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時(shí)間：2023-08-11 09:14:51
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在潘諾夫斯基所總結(jié)的如何利用圖像學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)谋磉_(dá)自己的觀點(diǎn)的時(shí)候提出了三個(gè)步驟，這是對(duì)于我們后人研究方法的一個(gè)總結(jié)，但我覺(jué)得在對(duì)于反推當(dāng)時(shí)作為它者的觀眾的理解情況有一定的借鑒意義：
1.前圖像志描述。是運(yùn)用實(shí)際經(jīng)驗(yàn)對(duì)作品的自然主題進(jìn)行解釋，他指出其中還需要利用風(fēng)格史對(duì)解釋進(jìn)行矯正。自然主題被稱為藝術(shù)母題的世界，是對(duì)當(dāng)時(shí)的視覺(jué)經(jīng)驗(yàn)的再現(xiàn)，對(duì)一件作品的這一層面的把握是當(dāng)時(shí)的人可以具有的。
2.圖像志分析。是運(yùn)用原典知識(shí)對(duì)作品的程式主題進(jìn)行分析，即分析構(gòu)成圖像和寓意的世界，在這一階段需要類型史的矯正。文藝復(fù)興之前是中世紀(jì)的基督教統(tǒng)治時(shí)期，這一時(shí)期是完全的宗教統(tǒng)治，使真正的古典傳統(tǒng)幾乎消失殆盡，所以經(jīng)過(guò)這100年的發(fā)展，人們對(duì)于基督教原典的了解應(yīng)該十分熟練，但是對(duì)于真正異教題材的了解應(yīng)該并不多，盡管將基督教神學(xué)和新柏拉圖主義融合的新柏拉圖主義在這一時(shí)期十分盛行，但這種影響也主要作用于人文主義圈，普通大眾對(duì)此并不太了解，我想就此可以認(rèn)為所謂的將“古典主題和古典母題重新合二為一的文藝復(fù)興的藝術(shù)作品”只是在人文主義圈流傳。
3.圖像學(xué)解釋。是利用綜合直覺(jué)對(duì)作品的內(nèi)在意義進(jìn)行解釋，也就是了解作品的象征價(jià)值，需要文化象征史的矯正。后者無(wú)論是對(duì)于當(dāng)時(shí)的人，甚至是學(xué)者還是對(duì)于現(xiàn)在的我們都是需要去特別的學(xué)習(xí)的。綜合直覺(jué)我覺(jué)得可以理解為我們通常所說(shuō)的“悟性”，所悟之事是時(shí)代特征，是根本原理，潘諾夫斯基認(rèn)為，藝術(shù)中所為人捕捉的根本原理的展現(xiàn)并不是藝術(shù)家刻意去表現(xiàn)的，他可能并不知覺(jué)，對(duì)這部分的把握應(yīng)該就不是當(dāng)時(shí)的觀者所能把握的。那么也就是說(shuō)，當(dāng)時(shí)的人在欣賞一件作品時(shí)只能達(dá)到圖像志分析的階段，也就是通過(guò)掌握藝術(shù)母題的結(jié)構(gòu)關(guān)系從而掌握藝術(shù)作品的寓意。結(jié)合圖像學(xué)方法和當(dāng)時(shí)基督教傳統(tǒng)的背景以及新柏拉圖主義思想的流行，在當(dāng)時(shí)藝術(shù)作品的內(nèi)容應(yīng)該要比具體表現(xiàn)的形式重要。文藝復(fù)興時(shí)期的藝術(shù)的一個(gè)特征是忠于原典，無(wú)論是基督教中的人物還是異教的人物形象，其數(shù)量是固定的，其“擬人形象”都配有象征其身份的“屬像”，由于藝術(shù)母題的有限，而要表達(dá)的思想無(wú)止境，亦或是不斷變化，這就需要當(dāng)時(shí)的人對(duì)潘諾夫斯基在上述第二個(gè)階段中所提及對(duì)于研究者的要求——對(duì)“類型史”把握，對(duì)于當(dāng)時(shí)的人來(lái)說(shuō)也就是了解特定的主題和概念在不同時(shí)期被對(duì)象和事件所表現(xiàn)的方式。
二、作為“教科書(shū)”的創(chuàng)作
文藝復(fù)興的名字是來(lái)自于對(duì)“古典古代的再生”，這種對(duì)于“古典”的關(guān)注，并不能理解為此前的中世紀(jì)藝術(shù)就完全摒棄古典藝術(shù)，只是在中世紀(jì)藝術(shù)中，古典母題與古典主題相分離，一種是將異教形象替換成基督教中的人物，另一種是古典原型中的純粹的構(gòu)圖。而在文藝復(fù)興時(shí)期二者又重新結(jié)合起來(lái)，二者相分離的原因在于代表古希臘的再現(xiàn)傳統(tǒng)和代表中世紀(jì)基督教的原典傳統(tǒng)之間的差異，更是異教傳統(tǒng)和基督教傳統(tǒng)的不容，所以說(shuō)要想實(shí)現(xiàn)真正的藝術(shù)復(fù)興，調(diào)和基督教神學(xué)和異教神學(xué)是關(guān)鍵。文藝復(fù)興時(shí)期的新柏拉圖主義學(xué)說(shuō)的發(fā)展就適應(yīng)了這一時(shí)期想要在基督教的統(tǒng)治下復(fù)興古典藝術(shù)的需要，即以菲奇諾為代表的新柏拉圖主義者實(shí)現(xiàn)了將“基督教神學(xué)與偉大的異教哲學(xué)成功地結(jié)合在一起”，在實(shí)現(xiàn)柏拉圖主義的同時(shí)，還實(shí)現(xiàn)與基督教的完美和諧。文藝復(fù)興時(shí)期對(duì)于原典的研究過(guò)程中，為適應(yīng)基督教的統(tǒng)治，出現(xiàn)了將古典諸神道德化解釋的趨勢(shì)，這一表現(xiàn)同樣適用于藝術(shù)。藝術(shù)家為基督教創(chuàng)作的作品的目的無(wú)疑是為了教化群眾，所以更能體現(xiàn)出中世紀(jì)到文藝復(fù)興轉(zhuǎn)變的作品是異教題材繪畫(huà)。貢布里希在對(duì)文藝復(fù)興的研究中，主張“重構(gòu)方案”，就是將當(dāng)時(shí)訂購(gòu)人的委托方案最大限度的恢復(fù)。在他的文章《波提切利的深化作品——對(duì)他圈子里的新柏拉圖學(xué)派象征體系的研究》中，他對(duì)這位被稱為“藝術(shù)中異教主題創(chuàng)始人”的波提切利的圈子，實(shí)質(zhì)上是他的贊助人洛倫佐•迪•皮耶爾弗朗切斯科的新柏拉圖學(xué)派圈子的研究。文章中他從贊助人和新柏拉圖主義以及原典的角度分析了波提切利的異教作品中的具有道德化意義的“象征意義”，但對(duì)此我更關(guān)注的是他通過(guò)幾封交往的信件而重構(gòu)出的委托情形，即是，《春》這幅作品實(shí)質(zhì)是菲奇諾為了讓洛倫佐•迪•皮耶爾弗朗切斯科能夠銘記道德訓(xùn)誡的手段，菲奇諾注重視覺(jué)力量，這畫(huà)面中的維納斯代表著他要提醒小洛倫佐的“人性”的美德，他希望小洛倫佐能過(guò)通過(guò)被維納斯這位美麗的寧芙迷住的同時(shí)獲得她所代表的“人性”的美德。這是文藝復(fù)興時(shí)期的一種“教科書(shū)”式的典型的繪畫(huà)作品，這一時(shí)期的藝術(shù)，無(wú)論是否是異教，其表達(dá)都要向基督教的傳統(tǒng)去“屈服”，于是就出現(xiàn)了這種藝術(shù)普遍道德化的傾向。
三、結(jié)語(yǔ)
貢布里希在文章中說(shuō)，新柏拉圖主義“向世俗藝術(shù)打開(kāi)了迄今為止一直為宗教所獨(dú)占的感情領(lǐng)域”。但是他雖開(kāi)啟了世俗藝術(shù)，但我認(rèn)為這并沒(méi)有真正的走向“世俗”，甚至是更加遠(yuǎn)離，也許這就是之后西方藝術(shù)普遍追求精英性的“根源”，當(dāng)然，這只是我各人的猜測(cè)。之所以這么說(shuō)是因?yàn)?，?jīng)過(guò)中世紀(jì)進(jìn)入文藝復(fù)興，對(duì)于基督教的了解，可以使人們基本了解宗教題材作品的內(nèi)容，但是對(duì)于對(duì)傳統(tǒng)中斷的異教題材的了解甚微的公眾來(lái)說(shuō)，這一題材繪畫(huà)就難以理解，加之新柏拉圖主義等哲學(xué)信息的介入，使作品只有“精英圈子”的人得以理解。文藝復(fù)興的藝術(shù)幾乎都是具有象征意義的，無(wú)論是基督教藝術(shù)去表現(xiàn)教義，還是異教題材去表現(xiàn)哲學(xué)，它們的內(nèi)容都具有道德化傾向，觀看的重點(diǎn)在于對(duì)作品意義的體悟，這就要求觀者要受過(guò)一定的教育，對(duì)于每一個(gè)信息的了解，就像是需要帶著“字典”看藝術(shù)品；另一方面這樣的作品都是帶有教育意義的，目的是讓觀者受到相應(yīng)表達(dá)的教育甚至是成為這一“擬人像”所代表的象征意義的人。
參考文獻(xiàn)：
[中圖分類號(hào)] R779.6 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 2095-0616（2017）10-220-04
Prevention of intraocular infection after cataract surgery in primary hospital
YANG Yi NIU Meimin LI Keqin HUANG Huaijie ZHANG Xiaojuan XIE Yueshu
Department of Ophthalmology，Shunde District Second People’s Hospital，F(xiàn)oshan 528305，China
