果的真實(shí)、可靠和可重復(fù)性，是質(zhì)量控制的主要目的。
實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制包含三部分內(nèi)容，即室內(nèi)質(zhì)量控制、質(zhì)量保證、室間質(zhì)量控制。
1微生物實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)量控制
是根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室實(shí)際情況設(shè)計(jì)的質(zhì)量控制系統(tǒng)，僅用于對(duì)本實(shí)驗(yàn)室的工作進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)測(cè)和評(píng)價(jià)。包括對(duì)實(shí)驗(yàn)人員、實(shí)驗(yàn)步驟、儀器、設(shè)備、培養(yǎng)基、試劑、環(huán)境設(shè)施的監(jiān)控。室內(nèi)質(zhì)量控制是檢驗(yàn)結(jié)果精確可靠的核心和依據(jù)。
實(shí)驗(yàn)人員及培訓(xùn)：
1.1實(shí)驗(yàn)人員。由于微生物學(xué)檢驗(yàn)是一種復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)，從事微生物學(xué)檢驗(yàn)的技術(shù)人員，必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的基礎(chǔ)訓(xùn)練和教育，包括微生物學(xué)、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)等知識(shí)的學(xué)習(xí)以及專(zhuān)業(yè)化的實(shí)驗(yàn)技能培訓(xùn)，并通過(guò)專(zhuān)業(yè)技術(shù)考核，合格后才能持證上崗[1]。除此之外，特別需要培養(yǎng)的是檢驗(yàn)人員高度的責(zé)任心和嚴(yán)謹(jǐn)求實(shí)的科學(xué)態(tài)度。
1.2專(zhuān)業(yè)指導(dǎo)資料?，F(xiàn)在是信息和科技飛速發(fā)展的時(shí)代，技術(shù)更新非?？?，要想把握檢驗(yàn)技術(shù)發(fā)展的脈搏，跟上知識(shí)發(fā)展的步伐，除了掌握作業(yè)指導(dǎo)書(shū)的內(nèi)容，還必須大量閱讀專(zhuān)業(yè)參考書(shū)，及時(shí)汲取新知識(shí)，更新方法。
1.3質(zhì)控物的要求。
1.3.1標(biāo)準(zhǔn)菌（毒）株的來(lái)源。標(biāo)準(zhǔn)菌（毒）株必須來(lái)自權(quán)威機(jī)構(gòu)或認(rèn)可部門(mén)[2]，如我國(guó)的衛(wèi)生部藥品生物制品鑒定所菌種保藏中心、美國(guó)菌種保藏中心（ATCC）、英國(guó)國(guó)家菌種保藏中心（NCTC）等。
1.3.2標(biāo)準(zhǔn)菌（毒）株的選擇。應(yīng)根據(jù)每項(xiàng)試驗(yàn)的性質(zhì)的不同和對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株的生物學(xué)性狀的要求，選擇作為質(zhì)量控制的標(biāo)準(zhǔn)菌株。無(wú)論是定性試驗(yàn)還是定量試驗(yàn)，質(zhì)量控制系統(tǒng)要有足夠的靈敏度檢測(cè)出試驗(yàn)中出現(xiàn)的誤差，因此質(zhì)量的監(jiān)測(cè)點(diǎn)必須設(shè)在一個(gè)敏感的位置。這個(gè)敏感點(diǎn)，對(duì)定性試驗(yàn)，應(yīng)在較弱陽(yáng)性的范圍內(nèi)；對(duì)于定量試驗(yàn)，則應(yīng)位于解釋試驗(yàn)結(jié)果的決定性水平附近。
1.3.3標(biāo)準(zhǔn)菌（毒）株的管理。每個(gè)微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立健全嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)菌（毒）株的管理制度[3]，包括標(biāo)準(zhǔn)菌（毒）株的保管制度、請(qǐng)領(lǐng)制度、使用制度、銷(xiāo)毀制度等，并在文件中明確職責(zé)，嚴(yán)防標(biāo)準(zhǔn)（毒）菌株外泄。
1.4質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。
1.4.1培養(yǎng)基的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。通常以細(xì)菌能否在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好或能否形成典型菌落來(lái)衡量?；A(chǔ)培養(yǎng)基要求細(xì)菌不僅能夠生長(zhǎng)，還必須發(fā)育良好并能使細(xì)菌充分表現(xiàn)出其典型的特征。選擇培養(yǎng)基在原則上應(yīng)使用預(yù)期最難生長(zhǎng)的細(xì)菌菌種，并且應(yīng)少量接種（如0.5McFarlang1∶10稀釋接種0.001ml）。要求被抑制的菌種不生長(zhǎng)或生長(zhǎng)較弱，被選擇生長(zhǎng)的菌種生長(zhǎng)良好。生化培養(yǎng)基，用作質(zhì)量控制的菌種應(yīng)包括該生化反應(yīng)為陽(yáng)性反應(yīng)和陰性反應(yīng)的細(xì)菌。
1.4.2試劑和染色液的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。試劑和染色液必須注明配制或購(gòu)入的日期；按試劑要求的貯存條件貯存并在有效期內(nèi)使用；對(duì)穩(wěn)定性較差的試劑，必須在試驗(yàn)的同時(shí)進(jìn)行陽(yáng)性和陰性對(duì)照試驗(yàn)。
1.4.3抗血清的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)?？寡宓膩?lái)源必須可靠，并按制造商的使用說(shuō)明使用與保存。在每次使用前應(yīng)觀察是否澄清透明，任何混濁與顏色改變，應(yīng)視為雜菌污染，不應(yīng)使用。
1.5儀器監(jiān)控。
1.5.1高壓滅菌器和干熱滅菌器。新購(gòu)買(mǎi)的滅菌器必須進(jìn)行滅菌性能檢測(cè)，以后定期（每月1次）檢測(cè)。大容量滅菌器還應(yīng)在不同部位放置化學(xué)指示卡以全面評(píng)價(jià)滅菌性能。滅菌效果監(jiān)控使用生物指示劑嗜熱脂肪芽孢桿菌ATCC7953、12980的培養(yǎng)液或菌片（含菌量為5×10 6/片）。
1.5.2培養(yǎng)箱、冰箱、水浴箱。在每日工作開(kāi)始和結(jié)束時(shí)記錄溫度，定期檢定和校正溫度計(jì)，水浴箱需要定期加水，冰箱需定期除霜。
1.5.3二氧化碳培養(yǎng)箱。須每天檢查箱內(nèi)的CO2含量，可用淋病奈瑟氏菌或腦膜炎奈瑟氏菌等CO2依賴細(xì)菌進(jìn)行生長(zhǎng)試驗(yàn)。
1.5.4厭氧罐或厭氧箱。在罐中或厭氧箱內(nèi)用美藍(lán)或刃天青作為指示劑，無(wú)氧時(shí)均無(wú)色。罐中的催化劑鈀顆粒須經(jīng)常置160℃1.5h重新活化。
1.5.5生物安全柜。若需更換濾網(wǎng)，則須由專(zhuān)門(mén)技術(shù)人員進(jìn)行，對(duì)紫外線必須每3個(gè)月檢查1次消毒性能。
1.6環(huán)境設(shè)施的監(jiān)控。環(huán)境設(shè)施（無(wú)菌間、超凈工作臺(tái)或?qū)恿鳚崈羰遥?duì)衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量影響較大，應(yīng)定期監(jiān)測(cè)其無(wú)菌效果，以保證其符合樣品檢測(cè)所需的環(huán)境要求。
2微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的保證
質(zhì)量保證是實(shí)驗(yàn)室報(bào)告的質(zhì)量得到保證的全過(guò)程，是指為達(dá)到既定的質(zhì)量水準(zhǔn)所采取的一切必要措施。在質(zhì)量控制項(xiàng)目中設(shè)計(jì)的步驟不能只限于實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)操作步驟，收集合適的樣本，采取正確的保存方式，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)送往實(shí)驗(yàn)室等都將影響檢測(cè)的質(zhì)量。