[Abstract] Objective To explore the method and clinical effect of prevention of intraocular infection after cataract surgery in primary hospital. Methods 90 patients carried on cataract surgery in our hospital from March 2015 to March 2016 were selected as the study object.According to the single and double admission，they were divided into control group and observation group with 45 cases in each.Patients in control group were treated with traditional preoperative treatment，and patients in observation group were treated with improved preventive measures.Intraocular infection rate and ocular symptom score of the two groups after operation were compared. Results Intraocular infection rate of observation group was 0，and the ocular symptom score was （1.2±0.4）.Intraocular infection rate of control group was 2.22%，and the ocular symptom score was （1.8±0.5）.The indicator of observation group was significantly better than the control group，the difference was statistically significant （P
[Key words] Cataract；Surgical treatment；Intraocular infection；Improved preventive measures
白日希cataract）指的是眼球內(nèi)的晶狀體組織出現(xiàn)混濁現(xiàn)象，混濁程度越嚴(yán)重則對(duì)患者視力影響越嚴(yán)重[1]。據(jù)流行病學(xué)調(diào)查顯示，白內(nèi)障是導(dǎo)致視力殘疾、致盲最主要原因。隨著醫(yī)療水平的提高現(xiàn)在沿海城市基層醫(yī)院亦多采用超聲乳化白內(nèi)障摘除+人工晶體植入手術(shù)進(jìn)行治療，但由于患者衛(wèi)生意識(shí)薄弱、醫(yī)院預(yù)防措施不到位、衛(wèi)生條件較差等原因引發(fā)眼內(nèi)感染情況。眼內(nèi)感染會(huì)導(dǎo)致眼內(nèi)結(jié)構(gòu)損傷，嚴(yán)重者會(huì)出現(xiàn)視力喪失情況，給患者生理、心理帶來(lái)巨大傷害[2]。改良式預(yù)防措施從術(shù)前患者、醫(yī)護(hù)人員準(zhǔn)備，術(shù)中的密切配合以及術(shù)后病情監(jiān)護(hù)、護(hù)理干預(yù)進(jìn)行全面預(yù)防，旨在降低術(shù)后并發(fā)癥的發(fā)生率。本研究探討基層醫(yī)院白內(nèi)障患者手術(shù)中及圍手術(shù)期采用改良式預(yù)防措施來(lái)減少眼內(nèi)感染的發(fā)病率，現(xiàn)報(bào)道如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選擇我院自2015年3月～2016年3月間收治的經(jīng)白內(nèi)障超聲乳化+人工晶體植入手術(shù)治療的白內(nèi)障患者90例，隨機(jī)將其分成兩組，對(duì)照組患者45例，男女比例為20：25，單只45例，年齡40～78歲，平均（62.3±2.4）歲；觀察組患者45例，男女比例為21：24，單只43例、雙只2例，年齡49～77歲，平均（61.8±2.0）歲，兩組患者的基本資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。本次實(shí)驗(yàn)經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)實(shí)施。
1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn)[3]
納入標(biāo)準(zhǔn)：非外傷導(dǎo)致的白內(nèi)障患者，血常規(guī)檢查、生命體征指標(biāo)和凝血功能均正常的患者，對(duì)本次研究知情且愿意簽署授權(quán)書(shū)的患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：排除淚囊炎、角膜炎等感染性眼疾患者，伴有全身性感性性疾病患者，眼表有陳舊性瘢痕患者。
1.3 方法
1.3.1 手術(shù)方法 兩組患者均采用白內(nèi)障超聲乳化+人工晶體植入手術(shù)治療，取仰臥位常規(guī)消毒鋪巾，使用丙美卡因（Alcon.H20160133）行表面麻醉處理，開(kāi)瞼器開(kāi)瞼，10點(diǎn)位行透明角膜主切口，2點(diǎn)位行輔助切口，然后連續(xù)環(huán)形撕囊并離水分層，刻槽劈核，將晶體核“分而治之”，I/A抽吸剩余皮質(zhì)，再將人工晶體植入囊袋，抽吸粘彈劑，水密主切口，前房形成，使用醫(yī)用紗布進(jìn)行包扎處理。
1.3.2 預(yù)防干預(yù) 對(duì)照組術(shù)前約2天滴妥布霉素（s.a.ALCON-COUVREUR n.v.，H20140811）眼藥水，3次/d；手術(shù)當(dāng)天入手術(shù)室前20min使用慶大霉素（河南潤(rùn)弘制藥股份有限公司，H20003004）稀釋液沖洗患者結(jié)膜囊，然后滴入濃度為0.1%的聚維酮碘；進(jìn)入手術(shù)室后二次沖洗結(jié)膜囊，眼周部位使用濃度為0.5%的聚維酮碘消毒。觀察組術(shù)前約2天滴妥布霉素（s.a.ALCON-COUVREUR n.v.，H20140811）眼藥水，3次/d；（1）術(shù)前準(zhǔn)備：①眼部準(zhǔn)備?；颊呷朐汉笥勺o(hù)士剪掉睫毛，并使用濃度為0.05%碘伏或慶大霉素稀釋液（500mL生理鹽水溶入16萬(wàn)U慶大霉素）對(duì)睫毛根部、淚道、結(jié)膜囊消毒處理；術(shù)前由醫(yī)護(hù)人員對(duì)患者眼部進(jìn)行檢查和訓(xùn)練，檢查項(xiàng)目包括遠(yuǎn)近視力、光感、眼壓和眼底情況。訓(xùn)練項(xiàng)目即提升患者注視顯微鏡燈的固視能力。術(shù)前叮囑患者保持個(gè)人衛(wèi)生如洗漱、換衣，同時(shí)做好保暖工作。②情志干預(yù)。白內(nèi)障患者對(duì)手術(shù)了解較少因此對(duì)治療效果存有疑慮，同時(shí)對(duì)手術(shù)心存恐懼和緊張情緒甚至排斥治療。因此醫(yī)生在術(shù)前主動(dòng)和患者攀談，告知手術(shù)治療的原理和過(guò)程，耐心講解手術(shù)中的注意事項(xiàng)和配合要點(diǎn)，消除疑慮緩解恐懼增強(qiáng)治療的信心。（2）術(shù)中處理：保持適宜的手術(shù)室溫度（26℃左右）、濕度（55%左右），使用空氣消毒機(jī)在手術(shù)過(guò)程中全程消毒；核對(duì)患眼和人工晶體度數(shù)是否一致，術(shù)前約5min時(shí)向結(jié)膜囊滴入濃度為0.1%聚維酮碘消毒，眼周手術(shù)部位使用濃度為0.5%的聚維酮碘消毒。（3）術(shù)后預(yù)防：叮囑患者使用典必殊眼液（s.a.ALCON-COUVREUR. n.v.，H20150119）；密切^察患者的病情、生命體征變化，叮囑患者盡量臥床休息，不要揉眼睛；若出現(xiàn)視力下降，眼睛畏光、發(fā)紅等異?，F(xiàn)象立即檢查并治療。
1.4 觀察指標(biāo)
（1）眼內(nèi)感染發(fā)生的判斷。在術(shù)后1周內(nèi)若出現(xiàn)玻璃體渾濁、結(jié)膜水腫、充血且分泌物增加，前房水混，視物下降、流淚、畏光、創(chuàng)口劇烈疼痛者判定為眼內(nèi)感染。（2）眼部癥狀評(píng)分。采用眼部刺激主觀癥狀評(píng)分系統(tǒng)進(jìn)行評(píng)價(jià)，通過(guò)問(wèn)答形式分別對(duì)患者眼睛干澀、瞼緣眼紅、外眼瞼紅腫、眼部灼燒感、視物情況等進(jìn)行評(píng)價(jià)，眼睛干澀依據(jù)其輕度、中度和重度分別記為1～3分，總得分越高則表示眼部癥狀越嚴(yán)重[4]。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理本次研究數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料用（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料用（）表示，采用t檢驗(yàn)，P
2 結(jié)果
2.1 兩組患者術(shù)后眼內(nèi)感染率情況比較