3微生物實(shí)驗(yàn)室室間質(zhì)量控制
是由實(shí)驗(yàn)室以外的組織或機(jī)構(gòu)對(duì)其已達(dá)到的質(zhì)量水準(zhǔn)進(jìn)行的評(píng)價(jià)。通過(guò)室間質(zhì)量評(píng)價(jià)可以考察實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，并檢查和評(píng)估不同實(shí)驗(yàn)室操作的差異。
3.1盲點(diǎn)實(shí)驗(yàn)。考核組織者可不定期將標(biāo)準(zhǔn)菌株及模擬標(biāo)本混合，送到受試實(shí)驗(yàn)室，進(jìn)行未知樣本的質(zhì)量控制，可以比較準(zhǔn)確地反映受控實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際水平和能力。
3.2實(shí)驗(yàn)室室間質(zhì)量考核的作用。是對(duì)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)水平的中和判斷，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控難以發(fā)現(xiàn)的偏差和系統(tǒng)誤差，有利于誤差的糾正和消除，既提高了檢驗(yàn)人員的操作水平，也增強(qiáng)了檢驗(yàn)人員分析和解決問(wèn)題的能力，是實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證的重要工具。
4討論
疾病預(yù)防控制中心微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)參與室內(nèi)全面質(zhì)量控制，并根據(jù)自身的特點(diǎn)設(shè)置質(zhì)控物，對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中影響檢測(cè)質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)進(jìn)行控制和監(jiān)督，以發(fā)現(xiàn)誤差并及時(shí)改進(jìn)，確保檢測(cè)結(jié)果的精確性。此外，實(shí)驗(yàn)室還應(yīng)定期參加實(shí)驗(yàn)室間的考核和能力驗(yàn)證活動(dòng)，并了解本實(shí)驗(yàn)室在本地區(qū)或全國(guó)實(shí)驗(yàn)室中的技術(shù)地位，有利于實(shí)驗(yàn)室技術(shù)水平的提高。因此一個(gè)常規(guī)實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)該盡可能參加范圍更加廣泛的室間質(zhì)量控制評(píng)定活動(dòng)。疾病預(yù)防控制中心微生物實(shí)驗(yàn)室的室間質(zhì)量控制評(píng)價(jià)，還應(yīng)增加對(duì)各參加考核的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行常規(guī)性的檢查，如質(zhì)量控制的各種制度制定情況、執(zhí)行情況，以及未知標(biāo)本的盲點(diǎn)質(zhì)量控制等內(nèi)容，以使室間質(zhì)量評(píng)價(jià)工作更加科學(xué)和規(guī)范。
參考文獻(xiàn)
伴隨社會(huì)經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展，現(xiàn)代醫(yī)療技術(shù)得到顯著提高，院內(nèi)感染監(jiān)測(cè)成為醫(yī)學(xué)發(fā)展的重要內(nèi)容。在院內(nèi)領(lǐng)導(dǎo)的高度關(guān)心和重視下，院內(nèi)感染監(jiān)控工作從組織落實(shí)到制定嚴(yán)格管理制度，采取的措施具有多樣化，在臨床中展開(kāi)必要的監(jiān)測(cè)，從而使院內(nèi)感染監(jiān)測(cè)工作逐漸走向科學(xué)化、制度化、規(guī)范化。醫(yī)院是病患最集中的場(chǎng)所，各種各樣的病患每天都聚集到醫(yī)院等待治療，因此，院內(nèi)環(huán)境極易受到病原微生物的感染，我院為此成立感染監(jiān)測(cè)科和微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室，以便適應(yīng)全國(guó)各級(jí)醫(yī)院對(duì)院內(nèi)感染防控與監(jiān)測(cè)工作的需求。文章對(duì)在院內(nèi)感染監(jiān)測(cè)中微生物實(shí)驗(yàn)室設(shè)立的重要性進(jìn)行分析、探討，報(bào)道如下。
1按照有關(guān)規(guī)定配合院內(nèi)感染監(jiān)測(cè)科做好感染預(yù)防與監(jiān)控工作
微生物實(shí)驗(yàn)室在臨床檢驗(yàn)中最主要的工作就是對(duì)引發(fā)院內(nèi)感染的病原菌類(lèi)型進(jìn)行確定。按照《消毒管理?xiàng)l例》、《醫(yī)院感染管理辦法》和其它預(yù)防院內(nèi)感染的實(shí)施策略，建立抗菌藥物合理使用條例，細(xì)菌檢測(cè)制度等。對(duì)各科室感染條例執(zhí)行情況進(jìn)行監(jiān)督，和被監(jiān)測(cè)科中的醫(yī)護(hù)人員定期進(jìn)行討論、交流，按照監(jiān)測(cè)具體數(shù)據(jù)向各監(jiān)測(cè)科提出科學(xué)意見(jiàn)。微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室委派專(zhuān)業(yè)人員配合院內(nèi)感染檢測(cè)工作，同時(shí)定期參加國(guó)家級(jí)院內(nèi)感染培訓(xùn)，和院內(nèi)感染科一起監(jiān)督相關(guān)條款，并將所有規(guī)定落到實(shí)處。
2監(jiān)測(cè)方法與內(nèi)容
2.1監(jiān)測(cè)方法 在院內(nèi)各病房及有關(guān)科室中都配備一名專(zhuān)業(yè)感染監(jiān)測(cè)控制人員，每月定期進(jìn)行一次檢查。同時(shí)在微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室中展開(kāi)細(xì)菌監(jiān)測(cè)工作，對(duì)院內(nèi)消毒不合格的內(nèi)容徹底清查，找到消毒不合格原因和存在的問(wèn)題，不僅能防止類(lèi)似事件再次出現(xiàn)，同時(shí)還能為院內(nèi)感染監(jiān)控提供可靠數(shù)據(jù)。倘若消毒不合要求，應(yīng)立即重新消毒，一切合格后才能繼續(xù)使用，防止院內(nèi)產(chǎn)生交叉感染。提高重點(diǎn)科室環(huán)境與日常用品的感染監(jiān)測(cè)工作，包括：胃鏡科、口腔科、供應(yīng)室、產(chǎn)房、檢驗(yàn)科、外科等，以便傳染源的及早發(fā)現(xiàn)。按照微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的監(jiān)測(cè)結(jié)果，定期向院內(nèi)感染科總結(jié)、匯報(bào)，通過(guò)分析感染病原菌，確定下一步工作重點(diǎn)，為今后工作制定合理計(jì)劃。
2.2監(jiān)測(cè)內(nèi)容 微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的監(jiān)測(cè)內(nèi)容主要有以下幾點(diǎn)：①環(huán)境監(jiān)測(cè)，包括：醫(yī)護(hù)人員的手、空氣、高壓滅菌裝置、物品表面、醫(yī)療器械等物品的細(xì)菌量，避免醫(yī)療物品、醫(yī)療器械和醫(yī)護(hù)人員的手被病原菌污染后，傳染給病患；②提高一次性醫(yī)療用品的監(jiān)測(cè)管理力度，對(duì)其質(zhì)量嚴(yán)格把控；加強(qiáng)重點(diǎn)科室致病菌的監(jiān)測(cè)，包括：金色葡萄球菌、沙門(mén)菌屬、化膿菌等；③一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)菌異?；蚴钱a(chǎn)生流行趨勢(shì)，應(yīng)向有關(guān)科室及時(shí)通報(bào)，并向院內(nèi)感染監(jiān)測(cè)科匯報(bào)，采取相應(yīng)措施，阻斷病原菌傳播途徑，做好預(yù)防控制工作，保護(hù)易感染人群，努力為病患建立良好醫(yī)療環(huán)境，同時(shí)提升醫(yī)護(hù)質(zhì)量；④減少院內(nèi)感染發(fā)病率，使用有效措施保護(hù)病患、醫(yī)護(hù)人員以及社會(huì)民眾的健康。
3提高病原菌耐藥性的監(jiān)測(cè)
在微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室中鑒定分離病原菌對(duì)抗感染治療與細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)具有重要意義，所以，要將質(zhì)量保證制度完善，應(yīng)提高與臨床治療之間的配合。在使用美國(guó)臨床檢測(cè)試驗(yàn)（NCCLS）標(biāo)準(zhǔn)對(duì)藥物敏感實(shí)驗(yàn)進(jìn)行規(guī)范，藥物敏感實(shí)驗(yàn)中使用的抗生素一定要實(shí)用、科學(xué)、經(jīng)濟(jì)、合理，提高微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室在院內(nèi)感染監(jiān)測(cè)工作中的職能，正確評(píng)價(jià)并解讀實(shí)驗(yàn)結(jié)果，及時(shí)公布院內(nèi)病原菌的耐藥性，為抗生素的臨床使用提供科學(xué)依據(jù)。
4將細(xì)菌耐藥性的檢測(cè)結(jié)果定期在院內(nèi)公布，同時(shí)對(duì)細(xì)菌耐藥性實(shí)施網(wǎng)絡(luò)管理
熟練掌握美國(guó)臨床檢測(cè)試驗(yàn)（NCCLS）標(biāo)準(zhǔn)，這是判斷抗菌藥物敏感實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性與準(zhǔn)確性的重要內(nèi)容?，F(xiàn)階段，選取治療感染性疾病的抗菌藥物在大多數(shù)情況下，醫(yī)生是按照經(jīng)驗(yàn)選擇的，但是經(jīng)驗(yàn)選藥也需要流行病資料和循征醫(yī)學(xué)的支持，將細(xì)菌耐藥性的監(jiān)測(cè)結(jié)果定期在院內(nèi)公開(kāi)，統(tǒng)計(jì)并分析重癥監(jiān)護(hù)病房等重要科室中常見(jiàn)病原菌的耐藥與分布情況，對(duì)經(jīng)驗(yàn)選取抗生素、提升重癥感染性疾病救治成功率幫助很大。分區(qū)域并長(zhǎng)時(shí)間建立耐藥監(jiān)測(cè)網(wǎng)，經(jīng)過(guò)研究分析，很容易得出本區(qū)域耐藥病菌發(fā)展趨勢(shì)和抗生藥物的耐藥性，有助于制定本區(qū)域抗生素藥物的使用，同時(shí)對(duì)經(jīng)驗(yàn)用藥具有十分重要的意義。
5結(jié)論
目前，我國(guó)臨床治療中微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的建立和國(guó)際先進(jìn)水平相比依然存在很大差距，和我國(guó)院內(nèi)病原菌以及感染性疾病的耐藥性存在嚴(yán)重不相適應(yīng)的現(xiàn)狀；并且，臨床治療有關(guān)部門(mén)以及檢驗(yàn)科有關(guān)人員對(duì)微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的日常運(yùn)作、軟件與硬件建設(shè)缺少重視度。在各種不利條件下，微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)積極幫助臨床做好院內(nèi)感染性疾病的治療與診斷工作，并將其當(dāng)作最主要目標(biāo)執(zhí)行。這樣微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室才能更好的發(fā)展，為院內(nèi)感染性疾病的監(jiān)測(cè)、預(yù)防、治療、控制做出更多貢獻(xiàn)。
參考文獻(xiàn)：
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【關(guān)鍵詞】：食品微生物檢測(cè)質(zhì)量控制
隨著人們生活水平的不斷提高，食品安全問(wèn)題逐漸引起各國(guó)政府、公眾的重視。尤其近年來(lái)，隨著瘦肉精、三聚氰胺、毒膠囊、皮革奶等食品安全事件不斷曝光1，食品安全問(wèn)題更成為社會(huì)各層面關(guān)注的焦點(diǎn)。食品安全問(wèn)題中，微生物污染造成的食源性疾病仍是世界食品安全中最突出的問(wèn)題2。微生物指標(biāo)不僅可用于對(duì)終產(chǎn)品的衛(wèi)生監(jiān)督管理，而且也是食品生產(chǎn)、運(yùn)輸和銷(xiāo)售等全過(guò)程衛(wèi)生質(zhì)量控制的監(jiān)測(cè)手段3。為了提高食品的衛(wèi)生質(zhì)量，保證消費(fèi)者飲食安全，食品微生物檢驗(yàn)的方法由傳統(tǒng)的形態(tài)結(jié)構(gòu)、血清試管凝聚試驗(yàn)等逐漸發(fā)展到近年來(lái)的分子水平檢驗(yàn)，并向儀器化、自動(dòng)化、標(biāo)準(zhǔn)化方向發(fā)展4。但由于影響食品微生物檢測(cè)結(jié)果的因素復(fù)雜多樣，所以對(duì)食品微生物檢驗(yàn)的各個(gè)環(huán)節(jié)加以合理有效的質(zhì)量控制，是提高食品微生物檢驗(yàn)結(jié)果，保證食品安全的有效措施。
一、 樣品采集與處理
1、 采樣
食品微生物檢驗(yàn)中，樣品的采集必須具有代表性。ICMSF制定的食品微生物學(xué)分析采樣方法5，目前已在國(guó)內(nèi)外被逐步推廣采用。應(yīng)嚴(yán)格遵循統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，根據(jù)具體情況制定相應(yīng)的抽樣方案。一般應(yīng)采取完整未開(kāi)封的樣品，如是散裝樣品，采樣必須在無(wú)菌操作下進(jìn)行。采樣的用具，應(yīng)預(yù)先經(jīng)滅菌處理。樣品的數(shù)量應(yīng)滿足檢驗(yàn)、復(fù)驗(yàn)、備查的需要。每個(gè)樣品要注明其詳細(xì)信息。
2、 送樣
有質(zhì)量保證的樣品是獲得正確檢驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)。樣品應(yīng)盡快送到食品微生物檢驗(yàn)室（
3、 收樣和處理
樣品送達(dá)實(shí)驗(yàn)室后，先判定樣品是否已經(jīng)變質(zhì)和是否滿足檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。瓶裝檢樣處理時(shí)可用點(diǎn)燃的乙醇棉球燒灼瓶口滅菌，用石碳酸紗布蓋好，再用滅菌開(kāi)瓶器將蓋啟開(kāi)。袋裝樣品應(yīng)用75%乙醇棉球消毒袋口后進(jìn)行檢驗(yàn)。固態(tài)樣品用均質(zhì)器以無(wú)菌操作方法處理樣品，調(diào)節(jié)均質(zhì)器均質(zhì)時(shí)間處理不同種類(lèi)的樣品。微生物培養(yǎng)時(shí)要準(zhǔn)確記錄溫度、氣體濃度等參數(shù)，使其嚴(yán)格符合檢驗(yàn)程序要求6。原始記錄應(yīng)及時(shí)記載，原始記錄格式要求有足夠的信息量，并具有可朔源性。
二、 實(shí)驗(yàn)人員素質(zhì)與能力
實(shí)驗(yàn)人員的素質(zhì)與能力影響到最終的檢驗(yàn)結(jié)果。食品微生物學(xué)檢驗(yàn)人員應(yīng)：有合法的上崗資質(zhì)；具有多方面的專(zhuān)業(yè)技術(shù)知識(shí)7；掌握微生物學(xué)的有關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)；掌握并正確理解國(guó)家食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)方法、食品的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及本企業(yè)的企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，熟悉標(biāo)準(zhǔn)化法的相關(guān)知識(shí)；熟悉計(jì)量學(xué)的基本知識(shí)、計(jì)量法令和法規(guī)及質(zhì)量保證體系知識(shí)；熟悉食品的生產(chǎn)工藝；及時(shí)主動(dòng)更新自己的知識(shí)。
三、 食品微生物檢驗(yàn)過(guò)程
1、 檢驗(yàn)方法
食品微生物檢驗(yàn)必須依據(jù)現(xiàn)行有效的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及衛(wèi)生行政部門(mén)頒布的檢驗(yàn)方法進(jìn)行8。對(duì)于檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的變化，一般都有約定成俗的經(jīng)驗(yàn)性規(guī)定。但是如何控制實(shí)際工作中“靈活性”不至于變成“非法性”，需要檢驗(yàn)人員自主識(shí)別。