觀察組患者在白內(nèi)障手術(shù)圍術(shù)期采用改良式預(yù)防措施，結(jié)果術(shù)后出現(xiàn)眼內(nèi)感染人數(shù)為0例，感染率為0；常規(guī)預(yù)防措施的對(duì)照組患者術(shù)后眼內(nèi)感染發(fā)生率為2.22%（1例），兩組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P
2.2 兩組患者眼部癥狀評(píng)分情況比較
兩組患者分別在術(shù)前、術(shù)后1周采用癥狀評(píng)分系統(tǒng)對(duì)患者眼部主觀感受進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果術(shù)前兩組患者的評(píng)分差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），行不同預(yù)防措施后觀察組患者評(píng)分顯著低于對(duì)照組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P
3 討論
白內(nèi)障是由于各種原因?qū)е碌木w代謝異常、蛋白變性產(chǎn)生的渾濁病變現(xiàn)象[5]。白內(nèi)障摘除手術(shù)是較為傳統(tǒng)的治療方法，隨著手術(shù)技術(shù)的成熟和方式的完善，白內(nèi)障治療的安全性和有效性明顯提升。眼內(nèi)感染是內(nèi)眼手術(shù)后罕見(jiàn)但嚴(yán)重的并發(fā)癥，可嚴(yán)重影響患者視力，而且90%的感染性眼內(nèi)炎發(fā)生于白內(nèi)障術(shù)后[6]。眼內(nèi)感染是白內(nèi)障摘除手術(shù)后主要的并發(fā)癥之一，不僅會(huì)影響患者視力的恢復(fù)甚至?xí)職埡椭旅?，因此圍術(shù)期系統(tǒng)的處理手段是預(yù)防術(shù)后眼內(nèi)感染的關(guān)鍵[7]。相關(guān)研究[8-9]發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致患者術(shù)后早期感染的細(xì)菌多來(lái)自眼睛附屬器和眼周皮膚，如結(jié)膜囊、瞼板腺以及眼周皮膚等。一般的存留于結(jié)膜囊、瞼板腺等的細(xì)菌不會(huì)引發(fā)感染情況，但在手術(shù)治療后患者的免疫機(jī)能明顯下降，再加上手術(shù)創(chuàng)口以及人工晶體的植入等因素導(dǎo)致感染機(jī)會(huì)增加。鑒于此，術(shù)前對(duì)該些部位進(jìn)行徹底消毒沖洗是降低感染率的關(guān)鍵，基層醫(yī)院醫(yī)療設(shè)備相對(duì)簡(jiǎn)陋、人力資源緊缺，導(dǎo)致健康宣傳不到位、圍術(shù)期消毒等操作不夠規(guī)范等均是引發(fā)術(shù)后眼內(nèi)感染的原因。
本次研究對(duì)常規(guī)的預(yù)防處理方案進(jìn)行改良和完善，術(shù)前指導(dǎo)或協(xié)助患者做好眼部準(zhǔn)備，如修剪睫毛、沖洗消毒結(jié)膜囊等部位，徹底將存留在眼部周圍的細(xì)菌清除干凈；同時(shí)叮囑患者注意個(gè)人衛(wèi)生，換洗干凈衣服、洗澡、洗頭等清除一切可能接觸到的細(xì)菌。情志干預(yù)的目的主要是消除患者緊張和害怕心理，能夠以積極的心態(tài)面對(duì)手術(shù)治療，在轉(zhuǎn)變患者主觀感受的同時(shí)建立與醫(yī)生之間的信任感[8-9]，另外良好的心態(tài)能夠提升手術(shù)治療的有效性和安全性。術(shù)前應(yīng)使用聚維酮碘對(duì)結(jié)膜囊和眼周皮膚再次沖洗消毒。而對(duì)照組患者僅在術(shù)前和手術(shù)開(kāi)始前5min使用聚維酮碘沖洗眼部和周圍皮膚，未針對(duì)術(shù)后眼內(nèi)感染進(jìn)行系統(tǒng)性預(yù)防處理，結(jié)果觀察組患者術(shù)后感染率為0，而對(duì)照組患者有一例感染（后通過(guò)及時(shí)治療得到控制）感染率2.22%，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P
妥布霉素具有廣譜抗革蘭陰性和陽(yáng)性菌的活性，有研究顯示白內(nèi)障手術(shù)患者結(jié)膜囊內(nèi)細(xì)菌對(duì)其藥物敏感率為52%[10]。術(shù)前使用妥布霉素滴術(shù)眼可有效抑制結(jié)膜囊內(nèi)部分細(xì)菌，但不絕對(duì)。聚維酮碘是眼部手術(shù)中應(yīng)用最為廣泛的殺菌消毒藥物，其特c是對(duì)黏膜無(wú)刺激性且消毒效果顯著，因此成為黏膜部位手術(shù)唯一的消毒藥物，它對(duì)多重耐藥菌[11]，念球菌，病毒[12]，棘阿米巴[13]，菌膜等均有效。據(jù)研究資料報(bào)道[14-15]，聚維酮碘殺菌速度快，一般在10～30s間便可產(chǎn)生顯著的殺菌效能，但是其也存在一定的角膜毒性導(dǎo)致部分患者在手術(shù)治療后眼部出現(xiàn)刺激感。本次實(shí)驗(yàn)對(duì)兩組患者治療前后的眼部癥狀進(jìn)行評(píng)分，術(shù)前與術(shù)后比較，術(shù)后患者眼部癥狀均改善明顯；而術(shù)后觀察組與對(duì)照組比較，觀察組眼部癥狀評(píng)分明顯低于對(duì)照組，分析其原因可能是對(duì)照組患者術(shù)前使用聚維酮碘消毒后未使用沖洗液清洗藥物殘留，改良式預(yù)防措施的觀察組患者眼部癥狀評(píng)分滿足臨床要求。本研究的缺陷即收集的研究對(duì)象范圍狹窄、人數(shù)較少，未對(duì)導(dǎo)致眼內(nèi)感染的細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng)研究，希望在之后的研究中分析導(dǎo)致眼內(nèi)感染的細(xì)菌類型為臨床預(yù)防和治療提供指導(dǎo)。
綜上所述，在基層醫(yī)院白內(nèi)障手術(shù)治療圍術(shù)期使用改良式預(yù)防措施并應(yīng)針對(duì)術(shù)后眼內(nèi)感染制定系統(tǒng)的預(yù)防措施，能降低術(shù)后眼內(nèi)感染的發(fā)生率，改善患者眼部不良癥狀表現(xiàn)。
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城市最早出現(xiàn)的公益機(jī)構(gòu)中，就有醫(yī)院[1]。在武漢地區(qū)，百年歷史的有市普愛(ài)醫(yī)院（源于1864年）、協(xié)和醫(yī)院（源于1866）、省中醫(yī)院（1868年）、市三醫(yī)院（1875年）、市中心醫(yī)院（1880年）、同濟(jì)醫(yī)院（1900年）等，到1939年武漢地區(qū)已有13所教會(huì)醫(yī)院[2]。由于建院歷史悠久，這些醫(yī)院中依稀存有少量的百年建筑物。百年建筑物是醫(yī)院歷史的見(jiàn)證，但不同程度存在著修繕困難、難以使用的現(xiàn)實(shí)。如何有效修繕，并最大限度發(fā)揮百年建筑物的歷史見(jiàn)證功能和現(xiàn)實(shí)使用功能，我們做過(guò)一些探索，取得過(guò)較好效果?，F(xiàn)簡(jiǎn)要報(bào)告如下。
1.武漢地區(qū)醫(yī)院百年建筑物的建筑及結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
建筑特點(diǎn)?；浇虃魅胛錆h，是在清咸豐十一年（1861年）、漢口被迫開(kāi)埠以后。1861年6月，英國(guó)倫敦會(huì)教士楊格非到達(dá)漢口，在漢口漢正街金庭公店開(kāi)始傳教。隨著基督教來(lái)到武漢，基督教主辦的教會(huì)醫(yī)院也開(kāi)始出現(xiàn)在武漢[2,3]。這些教會(huì)醫(yī)院的建筑，以歐式建筑風(fēng)格為主，也融入了一部分中國(guó)建筑文化元素。哥特式的拱形門(mén)、大窗戶，拜占庭式的圓穹頂，與中國(guó)傳統(tǒng)的圓木立柱相結(jié)合。武漢教會(huì)醫(yī)院具有代表性的是武昌仁濟(jì)醫(yī)院建筑群，1884年美國(guó)基督教圣公會(huì)傳教醫(yī)生彭勒來(lái)武昌府街口創(chuàng)建武昌仁濟(jì)醫(yī)院，1891年遷至武昌曇華林。1895年仁濟(jì)醫(yī)院新樓落成，醫(yī)院呈三合院布局，主樓兩層磚木結(jié)構(gòu)，兩側(cè)輔以外廊式配樓，立面具有明顯的文藝復(fù)興風(fēng)格。
結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。建筑物依其所使用的材質(zhì)劃分為，土石結(jié)構(gòu)、木結(jié)構(gòu)、磚木結(jié)構(gòu)、砌體結(jié)構(gòu)、混凝土結(jié)構(gòu)、鋼結(jié)構(gòu)、鋼混結(jié)構(gòu)等。武漢教會(huì)醫(yī)院建筑物基本是磚木結(jié)構(gòu)，只有極少數(shù)是混凝土結(jié)構(gòu)。由于木質(zhì)材料耐腐蝕性較差，瓦片的自然分化較為容易，因此磚木結(jié)構(gòu)建筑與鋼結(jié)構(gòu)、鋼混結(jié)構(gòu)等現(xiàn)代建筑相比，使用壽命要短一些，經(jīng)風(fēng)經(jīng)雨、抗擊地震、抵御沖撞的能力也要弱一些。
2.醫(yī)院百年建筑物的一種修繕?lè)椒?/p>
歷經(jīng)百年后，這些磚木結(jié)構(gòu)的老舊建筑物雖幾經(jīng)維修，但多數(shù)是外觀外貌猶在、內(nèi)部破損不堪。這種不堪表現(xiàn)為：屋頂?shù)囊恍┠緱l已腐爛，地面的木質(zhì)地板大部分也難以承受行走等基本荷載。