2、 檢驗(yàn)環(huán)境
微生物檢驗(yàn)室是進(jìn)行食品微生物學(xué)檢驗(yàn)的地方，應(yīng)單獨(dú)設(shè)置，操作區(qū)與辦公區(qū)應(yīng)分開(kāi)，避免室間污染和實(shí)驗(yàn)室感染發(fā)生。無(wú)菌室要設(shè)有套間或緩沖間，最好設(shè)有推拉門(mén)，以防止空氣振動(dòng)蕩。經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后的培養(yǎng)物，經(jīng)無(wú)害化處理后方可排放、洗刷。對(duì)染菌物品及廢物，應(yīng)經(jīng)過(guò)消毒滅菌后才可清洗或廢棄，防止污染環(huán)境8。
3、 儀器和設(shè)備
微生物檢驗(yàn)室應(yīng)配備充足的檢驗(yàn)工作需要的儀器、設(shè)備和器材。儀器設(shè)備計(jì)量器具使用前應(yīng)經(jīng)計(jì)量鑒定部門(mén)鑒定合格后方可使用；儀器設(shè)備量具的量程、精確度等，要符合檢測(cè)項(xiàng)目的相應(yīng)要求；嚴(yán)格按操作規(guī)程要求使用，并做好運(yùn)行檢查及儀器維護(hù)。
4、 培養(yǎng)基和試劑
購(gòu)置培養(yǎng)基和試劑時(shí)要求供應(yīng)商提品質(zhì)控證書(shū)。培養(yǎng)基和試劑使用前首先通過(guò)外觀、批號(hào)、PH值、滅菌要求、選擇性等進(jìn)行初步評(píng)估，還要用陽(yáng)性對(duì)照菌株做質(zhì)控。按照培養(yǎng)基和試劑標(biāo)簽說(shuō)明的貯藏條件保存。不同批號(hào)的培養(yǎng)基和試劑不要混合使用。受潮變質(zhì)的干粉培養(yǎng)基堅(jiān)決不能使用。自配的培養(yǎng)基要嚴(yán)格按照配制標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行配制和保存，保存培養(yǎng)基配制記錄。
5、 確證試驗(yàn)
做平行樣，保證結(jié)果的可比性；設(shè)立空白對(duì)照，防止其它污染而導(dǎo)致的結(jié)果不準(zhǔn)確；設(shè)計(jì)適當(dāng)?shù)馁|(zhì)控頻率，進(jìn)行質(zhì)控試驗(yàn)。將質(zhì)控菌株與常規(guī)工作一起進(jìn)行，不能為質(zhì)控菌株設(shè)計(jì)單獨(dú)操作程序，更不能專(zhuān)人專(zhuān)做。當(dāng)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)菌株的內(nèi)在敏感性發(fā)生改變時(shí)要更換新的菌種。
6、 檢驗(yàn)報(bào)告
檢測(cè)報(bào)告應(yīng)準(zhǔn)確、清晰、明確、客觀地反應(yīng)檢驗(yàn)結(jié)果，可以運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)知識(shí)對(duì)誤差進(jìn)行處理，并參照一定的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)食品微生物的數(shù)量和質(zhì)量進(jìn)行系統(tǒng)性的評(píng)價(jià)。檢驗(yàn)報(bào)告需經(jīng)有資格的審核人員核查簽字，并加蓋印章后生效。
四、 參加盲樣考核
積極參加上級(jí)業(yè)務(wù)部門(mén)下發(fā)的盲樣考核，即進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)和中心質(zhì)量管理辦公室組織的人員比對(duì)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。
總之，隨著社會(huì)的發(fā)展和科技進(jìn)步，食品微生物檢驗(yàn)技術(shù)正向高效率、高標(biāo)準(zhǔn)、高精度和高靈敏度的方向發(fā)展，特別是近年來(lái)興起的基因芯片技術(shù)及自動(dòng)微生物檢測(cè)系統(tǒng)。與此同時(shí)，更加嚴(yán)格的質(zhì)量控制方法必須伴隨檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展而發(fā)展，從而得出盡可能準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果，更好的為人類(lèi)公共衛(wèi)生、食品安全、營(yíng)養(yǎng)健康與疾病預(yù)防等做出貢獻(xiàn)。
參考文獻(xiàn)
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在全國(guó)范圍內(nèi)普遍存在的造成醫(yī)院感染的因素主要包括：第一，醫(yī)院抗生素的不合理使用，抗生素的使用劑量、方法、時(shí)間等都達(dá)不到標(biāo)準(zhǔn)要求，長(zhǎng)期這樣下去，藥量不足，血藥濃度過(guò)低，雖然可以抑制體內(nèi)病原菌的生長(zhǎng)，但對(duì)于原本就存在于身體內(nèi)的病原菌根本就不能徹底的將其清除。隨著時(shí)間的推移，體內(nèi)的病原菌就會(huì)在人體內(nèi)生長(zhǎng)繁殖。第二，慢性消耗性疾病和癌癥病人，由于自身免疫力低下，人體的某些部位的正常菌群就有可能導(dǎo)致病人自身感染。第三，在醫(yī)院內(nèi)很多儀器和內(nèi)窺鏡的使用，消毒不嚴(yán)格也有可能導(dǎo)致醫(yī)院感染，增加醫(yī)院感染的機(jī)會(huì)。第四，血液透析時(shí)透析液不合格，消毒液的濃度控制不合格等這些情況都會(huì)導(dǎo)致醫(yī)院感染。為此微生物實(shí)驗(yàn)室在醫(yī)院感染控制中的重要性主要體現(xiàn)在：
一、正確鑒定醫(yī)院感染中所涉及的微生物
微生物實(shí)驗(yàn)室對(duì)于醫(yī)院感染控制起到了不可忽視的作用。其中最重要的一個(gè)作用：正確鑒定醫(yī)院感染中所涉及的微生物。引起醫(yī)院感染的微生物有以下幾個(gè)特點(diǎn)：條件致病菌；耐藥性；某些微生物能夠在體外生長(zhǎng)繁殖。為了能夠很好的控制醫(yī)院感染，就需要微生物實(shí)驗(yàn)室能夠不斷掌握更多的微生物理論知識(shí)和技術(shù)鑒定水平，正確的分離和鑒定在醫(yī)院感染中所涉及的微生物，爭(zhēng)取在分離過(guò)程中做到標(biāo)準(zhǔn)化，力求做到鑒定分型準(zhǔn)確。微生物實(shí)驗(yàn)室在控制醫(yī)院感染中要定時(shí)采集醫(yī)院環(huán)境標(biāo)本，如病房空氣、醫(yī)療器械、消毒液、工作臺(tái)面、手術(shù)室空氣、處置室空氣等，在采集病人標(biāo)本時(shí)要盡量在抗生素使用前，采集后立即送檢，不同標(biāo)本的處理得當(dāng)，這樣才能提高陽(yáng)性檢出率，對(duì)于醫(yī)院感染起到了很好的控制作用。
二、促進(jìn)安全、和諧醫(yī)院的構(gòu)成
構(gòu)建安全和諧醫(yī)院從根本上來(lái)說(shuō)是在新形勢(shì)下保證醫(yī)院得到更穩(wěn)定發(fā)展的重要前提。在對(duì)構(gòu)建和諧醫(yī)院的推動(dòng)作用中，必須加強(qiáng)微生物實(shí)驗(yàn)室組織的建設(shè)力度，才能增強(qiáng)醫(yī)院的和諧程度。因?yàn)楹椭C醫(yī)院的構(gòu)建離不開(kāi)微生物實(shí)驗(yàn)室的幫助和推動(dòng)，只有微生物實(shí)驗(yàn)室中的工作人員不斷的提高自己的專(zhuān)業(yè)水平，在工作中做好標(biāo)本采集、細(xì)菌鑒定、病原菌質(zhì)控等各項(xiàng)工作，才能從根本上控制醫(yī)院感染。另一方面，醫(yī)院的病原微生物實(shí)驗(yàn)室同時(shí)也對(duì)醫(yī)護(hù)人員的良好醫(yī)德的形成起到了一定程度上的教育作用。要求醫(yī)護(hù)人員對(duì)待病人要持極端負(fù)責(zé)的態(tài)度和精益求精的精神。在工作中要自覺(jué)遵守醫(yī)院的各項(xiàng)有關(guān)規(guī)定和制度，要增強(qiáng)無(wú)菌觀念，在工作中端正自己的工作作風(fēng)，堅(jiān)持正確的立場(chǎng)。只有構(gòu)建安全、和諧的醫(yī)院制度，才能在激烈的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)中求得生存和穩(wěn)定的發(fā)展，使醫(yī)院在社會(huì)上具有良好的名譽(yù)和聲譽(yù)，也才能從更大程度上推動(dòng)醫(yī)院的不斷發(fā)展。
三、定期的反饋實(shí)驗(yàn)室資料，加強(qiáng)對(duì)醫(yī)院感染控制的管理
醫(yī)院微生物實(shí)驗(yàn)室除了能夠正確的鑒定病原菌，促進(jìn)安全、和諧醫(yī)院的構(gòu)成，還定期的反饋微生物實(shí)驗(yàn)室資料，在一定程度上加強(qiáng)了醫(yī)院的感染控制管理。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該將實(shí)驗(yàn)室在標(biāo)本采集和病原菌分離、培養(yǎng)和鑒定的過(guò)程中所獲得的相關(guān)資料、信息等及時(shí)的送到醫(yī)院感染控制科，并加強(qiáng)與臨床科室間的聯(lián)系，通過(guò)這種信息之間的監(jiān)測(cè)，改進(jìn)醫(yī)務(wù)人員的無(wú)菌觀。并對(duì)醫(yī)院感染控制的各種危險(xiǎn)因素采取及時(shí)有效的措施，預(yù)防醫(yī)院感染的發(fā)生。另一方面，醫(yī)院的臨床微生物實(shí)驗(yàn)室在醫(yī)院控制感染管理工作中，起到了一定的加強(qiáng)管理的作用。因?yàn)樵诠ぷ髦胁豢煞裾J(rèn)的是有的微生物實(shí)驗(yàn)室人員，輕視醫(yī)院各項(xiàng)規(guī)章制度，做事不負(fù)責(zé)；管理和檢查工作開(kāi)展的不徹底，未能及時(shí)的發(fā)現(xiàn)潛在的安全隱患并及時(shí)將其消滅在萌芽中。加上種種方面的原因，一直是醫(yī)院控制感染管理工作的一大障礙。因此，醫(yī)院的微生物實(shí)驗(yàn)室對(duì)于規(guī)范職能，加強(qiáng)醫(yī)院感染控制各部門(mén)的嚴(yán)格劃分，促使醫(yī)護(hù)人員在自己的義務(wù)和權(quán)利范圍內(nèi)做好本職工作和行使職權(quán)方面起到一定的控制作用。對(duì)醫(yī)院各種感染的危險(xiǎn)因素加強(qiáng)管理，促使全院醫(yī)護(hù)人員都參與到醫(yī)院感染控制的工作中來(lái)，定期召開(kāi)醫(yī)院各科室主任、護(hù)士長(zhǎng)會(huì)議，對(duì)醫(yī)院每個(gè)階段的感染控制工作的開(kāi)展情況進(jìn)行通報(bào)，使臨床科室在醫(yī)院感染控制工作中都能做到有的放矢。
綜上所述，醫(yī)院的臨床微生物實(shí)驗(yàn)室在醫(yī)院中不僅能夠分離、培養(yǎng)和鑒定院內(nèi)的病原菌，同時(shí)還對(duì)促進(jìn)安全、和諧醫(yī)院的構(gòu)成，定期的反饋實(shí)驗(yàn)室資料，加強(qiáng)對(duì)醫(yī)院感染控制的管理等工作起到了一定的推動(dòng)作用。醫(yī)院感染控制是一項(xiàng)長(zhǎng)期、循序漸進(jìn)、不容忽視的工作，微生物實(shí)驗(yàn)室人員必須不斷提高自己的技術(shù)水平和理論素質(zhì)，推動(dòng)醫(yī)院的感染控制工作走向。
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中圖分類(lèi)號(hào)：G48 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A
Suggestions of Food Microbiology Laboratory Practice Management
FAN Jinshan， LI Jing， CAO Qingguo
（Jiangsu Polytechnic College of Agriculture and Forestry， Jurong， Jiangsu 212400）
Abstract Food microbiological testing of hygiene and safety in the protection of food particularly had a prominent role， so food microbiology laboratory management must also be standardized. From the aspects of management requirements and quality control of food microbiology laboratory， this paper elaborated several standardized management recommendations for the future of scientific management.
Key words food； food microbiology； management
在飛速發(fā)展的二十一世紀(jì)，隨著人們生活水平的提高，人們對(duì)食品已不再是僅僅滿足于飽腹，而是越來(lái)越多的強(qiáng)調(diào)食品的營(yíng)養(yǎng)與衛(wèi)生，因此，食品衛(wèi)生安全受到了越來(lái)越多的關(guān)注，其中食品微生物檢測(cè)就是食品安全中一項(xiàng)必不可少的技術(shù)項(xiàng)目，是保證食品安全衛(wèi)生的重要手段，其中食品微生物檢測(cè)指標(biāo)主要包括菌落總數(shù)、大腸桿菌、致病菌、霉菌和酵母菌這五項(xiàng)。近年來(lái)，我國(guó)衛(wèi)生部每年接到食物中毒事件的報(bào)告在兩百起左右，其中大部分是由于致病菌引起的，因此食品微生物的危害是食品質(zhì)量安全的主要問(wèn)題。另外，由于微生物所具有的生物學(xué)特征，食品很容易遭到微生物的污染，在很多食品加工環(huán)節(jié)中都很難控制，因此食品微生物實(shí)驗(yàn)室的規(guī)范化管理尤為重要。本文就食品微生物實(shí)驗(yàn)室的規(guī)范化管理談?wù)勔韵聨讉€(gè)方面的建議。
1 食品微生物實(shí)驗(yàn)室的管理要求
1.1 食品微生物工作人員的要求
工作人員應(yīng)具有一定資質(zhì)的微生物學(xué)知識(shí)或相近專(zhuān)業(yè)的知識(shí)，能勝任工作所必需的設(shè)備操作和微生物檢測(cè)技能（如無(wú)菌操作、菌落技術(shù)等），定期進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室生物安全等方面的培訓(xùn)，進(jìn)行相關(guān)繼續(xù)教育計(jì)劃（如網(wǎng)絡(luò)視頻培訓(xùn)）。
在操作之前，工作人員必須嚴(yán)格進(jìn)行自身微生物的清潔，防止污染無(wú)菌室，這就要求工作人員必須穿無(wú)菌工作服，戴帽子、口罩，同時(shí)做好手部消毒，禁止吸煙。在操作過(guò)程中，注意不要人員過(guò)多，保持一定的關(guān)注度，這樣才能保證實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確度和精確度。
1.2 食品微生物實(shí)驗(yàn)室的衛(wèi)生要求
實(shí)驗(yàn)室定期清掃制度，按照內(nèi)容分工、區(qū)域包干的形式進(jìn)行衛(wèi)生大掃除，每天一小掃、一周一大掃，并定期做衛(wèi)生大檢查。有專(zhuān)人進(jìn)行帶有致病微生物的消毒滅菌工作，對(duì)實(shí)驗(yàn)中廢棄的培養(yǎng)基和器具要進(jìn)行嚴(yán)格高壓蒸汽滅菌鍋，做好清洗工作，同時(shí)做好相應(yīng)的記錄，最后做好相應(yīng)工作總結(jié)，相關(guān)領(lǐng)導(dǎo)做好定期檢驗(yàn)，驗(yàn)收各項(xiàng)管理進(jìn)程和執(zhí)行情況。
食品微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立微生物實(shí)驗(yàn)室的滅蠅、除蟑螂和其他害蟲(chóng)的防治計(jì)劃，室內(nèi)安裝滅蠅燈和紫外燈等，防止因有害昆蟲(chóng)而引起實(shí)驗(yàn)室內(nèi)細(xì)菌、病毒向外傳播的可能性。①
1.3 食品微生物實(shí)驗(yàn)室的儀器管理要求
食品微生物實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備應(yīng)配有溫控設(shè)施（如培養(yǎng)箱、冰箱等）、測(cè)量器具（如電子天平、菌落計(jì)數(shù)器等）、定容設(shè)備（如移液管、微量移液器等）、滅菌設(shè)施（如高壓蒸汽滅菌鍋、超凈工作臺(tái)等）、其他設(shè)備（如顯微鏡、離心機(jī)等）。設(shè)備的操作使用方法應(yīng)明確掛墻，便于學(xué)習(xí)使用。設(shè)備應(yīng)定期檢驗(yàn)其運(yùn)行參數(shù)，應(yīng)達(dá)到規(guī)定的性能參數(shù)，并符合相關(guān)檢查指標(biāo)。設(shè)備一旦出現(xiàn)故障不能正常使用，應(yīng)立即停止使用，并立即聯(lián)系廠家維修。