頂上的土瓦隨時(shí)可能砸下來(lái)，走在地板上的人隨時(shí)可能被陷進(jìn)去。出于安全考慮，這些百年建筑物中的近一半被閑置起來(lái)。拆除吧，是遺憾，不拆除吧，又難以使用。
目前最常用的修繕?lè)椒ㄊ遣馉€補(bǔ)缺。該方法是拆除掉屋頂、地板中腐爛的部分，然后對(duì)缺損、腐爛的地方進(jìn)行修補(bǔ)。這種方法的結(jié)果是，較好地保存了建筑物的外觀外貌及內(nèi)部結(jié)構(gòu)風(fēng)格，適合于歷史文物級(jí)的老舊建筑物的保存。缺憾是無(wú)法從根本上延長(zhǎng)老舊建筑物的保存年限，同時(shí)，也限定了老舊建筑物的正常使用。
對(duì)于沒(méi)有被納入歷史文物范疇的百年建筑物，可以嘗試另一種修繕?lè)椒ǎ?、對(duì)于墻體部分，原汁原味地保留。2、對(duì)已經(jīng)超過(guò)了使用年限的地板、屋頂部分，采用現(xiàn)代鋼筋混凝結(jié)構(gòu)徹底替代。3、通過(guò)鋼筋混凝結(jié)構(gòu)，調(diào)整內(nèi)部樓層的高度。4、利用工程技術(shù)，將原汁原味的墻體部分與現(xiàn)代鋼筋混凝結(jié)構(gòu)的內(nèi)部主體部分有效連接。
這種修繕?lè)椒梢赃_(dá)到3個(gè)效果：1、原汁原味保留了老舊建筑物的外貌。2、內(nèi)部主體部分采用鋼筋混凝結(jié)構(gòu)，使老舊建筑物今后的使用年限一如嶄新的現(xiàn)代建筑。3、樓層高度的調(diào)整，鋼筋混凝結(jié)構(gòu)的大跨度，使老舊建筑物內(nèi)部的實(shí)用性大大增強(qiáng)。
3.醫(yī)院百年建筑物修繕如舊使用如新的實(shí)踐
武漢市第三醫(yī)院臨近彭劉楊路的一幢3層建筑，始建于1900年前后，已有100年歷史，該建筑物曾是教會(huì)醫(yī)院管理者的寓所?？紤]到居住實(shí)際，該建筑物一樓低矮，主要用于堆放雜物。二樓、三樓層高相對(duì)寬松，以內(nèi)樓梯與一樓相連。每層建筑面積90平米，3層共270平米。
建筑物外觀是較典型的哥特式風(fēng)格，拱形門(mén)、大窗戶。木條鐵皮平面樓頂，木質(zhì)地板、木質(zhì)樓梯。歷經(jīng)100年風(fēng)雨后，雖幾經(jīng)小修小補(bǔ)，該建筑依然破損嚴(yán)重。更主要的是，一樓1.8米、二樓三樓各3.6米的層高，限定了它作為醫(yī)療業(yè)務(wù)用房的使用。該建筑先后用于單位幼兒園，也被出租用于小型餐飲。2011年經(jīng)營(yíng)餐飲過(guò)程中失火，被消防部門(mén)勒令停業(yè)?；馂?zāi)過(guò)后，一、二層間的樓板幾近坍塌，已無(wú)法繼續(xù)使用，該建筑物被閑置下來(lái)。2004年，武漢市第三醫(yī)院決定對(duì)該建筑物徹底修繕，用于小兒眼科、成人眼科的門(mén)診。
第一步：確定方案。保留該建筑物的四周外墻，掏空層板和頂板，改用鋼筋混凝框架結(jié)構(gòu)，內(nèi)框架結(jié)構(gòu)與西式風(fēng)格的外墻連接。
第二步：地基勘察。請(qǐng)勘察設(shè)計(jì)部門(mén)對(duì)該建筑物所處地質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行勘察，提出地質(zhì)基礎(chǔ)報(bào)告。
第三步：施工設(shè)計(jì)。委托具備設(shè)計(jì)資質(zhì)的建筑設(shè)計(jì)所設(shè)計(jì)。一樓層高調(diào)整為3.6米，二、三樓層高調(diào)整為2.7米。施工圖紙出來(lái)后，按程序進(jìn)入施工單位的招標(biāo)選擇。
第四步：維修施工。依次按以下程序進(jìn)行。1、拆除墻體以外部分，采用鋼管和扣件等對(duì)墻體拉緊、固定，確保后續(xù)施工安全。2、采用沉臺(tái)法基礎(chǔ)施工。3、鋼筋混凝框架施工。隨著鋼筋混凝框架高度的上升，框架結(jié)構(gòu)層面鋼筋頭逐步與原有墻體連接、固定，從下層開(kāi)始逐步拆除固定墻體的鋼管和扣件。4、屋面防水處理。5、依功能所需和布局考慮，對(duì)框架結(jié)構(gòu)內(nèi)部隔斷。6、地面、墻面、頂部裝修與粉刷。
第五步：修繕驗(yàn)收。
整個(gè)修繕過(guò)程歷時(shí)6個(gè)月，勘察、設(shè)計(jì)、土建和裝修在內(nèi)總費(fèi)用78萬(wàn)元，2889元/平米。修繕后，該建筑保持了原有的西式建筑風(fēng)格，內(nèi)部全框架結(jié)構(gòu)結(jié)實(shí)耐用。2004年底醫(yī)院小兒眼科、成人眼科進(jìn)駐后，一樓成為寬敞明亮的視光中心、小兒眼科普通門(mén)診、小兒眼科專家門(mén)診，二樓是成人眼科門(mén)診，三樓是潔凈的手術(shù)室。運(yùn)行1年，平均日門(mén)診量在100人次，平均每日手術(shù)2臺(tái)，年業(yè)務(wù)收入達(dá)到了220萬(wàn)元，取得了良好的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。對(duì)公立醫(yī)院成本控制而言，是一個(gè)值得推廣的做法[4]。
2006年7月，因長(zhǎng)江大橋武昌匝道 工程需要，在市政府相關(guān)部門(mén)統(tǒng)一規(guī)劃下，該建筑物連同其它近20幢建筑物被拆除。
4.對(duì)其它百年建筑物修繕工作的啟示
江西婺源老民居、安徽徽派建筑、江蘇周莊古建筑等，歷經(jīng)百年風(fēng)雨，目前多有破損。再過(guò)50年、100年，這些古建筑還能否安然存在，是值得堪憂的事。
原汁原味保留外墻，掏空內(nèi)部結(jié)構(gòu)，改用鋼筋混凝框架，不但使原有建筑風(fēng)格、原有的外墻保留下來(lái)，而且使得這些建筑物的使用壽命和嶄新的框架結(jié)構(gòu)房屋一樣，至少可以重新獲得70-100年的使用壽命。該方法不失為一種集保護(hù)、使用二合為一，且性價(jià)比較高的修繕?lè)绞?。?duì)不屬于歷史文物范疇的其它百年建筑物的修繕工作，具有借鑒作用。
One method and practice in protecting the old building of hospital
Lu huaxin Lu yang Li hong Huang xianghua
Key words: old building; protecting; practice
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1 材料擺動(dòng)切割在多線切割機(jī)中的應(yīng)用
多線切割機(jī)廣泛應(yīng)用于 IC（集成電路）、IT（信息技術(shù)）、PV（光伏）行業(yè)中，如單晶硅、藍(lán)寶石、石英晶體、磁性材料、光學(xué)玻璃等硬脆性材料精密切片加工，是光電信息產(chǎn)業(yè)核心器件基片制造流程中的關(guān)鍵裝備。多線切割是目前最先進(jìn)的切片加工技術(shù)，其原理是通過(guò)金屬線的高速往復(fù)運(yùn)動(dòng)把磨料帶入待切割材料加工區(qū)域進(jìn)行研磨，將待切件同時(shí)切割為數(shù)百或數(shù)千片薄片的創(chuàng)新性切片工藝。[1]
切割材料擺動(dòng)型多線切割機(jī)以其高效率、高精度、低損耗，所切硅片彎曲度小、翹曲度小、表面質(zhì)量高等優(yōu)點(diǎn)逐漸取代傳統(tǒng)的多線切割機(jī)成為硅片切割加工的主要設(shè)備。
由多年的實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)和產(chǎn)業(yè)化的實(shí)踐積累，我們已經(jīng)生產(chǎn)出了更成熟的硬脆材料多線切割機(jī)設(shè)備。但隨著LED市場(chǎng)的要求越來(lái)越高，固有機(jī)型的升級(jí)改進(jìn)迫在眉睫，多家企業(yè)已經(jīng)開(kāi)始進(jìn)行革新，材料擺動(dòng)切割正是在這樣的背景下研制成功的。
如圖1所示，料擺結(jié)構(gòu)由工作臺(tái)電機(jī)帶動(dòng)擺動(dòng)電機(jī)，由上到下勻速運(yùn)動(dòng)，順時(shí)針逆時(shí)針往復(fù)運(yùn)動(dòng)，垂直位置作為homing point。
2 電氣硬件結(jié)構(gòu)
如圖2所示，搖擺機(jī)構(gòu)的控制系統(tǒng)由觸摸屏、PLC控制器、伺服驅(qū)動(dòng)器和電機(jī)，過(guò)擺檢測(cè)組成。
HMI與PLC之間使用Ethernet協(xié)議標(biāo)準(zhǔn)，PLC與伺服驅(qū)動(dòng)器之間使用串口協(xié)議標(biāo)準(zhǔn)，PLC中網(wǎng)口串口兼容，使用靈活。
3 PLC簡(jiǎn)介
當(dāng)代FA中，自動(dòng)控制領(lǐng)域成熟的技術(shù)莫過(guò)于PLC技術(shù)，傳統(tǒng)的繼電器控制系統(tǒng)使用了大量的中間繼電器、時(shí)間繼電器，由于觸點(diǎn)接觸不良，容易出現(xiàn)故障。PLC用軟件代替大量的中間繼電器和時(shí)間繼電器，僅剩下與輸入和輸出有關(guān)的少量硬件元件，接線可減少到繼電器控制系統(tǒng)的1/10-1/100，因觸點(diǎn)接觸不良造成的故障大為減少。PLC控制結(jié)構(gòu)如圖3所示。