所有設(shè)備都應(yīng)做好設(shè)備信息登記（如設(shè)備名稱(chēng)、購(gòu)置時(shí)間、型號(hào)、制作廠商等）、使用情況登記表，這樣能實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)設(shè)備的運(yùn)行情況，做好設(shè)備維護(hù)工作。對(duì)于一些儀器設(shè)備在操作上有一些特殊注意的地方，可以注明相應(yīng)的注意事項(xiàng)，便于操作和儀器的維護(hù)，如超凈工作臺(tái)旁邊溫馨提示“操作時(shí)請(qǐng)關(guān)閉紫外燈！”在顯微鏡上貼有“使用完油鏡注意清潔我哦！”另外設(shè)備在操作過(guò)程中應(yīng)有受過(guò)培訓(xùn)的工作人員在場(chǎng)作相應(yīng)指導(dǎo)，以防出現(xiàn)故障和意外。對(duì)一些特殊的設(shè)備要做好定期檢查，比如高壓蒸汽滅菌鍋必須定期進(jìn)行安全測(cè)試，超凈工作臺(tái)必須定期進(jìn)行紫外線強(qiáng)度測(cè)試。
1.4 食品微生物實(shí)驗(yàn)室管理人員的要求
管理人員作為食品微生物實(shí)驗(yàn)室管理者，除了應(yīng)該具備工作人員應(yīng)有的素質(zhì)外，還應(yīng)有一定的管理能力，包括實(shí)驗(yàn)室的日常使用管理、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備使用指導(dǎo)和定期維護(hù)、統(tǒng)籌食品微生物的檢測(cè)工作安排、對(duì)突發(fā)事件的處理能力等。
另外，管理人員應(yīng)定期做好工作人員的相關(guān)培訓(xùn)，同時(shí)做好技術(shù)更新，提高那些有關(guān)食品微生物檢測(cè)的前言技術(shù)的關(guān)注度。管理人員和工作人員只有定期做好自身知識(shí)儲(chǔ)備工作，提高能力、經(jīng)驗(yàn)等綜合素質(zhì)，做好繼續(xù)受教育計(jì)劃，建立良好的“技術(shù)支持體系”，這樣才能科學(xué)、規(guī)范地做好食品微生物的管理工作，完善實(shí)驗(yàn)室的工作。
2 食品微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制
一套科學(xué)、嚴(yán)格的質(zhì)量管理體系是決定實(shí)食品微生物驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果是否準(zhǔn)確和精確的重要因素。除了有常見(jiàn)的“實(shí)驗(yàn)室安全制度”、“學(xué)生行為規(guī)范守則”，還必須有明確的“工作人員操作守則”、“管理人員管理守則”等。實(shí)現(xiàn)質(zhì)量管理的方針目標(biāo)，有效地開(kāi)展各項(xiàng)質(zhì)量管理活動(dòng)，必須建立相應(yīng)的管理體系。
第一，微生物檢測(cè)室必需單獨(dú)設(shè)立，避免污染，同時(shí)要按工作流程配有準(zhǔn)備室、消毒室、緩沖室、無(wú)菌室、培養(yǎng)室、檢測(cè)室等；第二，所有涉及到食品微生物檢測(cè)的設(shè)備必須嚴(yán)格CIP體系進(jìn)行徹底，器具也要用新潔爾滅等化學(xué)消毒液進(jìn)行消毒；第三，無(wú)菌室作為檢測(cè)工作的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，必需做好衛(wèi)生工作，保證無(wú)衛(wèi)生死角、清潔干燥、通風(fēng)良好，安裝紫外燈及空氣過(guò)濾設(shè)備等；第四，進(jìn)行微生物檢測(cè)的工作人員必需通過(guò)相應(yīng)的專(zhuān)業(yè)技能培訓(xùn)取得合法的上崗資質(zhì)外，同時(shí)嚴(yán)格按照GB/T4789-2003進(jìn)行微生物的檢測(cè)工作，熟悉標(biāo)準(zhǔn)化法的相關(guān)知識(shí)；第五，在實(shí)驗(yàn)中所使用的試劑、培養(yǎng)基必需嚴(yán)格按照微生物檢測(cè)操作規(guī)程進(jìn)行配置，有利于食品微生物檢測(cè)的規(guī)范化；②第六，做好菌種保藏工作，保管人員要求做到細(xì)心、嚴(yán)格、科學(xué)的保管，每種菌種要單獨(dú)保存以防交叉污染，特定的菌種要特定保存，同時(shí)做好相應(yīng)的使用記錄、保存信息記錄，定期進(jìn)行菌種篩選、保養(yǎng)。
3 總結(jié)
隨著中國(guó)在入WTO以后，國(guó)際食品貿(mào)易交流越發(fā)頻繁，對(duì)食品衛(wèi)生安全的要求越來(lái)嚴(yán)格，進(jìn)、出口食品的衛(wèi)生除了要求出口食品符合我國(guó)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)定，接受?chē)?guó)家相關(guān)進(jìn)出口商品檢驗(yàn)部門(mén)監(jiān)督和檢驗(yàn)外，還必須符合進(jìn)口國(guó)家對(duì)進(jìn)口食品的標(biāo)準(zhǔn)，其中對(duì)食品微生物的檢測(cè)也越來(lái)越苛刻，因此，如何進(jìn)行食品微生物實(shí)驗(yàn)室的規(guī)范化管理是一件尤為重要的課題。目前，國(guó)家也出臺(tái)了相關(guān)條例，在一定程度上改變了目前微生物實(shí)驗(yàn)室管理方面的問(wèn)題，實(shí)驗(yàn)室的未來(lái)正朝著標(biāo)準(zhǔn)化、法制化、實(shí)用性和安全性軌道發(fā)展前行。在現(xiàn)代社會(huì)，食品安全問(wèn)題受到廣泛關(guān)注，而微生物檢測(cè)的重要性尤為突出，所以對(duì)于其科學(xué)管理的水平是未來(lái)食品微生物實(shí)驗(yàn)室管理人員的重中之重。
我們對(duì)常用的儀器設(shè)備制定相關(guān)的作業(yè)指導(dǎo)書(shū)和檢定校準(zhǔn)計(jì)劃，特別重視對(duì)新購(gòu)儀器和那些容易漂移儀器的檢定。制定儀器/設(shè)備清單，指定專(zhuān)人保管，每臺(tái)儀器設(shè)備上均須貼有明顯標(biāo)識(shí)，其中資產(chǎn)標(biāo)識(shí)包括編號(hào)、名稱(chēng)、型號(hào)、生產(chǎn)廠家；狀態(tài)標(biāo)識(shí)：儀器設(shè)備分別以送檢、送校、自檢、自校表示其所檢定的狀態(tài)。校驗(yàn)合格則貼有綠色合格證（計(jì)量編號(hào)、校驗(yàn)日期和下次校驗(yàn)日期），凡校驗(yàn)不合格、過(guò)期、需報(bào)修的設(shè)備儀器應(yīng)貼有紅色停用證。為了保證正確使用各類(lèi)儀器，做好使用和維修、保養(yǎng)記錄。維修后的設(shè)備/儀器重新檢定并校準(zhǔn)證明其功能指標(biāo)已恢復(fù)，做好完整的檢查記錄，方可使用。
為了做好常用儀器設(shè)備的質(zhì)量控制工作，我們把實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用頻率高且需要監(jiān)控的儀器設(shè)備初步分為三類(lèi)：（一）培養(yǎng)箱（普通培養(yǎng)箱或CO2培養(yǎng)箱等）、干燥箱、高壓滅菌鍋、凈化工作臺(tái)、pH計(jì)、 冰箱，（低溫冰箱或冷柜）溫度計(jì)、紫外燈、顯微鏡、離心機(jī)、天平）；（二）小計(jì)量容器；（三）微生物測(cè)定儀器、微生物鑒定儀器、空氣采樣器、酶標(biāo)儀等。
1 溫度計(jì) 實(shí)驗(yàn)室必須要有工作溫度計(jì)和參照溫度計(jì)，分別做好標(biāo)識(shí)。工作溫度計(jì)用于日常溫度檢查；參照溫度計(jì)用于校正工作溫度計(jì)。定期檢查溫度計(jì)的運(yùn)行情況，一般半年一次。對(duì)溫度計(jì)日常檢查、校準(zhǔn)檢查和運(yùn)行檢查，都應(yīng)做好相應(yīng)的技術(shù)記錄。
2 培養(yǎng)箱 根據(jù)培養(yǎng)物性質(zhì)及溫度要求，培養(yǎng)箱應(yīng)分別設(shè)置（以用途和溫度分）。培養(yǎng)箱的溫差要求，一般顯示值與實(shí)測(cè)值相差不大于±1℃，箱體內(nèi)各點(diǎn)溫差（內(nèi)部的溫度均衡性）以及溫度波動(dòng)同樣不大于±1℃。溫度監(jiān)控方法：可將工作溫度計(jì)置甘油中，放入待測(cè)箱體內(nèi)，觀察工作溫度計(jì)的溫度，最好每天監(jiān)控1-2次，并做好記錄。
3 高壓滅菌鍋 實(shí)驗(yàn)室常用生物指示菌法、化學(xué)變色紙片及高壓滅菌鍋溫度計(jì)等方法對(duì)其滅菌效果進(jìn)行監(jiān)測(cè)。高壓滅菌鍋要由專(zhuān)人按作業(yè)指導(dǎo)書(shū)操作，并做好每一次的使用記錄。日常工作記錄應(yīng)包含以下信息：高壓滅菌的材料、開(kāi)始時(shí)間、壓力/溫度、取出時(shí)間、高壓滅菌膠帶的顏色變化。在使用高壓滅菌鍋時(shí)，鍋內(nèi)放置物品不宜過(guò)多，而且單位體積內(nèi)的內(nèi)容物（每瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基）不能太多。同時(shí)應(yīng)注意內(nèi)容物不同耐受溫度。高壓后物品總的暴露時(shí)間最好不要超過(guò)45min。高壓滅菌鍋校準(zhǔn)周期一般在半年。
4 干燥滅菌箱 日常工作記錄中應(yīng)包括以下信息：開(kāi)始的時(shí)間、到達(dá)滅菌溫度時(shí)的時(shí)間、取出的時(shí)間（或關(guān)閉時(shí)間）。干燥滅菌箱的溫度校準(zhǔn)；用參考溫度計(jì)進(jìn)行溫度測(cè)試，溫度要求與精確度：160±5 ℃或180 ±5 ℃。前者為滅菌2h，后者為30min。干燥滅菌箱校準(zhǔn)時(shí)間一般為一年。
5 天平 要求放置在無(wú)振動(dòng)、無(wú)氣流影響的水平臺(tái)面上，每次使用做好檢查記錄。天平作為計(jì)量?jī)x器是列入國(guó)家強(qiáng)制檢定范圍的，一般1次/年進(jìn)行檢定。運(yùn)行檢查頻率按運(yùn)行計(jì)劃或按產(chǎn)品（天平生產(chǎn)廠家）給出的標(biāo)準(zhǔn)重量單位進(jìn)行對(duì)照。
6 pH計(jì) 使用前應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行校準(zhǔn)。緩沖液使用有效期：PH4.00 有效期約1年； PH7.00 有效期約6個(gè)月；pH9.00 有效期約6個(gè)月。pH計(jì)要定期維護(hù)，電極外表要定期清洗，同時(shí)對(duì)電極敏感性進(jìn)行檢測(cè)及極性恢復(fù)。
7 超凈工作臺(tái) 要求潔凈度為100級(jí)，空氣沉降30min，細(xì)菌數(shù)＜1個(gè)/皿。垂直流凈化工作臺(tái)，細(xì)菌數(shù)＜0.49個(gè)/皿.。凈化工作臺(tái)運(yùn)行檢查頻次應(yīng)每月一次，主要是細(xì)菌沉降檢測(cè)。凈化工作臺(tái)高效過(guò)濾膜一般為一年更換一次，并同時(shí)進(jìn)行粒子與細(xì)菌沉降檢測(cè)。
8 紫外燈 檢測(cè)方法包括儀器測(cè)試法和生物測(cè)試法。前者是通過(guò)專(zhuān)用儀器檢測(cè)紫外燈管發(fā)射的紫外光強(qiáng)度。國(guó)家消毒技術(shù)規(guī)范中規(guī)定在距離照射1米處，要求強(qiáng)度為90。生物測(cè)試法就是采用一定的細(xì)菌培養(yǎng)物，經(jīng)一定比例稀釋?zhuān)靠刂圃?00-250個(gè)/0.5ml，涂布平板在紫外燈光下照射2min，同時(shí)設(shè)置普通光源的對(duì)照組，后置37℃培養(yǎng)48h，計(jì)算其殺滅率。要求殺滅率達(dá)99%。
9 酶標(biāo)讀數(shù)儀、洗板機(jī) 每天：核對(duì)濾光片波長(zhǎng)，檢查洗板機(jī)管道是否通暢，是否有漏液現(xiàn)象；每周：清潔儀器表面，保護(hù)光學(xué)零件不沾灰塵；每月：檢查洗滌時(shí)各孔是否與相應(yīng)的沖洗頭對(duì)位良好，負(fù)壓是否符合規(guī)定要求；每年：檢查、清洗濾光片，如果出現(xiàn)破裂或霉點(diǎn)則要更換。根據(jù)儀器內(nèi)具有的校準(zhǔn)程序或使用校準(zhǔn)板，對(duì)濾光片的精密度進(jìn)行校準(zhǔn)并保留記錄。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)異常情況，應(yīng)隨時(shí)進(jìn)行處理，可根據(jù)使用情況更換必要的部件。酶標(biāo)儀工作中常用陽(yáng)性對(duì)照檢測(cè)其功能的正常性。
10 移液器 定期（每年至少1次）校準(zhǔn)，發(fā)現(xiàn)異常情況應(yīng)隨時(shí)進(jìn)行校準(zhǔn)。 標(biāo)定方法包括有色溶液光譜分析法、稱(chēng)量校準(zhǔn)法、同位素計(jì)數(shù)法以及使用配套校準(zhǔn)盒等。 校準(zhǔn)多道移液器時(shí)，必須保證每一個(gè)加樣頭都能夠連續(xù)、準(zhǔn)確地加樣。移液器的精密度應(yīng)在廠家說(shuō)明書(shū)規(guī)定的范圍內(nèi)。
11 冰箱和孵育箱 每天檢查和記錄冰箱溫度，每個(gè)工作日檢查記錄孵育箱溫度，并做好記錄，使用經(jīng)過(guò)計(jì)量部門(mén)校準(zhǔn)合格的溫度計(jì)測(cè)量冰箱和孵育箱的實(shí)際溫度；根據(jù)不同規(guī)格冰箱和凍存樣品性質(zhì)對(duì)溫度要求不同，調(diào)節(jié)相應(yīng)的溫度。放置要求4℃保存的試劑盒的冰箱溫度應(yīng)在2～8℃；用于培養(yǎng)的孵育箱溫度誤差應(yīng)小于1℃；用于冷凍核酸和抗原檢測(cè)的血漿、淋巴細(xì)胞和病毒上清適宜在-70℃冰箱，要求冰箱溫度低于-65℃。
以上十一種儀器是我們?nèi)粘９ぷ髦惺褂妙l率較高的，對(duì)這些儀器設(shè)備的使用和管理我們積累了一些經(jīng)驗(yàn)，日常工作中做好儀器的運(yùn)行情況和使用記錄，以便及時(shí)發(fā)現(xiàn)問(wèn)題。這樣就更能保證檢測(cè)過(guò)程的順利進(jìn)行，最終保證我們的檢測(cè)結(jié)果更科學(xué)更準(zhǔn)確。
參考文獻(xiàn)
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［2］ 國(guó)家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理委員會(huì)．實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)認(rèn)定工作指南［M］．北京：中國(guó)計(jì)量出版社，2007
中圖分類(lèi)號(hào)：G642 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1673-9795（2013）05（a）-0119-01
微生物學(xué)本身的特性決定了它很強(qiáng)的實(shí)驗(yàn)性，而微生物實(shí)驗(yàn)也就順理成章的成為微生物學(xué)不可或缺的重要組成部分。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)作為生物的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)課，其實(shí)驗(yàn)的理論和方法對(duì)現(xiàn)代生物科學(xué)的每個(gè)領(lǐng)域都有著重要的影響。特別是對(duì)于現(xiàn)代生命科學(xué)、食品科學(xué)和環(huán)境科學(xué)等都有極其重要的影響。因此，要想學(xué)生對(duì)生命科學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)以及生命科學(xué)的發(fā)展動(dòng)態(tài)有個(gè)系統(tǒng)的理解，就必須做好微生物學(xué)的研究教學(xué)工作。微生物學(xué)的教學(xué)關(guān)鍵還是實(shí)驗(yàn)研究，然而一個(gè)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備先進(jìn)與否，更是作為評(píng)定高?？蒲兴降闹匾w現(xiàn)。作為高等本科院校，高效的實(shí)驗(yàn)室管理以及合理的實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革對(duì)學(xué)生創(chuàng)新能力的發(fā)展尤為重要。筆者就多年的教學(xué)經(jīng)驗(yàn)以及近些年我校對(duì)于微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的改革，和對(duì)實(shí)驗(yàn)室的管理做出如下總結(jié)。
1 增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室管理力度，提升教學(xué)質(zhì)量