CPU是PLC的核心，通常由單片機(jī)擔(dān)當(dāng)。它有如下操作：
（1）刷新輸入和輸出。這個(gè)功能允許CPU讀取輸入端狀態(tài)和驅(qū)動(dòng)輸出端；（2）執(zhí)行算數(shù)和邏輯運(yùn)算。CPU能夠處理包括在PLC中的所有算數(shù)和邏輯運(yùn)算；（3）同存儲(chǔ)器通訊。PLC的程序和數(shù)據(jù)存儲(chǔ)在存儲(chǔ)器中，CPU讀或?qū)懘鎯?chǔ)器存儲(chǔ)單元的內(nèi)容；（4）掃描應(yīng)用程序。應(yīng)用程序是指梯形圖，是用編程器編寫(xiě)的指令集，掃描程序允許PLC去執(zhí)行又編程人員編寫(xiě)的專用應(yīng)用程序；（5）多樣的脈沖控制?？蓮腃PU單元內(nèi)置輸出點(diǎn)發(fā)出固定占空比脈沖信號(hào)，脈沖輸入到伺服電動(dòng)機(jī)驅(qū)動(dòng)器來(lái)達(dá)到定位/速度控制。
存儲(chǔ)器單元在PLC中是一個(gè)存儲(chǔ)信息、數(shù)據(jù)和程序的元件。PLC中帶有只讀存儲(chǔ)器ROM和隨機(jī)存儲(chǔ)器RAM。PLC的操作程序存儲(chǔ)在ROM中而梯形邏輯程序存儲(chǔ)在RAM中。根據(jù)控制的復(fù)雜程度和型號(hào)的不同，PLC的RAM存儲(chǔ)器從1K到16K不等。
PLC的輸入模塊包括開(kāi)關(guān)量、模擬量和特殊用途的模塊。OMRON的開(kāi)關(guān)量輸入模塊是有源輸入模塊，輸入電壓是直流24V，內(nèi)部采用光電隔離，大大提高了抗干擾能力。輸入點(diǎn)數(shù)是24點(diǎn)，中斷脈沖接收輸入最大8點(diǎn)，高速計(jì)數(shù)器輸入為4軸，頻率為100kHz（單相）/50kHz（相位差）。
本結(jié)構(gòu)所用的PLC輸出為晶體管漏型輸出，程序最大容量20K步，最大輸入輸出點(diǎn)數(shù)為320點(diǎn)，輸入輸出點(diǎn)數(shù)為40點(diǎn)，輸出點(diǎn)數(shù)16點(diǎn)。可擴(kuò)展兩個(gè)串行接口RS-232C端口與HMI進(jìn)行通訊。
4 PLC編程語(yǔ)言的優(yōu)點(diǎn)
PLC采用簡(jiǎn)明的梯形圖、邏輯圖或語(yǔ)句表等編程語(yǔ)言，而無(wú)需計(jì)算機(jī)知識(shí)，因此系統(tǒng)開(kāi)發(fā)周期短，現(xiàn)場(chǎng)調(diào)試容易。另外，可在線修改程序，改變控制方案而不拆動(dòng)硬件。
PLC的梯形圖程序一般采用順序控制設(shè)計(jì)法來(lái)設(shè)計(jì)。這種編程方法很有規(guī)律，很容易掌握。對(duì)于復(fù)雜的控制系統(tǒng)，設(shè)計(jì)梯形圖的時(shí)間比設(shè)計(jì)相同功能的繼電器系統(tǒng)電路圖的時(shí)間要少得多。
PLC的用戶程序可以在實(shí)驗(yàn)室模擬調(diào)試，輸入信號(hào)用小開(kāi)關(guān)來(lái)模擬，通過(guò)PLC上的發(fā)光二極管可觀察輸出信號(hào)的狀態(tài)。完成了系統(tǒng)的安裝和接線后，在現(xiàn)場(chǎng)的統(tǒng)調(diào)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題一般通過(guò)修改程序就可以解決，系統(tǒng)的調(diào)試時(shí)間比繼電器系統(tǒng)少得多。
5 控制原理
這種擺動(dòng)結(jié)構(gòu)用到的伺服驅(qū)動(dòng)器可以提供位置、速度、扭矩三種操作模式，經(jīng)分析，此搖擺裝置適于采用位置控制模式。
位置控制模式被應(yīng)用于精密定位的場(chǎng)合，這種控制方式有兩種命令輸入方式：脈沖及內(nèi)部寄存器輸入，具有方向性的命令脈沖輸入可經(jīng)由外界來(lái)的脈沖來(lái)操縱電機(jī)的轉(zhuǎn)動(dòng)角度，最高可接受高達(dá)4Mpps的脈沖輸入。為了更方便做位置控制，提供64組位置命令寄存器，利用通訊方式來(lái)改變命令寄存器的內(nèi)容值 。
5.1 定位方法
5.2 循環(huán)擺動(dòng)原理
根據(jù)順序控制的原理，通過(guò)PLC指令來(lái)變換脈沖數(shù)值的符號(hào)位，進(jìn)而改變電機(jī)的轉(zhuǎn)動(dòng)方向。當(dāng)開(kāi)始信號(hào)置1之后，標(biāo)記標(biāo)志位，使內(nèi)存地址記住此時(shí)的狀態(tài)，脈沖輸出一定的值，通過(guò)PLC端子通過(guò)內(nèi)部輔助繼電器轉(zhuǎn)換為電信號(hào)，發(fā)給伺服驅(qū)動(dòng)器指令，電機(jī)以設(shè)定方向開(kāi)始運(yùn)動(dòng)，當(dāng)脈沖發(fā)出結(jié)束，電機(jī)運(yùn)動(dòng)結(jié)束，這時(shí)標(biāo)記標(biāo)志位取反，正轉(zhuǎn)指令置0，反轉(zhuǎn)指令置1，脈沖繼續(xù)發(fā)出，電機(jī)此時(shí)接收到指令，開(kāi)始反向運(yùn)動(dòng)。
這樣標(biāo)志位的循環(huán)置位，控制電機(jī)的運(yùn)轉(zhuǎn)，實(shí)現(xiàn)了料臺(tái)的往復(fù)運(yùn)動(dòng)，增加了材料與鋼線的摩擦，提高切割效率。部分程序如圖5所示。
5.3 擺動(dòng)停止的計(jì)算方法
6 結(jié)束語(yǔ)
此搖擺結(jié)構(gòu)雖未達(dá)到完美，但已經(jīng)應(yīng)用到了實(shí)際機(jī)型中，在實(shí)踐中再尋找升級(jí)方案，客戶的建議是我們的前進(jìn)動(dòng)力。這是國(guó)內(nèi)半導(dǎo)體行業(yè)大膽自主研發(fā)國(guó)外先進(jìn)技術(shù)的新進(jìn)展，為半導(dǎo)體切割技術(shù)提供了新思路。今后還將會(huì)不斷地通過(guò)研究與實(shí)驗(yàn)完善擺動(dòng)切割工藝。
大量臨床研究證實(shí)早期慢性腎臟病是蛋白尿?yàn)橹饕R床表現(xiàn)的，而蛋白尿是一個(gè)獨(dú)立的導(dǎo)致腎臟病變進(jìn)展的主要因素，減少尿蛋白排泄就能延緩慢性腎臟病進(jìn)展，因此加強(qiáng)對(duì)腎臟病尿蛋白的認(rèn)識(shí)顯的至關(guān)重要，為臨床辨證施治提供必要的依據(jù)。
1 中醫(yī)對(duì)慢性腎臟病尿蛋白的基本認(rèn)識(shí) 蛋白質(zhì)是構(gòu)成人體和維持機(jī)體生命活動(dòng)的基本物質(zhì)之一，屬中醫(yī)學(xué)“精”，“精微”概念?！熬被颉熬ⅰ奔仁菢?gòu)成機(jī)體的基本物質(zhì)，又是人體各種功能活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ)，如氣、血、津液，以及從飲食物中吸收的“水谷精微”等，《素問(wèn)?金匱真言論》說(shuō)：“夫精者，身之本也”，《靈樞?經(jīng)脈》說(shuō)：“人始生，先成精”。因此，尿蛋白是指尿中流失的“精”或“精微”。
1.1 肺虛 肺居胸中，如“華蓋”以覆諸臟，無(wú)論吸入之清氣，還是“脾氣散精，上歸于肺”的水谷精微，均以下降為順，“若霧露之溉”，方能布散全身，化生“精氣”，因此，肺有“宣發(fā)、肅降”的功能；肺為“肺為水上之源”，能“通調(diào)水道”，使水津“下注膀胱”，促進(jìn)和維持水液代謝。肺的宣發(fā)、肅降功能正常，則肺氣通暢，精微四布；水道通調(diào)，水津下達(dá)。相反，如慢性腎病患者肺氣失于宣發(fā)、肅降，上歸于肺的水谷精微不能通過(guò)肺氣布散全身，化生精氣，致其不歸正道，精微下注，出現(xiàn)尿蛋白。
1.2 脾虛 脾主運(yùn)化水濕及水谷精微，統(tǒng)攝精、血、津液于一身，與胃共同完成飲食、水谷的消化、吸收、轉(zhuǎn)輸，所以，脾胃為氣血生化之源、后天之本。慢性腎病患者飲食不節(jié)或勞力太過(guò)，均可導(dǎo)致脾失健運(yùn)，脾氣下陷，統(tǒng)攝失職，精微下注，出現(xiàn)尿蛋白；若脾虛不能運(yùn)化水濕，濕邪困脾，脾精不散，精微下注，也出現(xiàn)尿蛋白。
1.3 腎虛 “腎者，水臟，主津液”（《素問(wèn)?逆調(diào)論》），腎是分清泌濁，排出尿液的器官，更是貯藏精氣和約束精氣的臟器?！端貑?wèn)?六節(jié)臟相論》說(shuō)：“腎者，主蟄，封藏之本，精之處也”，張景岳也說(shuō)：“腎者，胃之關(guān)也，位居亥子，開(kāi)竅于二陰，而司約束”（《景岳全書(shū)》）。當(dāng)各種原因?qū)е侣阅I病患者腎之封藏功能失職時(shí)，則精氣不藏，精微外泄，出現(xiàn)尿蛋白。
1.4 濕熱 “下焦之病，責(zé)之濕熱”（《醫(yī)方考》），《雜病證治準(zhǔn)繩》亦云：“濕氣入腎，腎主水，水流濕，從其類也”，濕熱之邪與腎病關(guān)系密切，“濕熱無(wú)形，入肺乘脾，布散三焦”（《臨證指南醫(yī)案?腫脹門(mén)》），濕熱壅滯上焦，上焦不利，肺失宣肅，則肺虛；壅阻中焦，中焦不利，脾失統(tǒng)攝，則脾虛；留滯下焦，下焦不利，腎失封藏，則腎虛。肺、脾、腎皆虛，則精微下注，出現(xiàn)尿蛋白。