我們都知道合理的管理章程可為提升教學(xué)成果，培養(yǎng)和提升學(xué)生自主動(dòng)手及創(chuàng)新能力奠定良好的基礎(chǔ)。但是實(shí)驗(yàn)室的所有程序是一個(gè)完整系統(tǒng)，必須從細(xì)節(jié)做起，才能達(dá)到服務(wù)于教學(xué)、有利于學(xué)生學(xué)習(xí)目的。
1.1 強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)室管理，更新健全各項(xiàng)管理制度
有條不紊的實(shí)驗(yàn)室管理制度，才能創(chuàng)造安全有序的實(shí)驗(yàn)環(huán)境，從而是實(shí)驗(yàn)正常進(jìn)行。具體實(shí)施如下：安排特定人員管理實(shí)驗(yàn)室，且制定除院辦公室有備用鑰匙外，和實(shí)驗(yàn)管理人員配帶1把，其他人一律不得攜帶，從而確保了實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備安全。水災(zāi)、火災(zāi)的防控是實(shí)驗(yàn)室管理的基本。高校微生物實(shí)驗(yàn)室也建有“實(shí)驗(yàn)室安全制度”和“實(shí)驗(yàn)人員職責(zé)”等制度。便捷的常規(guī)管理不但縮減了工作量，而且還降低了工作難度，使效率在逐步提升中。我們要求學(xué)生使用試劑后及時(shí)放回原處，便于本組同學(xué)或下組同學(xué)使用。避免了學(xué)生使用后隨處亂放、不能及時(shí)清理的壞習(xí)慣，使得每次實(shí)驗(yàn)都能夠井然有序的進(jìn)行。這樣不但確保實(shí)驗(yàn)?zāi)芎翢o(wú)差錯(cuò)地開(kāi)展，而且加大了實(shí)驗(yàn)室管理的安全性。
1.2 加強(qiáng)儀器管理，確保實(shí)驗(yàn)正常進(jìn)行
顯微鏡無(wú)疑是最常用的實(shí)驗(yàn)儀器，如果管理不當(dāng)會(huì)大大影響實(shí)驗(yàn)的進(jìn)程。因此，在使用前要向?qū)W生多次強(qiáng)調(diào)務(wù)必要安全使用，其他儀器的使用也會(huì)同樣強(qiáng)調(diào)，效果非常明顯。為了便于檢修，我們將所有的實(shí)驗(yàn)儀器都進(jìn)行了編號(hào)，并將各儀器配有使用登記本，要求使用者在使用后及時(shí)登記使用情況。然后將其掛在有相應(yīng)編號(hào)的顯微鏡上，并將顯微鏡放入相應(yīng)編號(hào)的儲(chǔ)藏柜中，這樣整個(gè)實(shí)驗(yàn)室顯得特別整潔有序。學(xué)期結(jié)束前，我們對(duì)所有的顯微鏡實(shí)施徹底查看，將需要修理的進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，然后將結(jié)果提交到秘書(shū)辦公室，使其能夠即時(shí)得到修理，確保下學(xué)期實(shí)驗(yàn)時(shí)顯微鏡能夠正常使用。
2 強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革，適應(yīng)形勢(shì)發(fā)展需要
2.1 建立完善的考核制度
以往的生物教學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過(guò)于看重實(shí)驗(yàn)報(bào)告上的最后結(jié)果，卻疏忽了在整個(gè)過(guò)程中培養(yǎng)學(xué)生們的實(shí)地動(dòng)手能力。這種實(shí)驗(yàn)導(dǎo)致學(xué)生們覺(jué)得只要在最后填寫(xiě)的結(jié)論是對(duì)的就可以，根本不必實(shí)際操作，這種實(shí)驗(yàn)不僅失去的本身的意義，還大大地扼殺了學(xué)生參加實(shí)驗(yàn)的興趣。我們?cè)撊绾螒?yīng)對(duì)這種情況？為此我們對(duì)實(shí)驗(yàn)核制度做了修改，將考核內(nèi)容更改為從熟記實(shí)驗(yàn)報(bào)告―― 具體操作―― 真實(shí)做出實(shí)驗(yàn)報(bào)告。通過(guò)此次實(shí)驗(yàn)制度的完善相信大幅度提高了學(xué)生的實(shí)驗(yàn)積極性。
2.2 加強(qiáng)課堂整體連貫性
生物實(shí)驗(yàn)課是在每學(xué)年的第一學(xué)期開(kāi)課，為了使每個(gè)實(shí)驗(yàn)達(dá)到預(yù)期效果。在基礎(chǔ)技能培訓(xùn)中，我們將實(shí)驗(yàn)步驟按順序分為：基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)、微生物的形態(tài)觀察實(shí)驗(yàn)、微生物數(shù)量的鑒定、細(xì)胞大小鑒定和微生物生理生化指標(biāo)的測(cè)定。培養(yǎng)基的制備及高壓滅菌實(shí)驗(yàn)，該實(shí)驗(yàn)中制備的大量培養(yǎng)基可以供后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。通過(guò)整個(gè)過(guò)程，器皿和儀器的使用方法將深入學(xué)生大腦，以及是學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)基本理論得到進(jìn)一步的了解，可在原理上更進(jìn)一步理解每一步驟的含義，在操作上不斷領(lǐng)會(huì)每個(gè)細(xì)節(jié)的注意事項(xiàng)，這樣熟練整個(gè)操作過(guò)程，養(yǎng)成較好的實(shí)驗(yàn)操作習(xí)性，為以后的深入研究墊下結(jié)實(shí)的基礎(chǔ)。
2.3 讓學(xué)生自主實(shí)施實(shí)驗(yàn)
為了鍛煉學(xué)生實(shí)驗(yàn)的基本功，強(qiáng)化學(xué)生實(shí)驗(yàn)動(dòng)手能力，需要對(duì)《微生物學(xué)》課程實(shí)驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化。驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，學(xué)生只能學(xué)到很多底層的操作技能，卻無(wú)法將所學(xué)內(nèi)容與實(shí)踐相聯(lián)系起來(lái)。讓學(xué)生領(lǐng)悟課堂上所學(xué)的實(shí)驗(yàn)技能，去進(jìn)一步制定出新的方案，將不同的實(shí)驗(yàn)技能做到綜合運(yùn)用。這不光讓學(xué)生掌握了實(shí)驗(yàn)理念，更鞏固了實(shí)驗(yàn)技術(shù)，而且還提升了學(xué)生的積極自主操作技能。
傳統(tǒng)理念中，實(shí)驗(yàn)前期準(zhǔn)備都是由教師們進(jìn)行，學(xué)生完全是被動(dòng)學(xué)習(xí)知識(shí)，實(shí)驗(yàn)課時(shí)他們只需要按照實(shí)驗(yàn)步驟做下去即可。為了改變這一局面，學(xué)生都是自己著手準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)，自己動(dòng)手的學(xué)生不但鞏固了實(shí)驗(yàn)課所學(xué)內(nèi)容，他們的自主動(dòng)手能力也得到了大大的進(jìn)步，明顯高于其他同學(xué)，保證了整節(jié)課的順利進(jìn)行。學(xué)生參與準(zhǔn)備不但減輕了實(shí)驗(yàn)老師的準(zhǔn)備工作量，還使學(xué)生親身體驗(yàn)了準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)的煩瑣和辛苦，為他們以后做其它方面的實(shí)驗(yàn)和畢業(yè)設(shè)計(jì)奠定了扎實(shí)的地基。
3 結(jié)語(yǔ)
總之，一節(jié)實(shí)驗(yàn)課成功的進(jìn)行和良好的實(shí)驗(yàn)室管理是密不可分的。近幾年，通過(guò)我們堅(jiān)持不懈地強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)室的管理與工作方法的改革，收效非常明顯。學(xué)生不但對(duì)微生物學(xué)這門(mén)看似枯燥無(wú)味的學(xué)科有了濃厚的學(xué)習(xí)興趣，而且進(jìn)一步調(diào)動(dòng)了教師們對(duì)微生物學(xué)理論教學(xué)和實(shí)驗(yàn)教學(xué)的積極性。只要不斷強(qiáng)化自己，勇于創(chuàng)新，堅(jiān)持將實(shí)驗(yàn)理念和實(shí)踐相結(jié)合的原則，消除學(xué)生的散漫氣氛，實(shí)驗(yàn)教學(xué)的質(zhì)量必定還逐漸得到升級(jí)，教學(xué)改革也將推向縱深。
參考文獻(xiàn)