1.5 瘀血 “腎藏精，精者，血之所成也”（《諸病源候論》）。慢性腎病患者一般病程都較長(zhǎng)，纏綿難愈，腎病日久，腎絡(luò)失養(yǎng)，脈絡(luò)不利，瘀血內(nèi)生。因此，《素問(wèn)?痹論》謂：“久病入深，營(yíng)衛(wèi)之行澀，經(jīng)絡(luò)時(shí)疏，故不通”，《醫(yī)林改錯(cuò)》曰：“久病入絡(luò)為血瘀”。慢性腎病患者腎絡(luò)瘀血，精氣不循常道，壅而外溢，出現(xiàn)尿蛋白。
2 中藥治療慢性腎臟病尿蛋白的基本方法
2.1 滋陰補(bǔ)腎法 適用于慢性腎病患者出現(xiàn)尿蛋白而表現(xiàn)為腎陰虛者。代表方：六味地黃丸、左歸丸。以上兩方相比，左歸丸補(bǔ)腎滋陰之效較六味地黃丸強(qiáng)，適用于陰虛較重者。常用補(bǔ)腎陰藥：干地黃、山萸肉、枸杞子、女貞子、旱蓮草、玄參、龜板、鱉甲、五味子等。
2.2 補(bǔ)氣養(yǎng)陰法 適用于慢性腎病患者出現(xiàn)尿蛋白而表現(xiàn)為氣陰兩虛者。代表方：參芪地黃湯。常用益氣藥：人參、黨參、黃芪；常用養(yǎng)陰藥：沙參、天門(mén)冬、麥冬、生地、石斛、玉竹、山萸肉、五味子、花粉等；益氣兼養(yǎng)陰藥：西洋參、太子參、黃精、山藥等。
2.3 滋補(bǔ)肝腎法 適用于慢性腎病患者出現(xiàn)尿蛋白而表現(xiàn)為肝腎陰虛者。代表方：麥味地黃丸。常用滋補(bǔ)肝腎藥：玄參、枸杞子、白芍、麥冬、生地、首烏、女貞子、旱蓮草、龜板、鱉甲、五味子等。
2.4 滋陰降火法 適用于慢性腎病患者出現(xiàn)尿蛋白而表現(xiàn)為陰虛火旺者。代表方：知柏地黃丸、大補(bǔ)陰丸等。常用藥：黃柏、知母、丹皮、生地、玄參等。
2.5 滋陰潛陽(yáng)法 適用于慢性腎病患者出現(xiàn)尿蛋白而表現(xiàn)為陰虛陽(yáng)亢者。代表方：天麻鉤藤飲、鎮(zhèn)肝熄風(fēng)湯等。常用滋陰熄風(fēng)潛陽(yáng)藥：鉤藤、白芍、生地、夏枯草、龍骨、生牡蠣、龜板、鱉甲、石決明、珍珠母等。
2.6 補(bǔ)氣溫腎法 適用于慢性腎病患者出現(xiàn)尿蛋白而表現(xiàn)為氣虛者。代表方：金匱腎氣丸加減。常用補(bǔ)腎藥：熟地、山萸肉、枸杞子、菟絲子、首烏、女貞子、肉蓯蓉、補(bǔ)骨脂、沙菀子、杜仲等；常用補(bǔ)氣藥：黃芪、人參、黨參、山藥、白術(shù)等。
2.7 溫補(bǔ)腎陽(yáng)法 適用于慢性腎病患者出現(xiàn)尿蛋白而表現(xiàn)為腎陽(yáng)不足者。代表方：右歸丸、金匱腎氣丸等。以上兩方相比，右歸丸溫補(bǔ)腎陽(yáng)之效明顯強(qiáng)于腎氣丸。常用溫補(bǔ)腎陽(yáng)藥：附子、肉桂、仙茅、仙靈脾、肉蓯蓉、菟絲子、杜仲、川斷等。
2.8 陰陽(yáng)并補(bǔ)法 適用于慢性腎病患者出現(xiàn)尿蛋白而表現(xiàn)為陰陽(yáng)兩虛者。代表方：二仙湯。常用平補(bǔ)腎之陰陽(yáng)藥：熟地、枸杞子、菟絲子、杜仲、山藥、五味子、鹿角膠等。
古代醫(yī)家治療慢性腎病患者尿蛋白大多采用“扶正、祛邪”相結(jié)合的基本方法。①補(bǔ)中提升：《靈樞?口問(wèn)》說(shuō)：“中氣不足，溲便為之變”，張景岳也強(qiáng)調(diào)“下陷者宜升提”。在用藥上，一是取“健脾益氣”的藥物，如黨參、黃芪、白術(shù)、茯苓、山藥、甘草等；二是取“升提清陽(yáng)”的藥物，如柴胡、升麻、桔梗、荷葉等；三是取“健脾固腎”的藥物，如山藥、薏苡仁、芡實(shí)、菟絲子、蓮子肉等；四是取“通補(bǔ)任督”藥物，如龜板、鹿角片、鱉甲等。②補(bǔ)腎固精：藥用龜板、阿膠、金櫻子、菟絲子、山萸肉、枸杞子、沙菀子、蓮子、蓮須、芡實(shí)、紫河車等。③清補(bǔ)相兼：清熱化濕藥聯(lián)合健脾補(bǔ)腎藥。如清代王夢(mèng)英所制定的甘露消毒丹是“疏行氣機(jī)，疏利小便，清解邪熱”的方劑。方中連翹、黃芩配合木通、滑石、藿香、蔻仁，能清熱化濕，再配合太子參、白術(shù)、薏苡仁、芡實(shí)、山茱萸、菟絲子，能斂精固精。④清上固下：就是清解肺熱，健脾補(bǔ)腎。清代醫(yī)家多用荊芥、黃芩、桔梗、地骨皮、葶藶子、白茅根，配合芡實(shí)、白蓮須、山茱萸、女貞子、山藥等[1]。
3 當(dāng)代中醫(yī)學(xué)者治療慢性腎臟病尿蛋白的經(jīng)驗(yàn) 隨著中醫(yī)藥治療慢性腎病患者尿蛋白經(jīng)驗(yàn)的積累，當(dāng)代中醫(yī)學(xué)者圍繞尿蛋白的治法、治則，提出很多獨(dú)到的見(jiàn)解。
王鋼教授治療慢性腎病蛋白尿，提倡重視脾胃。脾、腎在生理上有先、后天的關(guān)系。雖然慢性腎病患者病本在腎，但病理上與脾、胃密切相關(guān)。先賢謂“中氣不足，溲便為之變”，“諸濕腫滿，皆屬于脾”，“脾虛則土不制水而反克”。由此可見(jiàn)，脾失健運(yùn)，濕邪留戀是慢性腎病患者出現(xiàn)蛋白尿的主要因素之一。脾胃乃后天之本，中土健旺，后天可資先天。脾胃強(qiáng)弱還決定了慢性腎病患者病情發(fā)展和預(yù)后，而且，藥物的作用也依賴于脾胃的敷布與轉(zhuǎn)輸，若脾胃之氣不旺，則虛不受補(bǔ)，反而徒增其害[2]。
鄭平東教授認(rèn)為，腎受五臟六腑之精而藏之，腎中精氣有賴于后天水谷精微的培育和補(bǔ)養(yǎng)，才能不斷充盈和成熟。對(duì)于慢性腎病患者而言，脾、腎之中一臟傷則兩臟俱傷，一臟損則兩臟俱損。脾不僅為腎輸送水谷精微，加強(qiáng)腎的封藏作用，其本身也有固攝精微和升清降濁的功能。如果脾功能異常，不僅不能助腎，其本身統(tǒng)攝精微和升清降濁的功能也會(huì)受到影響，清者不升，濁者不降，致使尿蛋白更加嚴(yán)重。因此，在治療慢性腎病尿蛋白時(shí)，即使是在邪實(shí)的情況下，也不要忽視顧護(hù)脾、腎[3]。
邵招弟教授認(rèn)為，腎為水火之宅，內(nèi)寓元陰、元陽(yáng)，為人體陰陽(yáng)之根。腎之陰陽(yáng)失衡，氣血、陰陽(yáng)虧虛是慢性腎病患者產(chǎn)生尿蛋白的根本原因。邵氏指出，氣血失調(diào)是尿蛋白產(chǎn)生的最重要病理因素。"腎為氣之根"，脾為氣血生化之源，脾腎虧虛，則氣血不生；腎主藏精，肝主藏血，肝腎虧虛，則精血不能互生。因此，肝、脾、腎虛損常致氣血失調(diào)，從而，導(dǎo)致氣虛不攝，水津不行痰濕內(nèi)生，血行不暢等病理變化。治療慢性腎病患者尿蛋白，首先強(qiáng)調(diào)從病理機(jī)制上把握陰陽(yáng)，消除產(chǎn)生蛋白尿的病理基礎(chǔ)。傷其氣者，增其陽(yáng)，耗其精者，益其陰，正所謂"益火之源以消陰翳，壯水之主以制陽(yáng)光"。另外，調(diào)理氣血注重養(yǎng)氣益血、化氣行水、行氣活血，同時(shí)，也非常注重健脾補(bǔ)腎、扶正攝精等方法[4]。
葉傳慧教授認(rèn)為，清利濕熱是治療慢性腎病尿蛋白的關(guān)鍵，所謂“濕熱不除，蛋白難消”。濕性粘滯膠結(jié)，不易速去的特性也是尿蛋白久治難消的原因。濕邪粘膩而滯，常易化熱，濕熱中阻，脾胃不能升清降濁，使精微物質(zhì)吸收、輸布異常，出現(xiàn)尿蛋白；濕熱下注，擾動(dòng)腎精，使其封藏失職，精微下泄，出現(xiàn)尿蛋白；臨床上大量激素、免疫抑制劑、抗生素的應(yīng)用，必然損傷脾胃，助濕生熱，加重腎絡(luò)損傷，影響腎之封藏，出現(xiàn)尿蛋白。因此，必須注重對(duì)濕熱的治療，臨證時(shí)多用藿香正氣散、龍膽瀉肝丸、菟絲子丸等方藥加減。另外，瘀血是慢性腎病患者臟腑功能失調(diào)的病理產(chǎn)物。腎藏精，精化血，精血互化，故有“腎化血”之說(shuō)。也就是說(shuō)，腎與血之生成、輸布密切相關(guān)。慢性腎病患者在發(fā)病初期，邪氣侵?jǐn)_腎絡(luò)，腎絡(luò)氣血痹阻，即可出現(xiàn)瘀血；慢性腎病多病程悠長(zhǎng)，纏綿難愈，久病入絡(luò)，痹阻腎絡(luò)，可發(fā)瘀血；腎病日久，正氣衰敗，氣虛不攝，血失常道，亦為瘀血。因此，瘀血貫穿著慢性腎病發(fā)病的各個(gè)時(shí)期。治療慢性腎病患者蛋白尿均強(qiáng)調(diào)活血化瘀法的運(yùn)用，常用川芎、桃仁、紅花、丹參等藥物[5]。
謝貴權(quán)教授認(rèn)為，慢性腎病患者無(wú)論何因?qū)е履虻鞍?，其病機(jī)關(guān)鍵在于腎氣不固，精微失攝。其病位在腎，但與肺、脾、肝相關(guān)，其中，與脾腎關(guān)系密切。脾腎虧虛是其本，風(fēng)、熱、濕、毒是標(biāo)。常用七法辨治：祛風(fēng)法、清熱解毒法、利水祛濕法、活血化瘀法、平肝熄風(fēng)法、健脾益氣法、補(bǔ)腎攝精法等。另外，強(qiáng)調(diào)必須正確處理扶正與祛邪，扶正應(yīng)重視補(bǔ)益脾腎，祛邪應(yīng)以祛風(fēng)除濕熱為主[6]。
4 結(jié)語(yǔ) 中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，慢性腎病患者所出現(xiàn)的尿蛋白是人體“精微下注”、“精(氣)外泄”的病理產(chǎn)物，屬“精”，“精微”范疇。腎主“藏精”，脾主“運(yùn)化水谷精微”，肺主氣，“氣布精”，腎、脾、肺皆為調(diào)節(jié)機(jī)體“精(氣)”代謝的主要器官。腎、脾、肺功能失調(diào)，則內(nèi)生濕熱、瘀血等病理產(chǎn)物，最終，導(dǎo)致精微下注，精氣外泄，形成尿蛋白。因此，國(guó)內(nèi)學(xué)者多從“腎、脾、肺、濕熱、瘀血”分別論治慢性腎病尿蛋白。
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中圖分類號(hào)：G640 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1674-9324（2014）51-0211-02
一、植物蛋白產(chǎn)業(yè)概況
植物蛋白是人類的重要營(yíng)養(yǎng)源，因而是食品工業(yè)一個(gè)非常重要的分支。如何有效利用植物蛋白資源、如何得到高品質(zhì)的植物蛋白產(chǎn)品及如何處理好植物蛋白生產(chǎn)與環(huán)境的關(guān)系是當(dāng)前國(guó)內(nèi)外研究及工業(yè)生產(chǎn)的重要課題。我國(guó)的植物蛋白工業(yè)起步于20世紀(jì)80年代，成長(zhǎng)于90年代，擴(kuò)大于2000年之后。與歐美及日本等發(fā)達(dá)國(guó)家相比，我國(guó)的植物蛋白工業(yè)規(guī)模雖然非常龐大，但是技術(shù)落后，植物蛋白產(chǎn)品的經(jīng)濟(jì)附加值低，專一性及功能性較差。這與我國(guó)植物蛋白工業(yè)起步晚，生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)不足及從業(yè)人員整體水平不高等客觀原因密切相關(guān)。為了使得我國(guó)植物蛋白工業(yè)盡快扭轉(zhuǎn)這個(gè)現(xiàn)狀，積極地追趕和超過(guò)發(fā)達(dá)國(guó)家，高校應(yīng)該為植物蛋白企業(yè)輸送更多更好的專業(yè)技術(shù)及創(chuàng)新人才。
二、高校輸送植物蛋白從業(yè)高水平人才的挑戰(zhàn)與機(jī)遇
關(guān)于高校輸送植物蛋白從業(yè)高水平人才的挑戰(zhàn)，本文將從企業(yè)、大學(xué)、教師和學(xué)生四方面來(lái)分析。
目前我國(guó)植物蛋白企業(yè)一般分布在經(jīng)濟(jì)不發(fā)達(dá)地區(qū)，生產(chǎn)技術(shù)水平不高，對(duì)于高水平人才不是很渴求。同時(shí)，由于這樣的生產(chǎn)狀況，生產(chǎn)產(chǎn)品種類少，功能性差，經(jīng)濟(jì)附加值也低，從而導(dǎo)致企業(yè)從業(yè)人員的薪酬較低。這進(jìn)一步限制了人才的從業(yè)愿望。不過(guò)，隨著社會(huì)的不斷發(fā)展進(jìn)步，人們對(duì)于飲食的要求越來(lái)越高（美味、健康、營(yíng)養(yǎng)和安全）。這就需要植物蛋白企業(yè)提高自身的生產(chǎn)技術(shù)水平，提高植物蛋白產(chǎn)品的品質(zhì)。在此趨勢(shì)下，植物蛋白企業(yè)將需要越來(lái)越多植物蛋白方面的人才。
目前大學(xué)的教育模式依然是以教師的講授為主，大學(xué)生的課程任務(wù)較重，學(xué)生疲于應(yīng)付考試，對(duì)于所學(xué)課程會(huì)有一定抵觸心理。這些狀況非常不利于對(duì)于學(xué)生學(xué)習(xí)興趣的培養(yǎng)，而且學(xué)生對(duì)于所學(xué)知識(shí)不能很好地理解和掌握。因?yàn)檫@種種問(wèn)題的存在，許多國(guó)內(nèi)高校開(kāi)始積極開(kāi)展各種方式的教學(xué)改革。華中科技大學(xué)劉玉教授建立的“點(diǎn)團(tuán)隊(duì)”是“寓教于研”的一個(gè)非常成功的例子[1]，她將自己與企業(yè)合作的項(xiàng)目帶進(jìn)研究室，讓“點(diǎn)團(tuán)隊(duì)”成員組成不同項(xiàng)目小組，由項(xiàng)目負(fù)責(zé)人帶領(lǐng)小組成員團(tuán)結(jié)協(xié)作，共同解決問(wèn)題。這種方式極大地調(diào)動(dòng)了學(xué)生的理論聯(lián)系實(shí)際、解決實(shí)際問(wèn)題的興趣和積極性，以及小組成員團(tuán)結(jié)合作的精神。同時(shí)，團(tuán)隊(duì)成員受到了許多大型企業(yè)的青睞。清華大學(xué)為進(jìn)一步調(diào)動(dòng)學(xué)生課外鉆研的主動(dòng)性、積極性，充分發(fā)揮學(xué)生獨(dú)立思考、探索和渴望解決問(wèn)題的主動(dòng)性等，基于“寓教于研”的理念，設(shè)立了大學(xué)生研究訓(xùn)練計(jì)劃，取得了非常喜人的成果[2]。校食品學(xué)院在教育改革方面也做出了積極的嘗試，為大學(xué)生設(shè)立了多個(gè)項(xiàng)目。讓學(xué)生盡早選定導(dǎo)師，為學(xué)生了解專業(yè)現(xiàn)狀提供了基礎(chǔ)；在了解專業(yè)的前提下，學(xué)生可以根據(jù)興趣通過(guò)“Participation in Research Program”項(xiàng)目進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室[3]，進(jìn)一步了解實(shí)驗(yàn)技術(shù)和科研方法；還有可以選擇導(dǎo)師，通過(guò)組隊(duì)進(jìn)行“大創(chuàng)項(xiàng)目”的實(shí)踐和研究[4]。
發(fā)達(dá)國(guó)家的高等教育起步早，非常注重學(xué)生的興趣、動(dòng)手能力、獨(dú)立思考能力、創(chuàng)新思維、個(gè)性、責(zé)任心等培養(yǎng)。日本的國(guó)立巖手大學(xué)的教師/學(xué)生比大，非常注重對(duì)于學(xué)生的引導(dǎo)及啟發(fā)，注重興趣及責(zé)任心培養(yǎng)，尊重學(xué)生選擇。大學(xué)生的學(xué)習(xí)主要可以分為兩個(gè)階段：大一到大三的各專業(yè)知識(shí)學(xué)習(xí)及大四的所選專業(yè)的進(jìn)一步學(xué)習(xí)。在前一階段，食品方向的各專業(yè)教授會(huì)根據(jù)專業(yè)的發(fā)展適當(dāng)?shù)匦薷慕虒W(xué)內(nèi)容，并且系統(tǒng)地設(shè)計(jì)一個(gè)本專業(yè)的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)，使學(xué)生對(duì)于各專業(yè)的基礎(chǔ)及前沿知識(shí)有個(gè)基本了解；在后一階段，學(xué)生在了解各專業(yè)的基礎(chǔ)上，根據(jù)自己的興趣，選擇一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，在導(dǎo)師直接指導(dǎo)下，獨(dú)立完成一個(gè)比較系統(tǒng)的研究課題。通過(guò)這種教育模式，學(xué)生動(dòng)手能力非常強(qiáng)，獨(dú)立思考能力也得到了增強(qiáng)。另外，在實(shí)驗(yàn)室期間，指導(dǎo)教師非常注重學(xué)生為人處世能力（如守時(shí)、團(tuán)隊(duì)精神、做事方式、說(shuō)話方式等）的培養(yǎng)，這有利于學(xué)生很好地融入社會(huì)。在美國(guó)的北達(dá)科他州立大學(xué)，該校的教師/學(xué)生比大，非常注重小班教學(xué)和教師與學(xué)生的互動(dòng)，積極地支持大學(xué)生進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，在指導(dǎo)教師的直接指導(dǎo)下，進(jìn)行科研訓(xùn)練及參與企業(yè)的合作項(xiàng)目，并且給予一定的經(jīng)濟(jì)報(bào)酬。學(xué)生在經(jīng)歷一段時(shí)間的實(shí)驗(yàn)室生活后，如果發(fā)現(xiàn)對(duì)于該專業(yè)不是很感興趣，還可以自由選擇另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，甚至是非所學(xué)專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室。這種教育方式非常有利于調(diào)動(dòng)學(xué)生學(xué)習(xí)積極性及學(xué)生個(gè)性的培養(yǎng)，可為社會(huì)輸送各種形式的人才。
Abstract：CASP is the assessment activities representative of the world advanced level of protein structure prediction . TBM can analyze the relationship between structure and function of proteins and protein molecular design. This paper reviews target protein collection， prediction model collection ， evaluation measures and the top5 template-based protein structure prediction methods through the analysis and discussion in CASP10. For proteome studying，especially for those who is difficult to determine the protein structure through experiment analysis has theoretical significance and practical value.
Key words：CASP10； Evaluation measures ；Template-based modeling
迄今為止，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)已經(jīng)有近40年的歷史，期間，人們提出了一系列預(yù)測(cè)方法，取得了豐碩成果。自1994 年起每?jī)赡暝诿绹?guó)加利福尼亞州舉辦一次蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)評(píng)比活動(dòng)-CASP。它代表著蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)領(lǐng)域的世界前沿水平，深入客觀的分析了當(dāng)前的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)技術(shù)水平， 認(rèn)識(shí)到當(dāng)前的方法能力與局限以及將來(lái)的發(fā)展方向。CASP 主要包括三部分：①靶蛋白質(zhì)序列的收集；②蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)模型的收集；③蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)模型及預(yù)測(cè)方法的評(píng)估， 組織會(huì)議公布和討論結(jié)果。
1 CASP10簡(jiǎn)介
1.1靶蛋白質(zhì)序列的收集 在2012年舉辦的CASP10中，來(lái)自23個(gè)國(guó)家的217個(gè)預(yù)測(cè)小組以114個(gè)靶蛋白提交了超過(guò)66000個(gè)預(yù)測(cè)結(jié)果。所選擇的靶蛋白被分為全型靶蛋白和僅服務(wù)器靶蛋白。全型靶蛋白是從具有挑戰(zhàn)性的靶蛋白中選出來(lái)的典型例子，難度評(píng)估指標(biāo)是基于啟發(fā)式搜索和PSI-BLAST模板搜索得出的[1]。并且，在CASP10中，考慮到模板的共識(shí)增加了目標(biāo)類別定義的特殊性，基于得分和LOMETS線串比對(duì)的共同判斷將靶蛋白分為四組：平常組、簡(jiǎn)單組、困難組和極其困難組。
1.2蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)模型的收集 靶蛋白預(yù)測(cè)結(jié)果公布的時(shí)間內(nèi)，各個(gè)靶蛋白通過(guò)自動(dòng)分配系統(tǒng)自動(dòng)轉(zhuǎn)發(fā)給參賽服務(wù)器，追蹤收集服務(wù)器的狀況。經(jīng)過(guò)初步評(píng)估服務(wù)器預(yù)測(cè)結(jié)果之后，預(yù)測(cè)小組提交較好的模型（GDT_TS[2，3]> 60）。在近三次的CASP比賽中，每次都有超多100個(gè)服務(wù)器小組參賽，服務(wù)器預(yù)測(cè)組數(shù)量超過(guò)了專家預(yù)測(cè)組，這反映了在結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)方面自動(dòng)化程度的提高。為了適應(yīng)預(yù)測(cè)結(jié)果的龐大數(shù)據(jù)，修改了預(yù)測(cè)結(jié)果處理，存儲(chǔ)，評(píng)估和可視化的原則。在CASP10中，接受五種不同格式的預(yù)測(cè)結(jié)果：三級(jí)結(jié)構(gòu)TS，殘基-殘基接觸RR，無(wú)序區(qū)域DR，模型質(zhì)量評(píng)估QA，結(jié)合位點(diǎn)的預(yù)測(cè)FN。
1.3蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)模型及方法的評(píng)估 CASP10最大的變化是質(zhì)量評(píng)估的分類，除了QA之外，稍微改變了RR和DR分類的規(guī)則，對(duì)每一個(gè)靶蛋白限制預(yù)測(cè)結(jié)果數(shù)目。在DR分類中，也開(kāi)始要求殘基的預(yù)測(cè)結(jié)果以無(wú)序態(tài)。CASP10最明顯的改進(jìn)是類別的精化。首次出現(xiàn)一個(gè)預(yù)測(cè)小組能成功的提高所有靶蛋白預(yù)測(cè)的準(zhǔn)確度。令人鼓舞的是，這個(gè)結(jié)果由分子動(dòng)力學(xué)方法得出的，顯示出更多的物理學(xué)衍生的方法可為模建做出貢獻(xiàn)。輔助接觸型模建新的分類結(jié)果證實(shí)這些方法可以與適量的額外信息產(chǎn)生更緊缺型的模型[3]。所有提交的模型以預(yù)測(cè)中心與獨(dú)立評(píng)估小組磋商得出的相應(yīng)實(shí)驗(yàn)參考結(jié)構(gòu)為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)估。為了進(jìn)行評(píng)估，靶蛋白的結(jié)構(gòu)序列，殘基編號(hào)，鏈ID需要與公布序列一致[4]。
RMSD[5]是CASP評(píng)估中第一個(gè)評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)，并仍然使用。它很適合評(píng)估結(jié)構(gòu)非常相似的兩個(gè)蛋白之間的差異，但當(dāng)模建的模型結(jié)果非常偏離實(shí)驗(yàn)結(jié)果的時(shí)候，就不是評(píng)估的最佳標(biāo)準(zhǔn)；GDT-TS[5，6]的開(kāi)發(fā)是為了解決RMSD存在的不足之處，并在CASP中成為一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。通過(guò)擴(kuò)大閾值后的平均值，更能突出正確結(jié)構(gòu)的得分；GDT-HA[5，6]是GDT-TS改進(jìn)版，縮小了閾值，更適合高同源性靶蛋白骨架精度評(píng)估；GDT-SC[6]用臨近每一條側(cè)鏈末端特征原子來(lái)比較殘基位置，從而著重在側(cè)鏈位置上來(lái)突出模型之間差異；GDT-like[5，6]評(píng)估模板和模型靶蛋白殘基和相應(yīng)的靶蛋白預(yù)測(cè)殘基全局相似性。這些得分，有序列依賴性性質(zhì)，不能將模型與從與靶蛋白有高結(jié)構(gòu)相似性的不正確構(gòu)象區(qū)分開(kāi)來(lái)，想要完全得出這些差異，用比對(duì)準(zhǔn)確度得分AL0（AL4），可以顯示出比對(duì)正確對(duì)齊殘基所占比例。
CAD[7]是比較基于兩個(gè)結(jié)構(gòu)殘基-殘基接觸域不同的一種新的評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)，得分可幫助找到物理學(xué)上更加合理的模型；LDDT[8]是另一種最新推出的無(wú)疊合評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)，是基于模型全原子距離圖譜和靶蛋白結(jié)構(gòu)的比較。相似于CAD得分，非常適合在結(jié)構(gòu)域動(dòng)態(tài)存在的本地模型質(zhì)量評(píng)估，仍然保留良好的相關(guān)性；SG[4]得分反映基于相應(yīng)子結(jié)構(gòu)局部相似性的模板-靶蛋白相似性，得出的是模型結(jié)構(gòu)與靶蛋白球體一致的百分比；RPF[9]最初開(kāi)發(fā)是用來(lái)評(píng)估NMR結(jié)構(gòu)準(zhǔn)確度的，類似于IDDT，它是一種基于比較模板和靶蛋白距離矩陣的無(wú)疊合標(biāo)準(zhǔn)。已經(jīng)觀察到RPF值和GDT-TS/RMSD值有一個(gè)很強(qiáng)的相關(guān)性。
Molprobity[10]得分可幫助評(píng)估者區(qū)分正確和扭曲立體化學(xué)特征的模型。整體得分包括四個(gè)部分來(lái)評(píng)估結(jié)構(gòu)定義的準(zhǔn)確性：沖突得分，旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體異常得分，拉式構(gòu)像圖偏離得分，拉式構(gòu)象圖符合得分。
2 CASP10中最佳模板依賴型蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)方法
目前，常用的蛋白結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)方法分為三類：①針對(duì)高相似序列的同源模建；②針對(duì)較低序列相似性的折疊識(shí)別；③不依賴于模板而利用物理學(xué)原理直接進(jìn)行從頭計(jì)算。但實(shí)際上由于現(xiàn)在大多數(shù)從頭預(yù)測(cè)技術(shù)依賴結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫(kù)和統(tǒng)計(jì)學(xué)原理及其他技術(shù)，為了研究需要，自CASP7開(kāi)始，前兩者合并為模板依賴型蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)方法。CASP10選擇114個(gè)蛋白，因?yàn)楦鞣N原因，最后只包括96個(gè)序列，112個(gè)評(píng)估單元，其中有111個(gè)評(píng)估單元是基于模板模建的。
2.1自動(dòng)化的結(jié)構(gòu)評(píng)估打分 CASP允許每個(gè)提交者提供5個(gè)蛋白結(jié)構(gòu)，每一個(gè)預(yù)測(cè)小組，只有命名為“模型1”的模型用于排名。自動(dòng)化結(jié)構(gòu)評(píng)估分為如下四步：①對(duì)提交的模型計(jì)算GDT-HA，GDC-all，LDDT-15，RPF-9；接著，計(jì)算這些打分的平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差，用于計(jì)算Z-得分；基于Z-得分，對(duì)預(yù)測(cè)小組進(jìn)行排名，用來(lái)消除差模型造成的罰分。②Z-得分小于-2.0的直接排除；對(duì)每一評(píng)估單元計(jì)算，加入U(xiǎn)B即最高得分后，重新計(jì)算GDT-HA，GDC-all，LDDT-15，RPF-9的平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差；同時(shí)當(dāng)Z值小于-2時(shí)，設(shè)置Z值等于-2。③計(jì)算每一個(gè)度量的Z-得分，并進(jìn)行求和。④計(jì)算了每個(gè)AU的得分，通過(guò)評(píng)估單元的數(shù)目分配綜合得分。而Z-得分只能用于確定前25組，不能用來(lái)確定排名，還需配對(duì)T檢驗(yàn)進(jìn)行重新排名，同時(shí)還對(duì)模型選擇對(duì)結(jié)果的影響做了分析。經(jīng)過(guò)分析，CASP10評(píng)估認(rèn)證Zhang-Server，QUARK，PMS， LEEcon，Zhang作為基于模板模建最佳預(yù)測(cè)小組[11]。
2.2最佳模板依賴型蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)方法方法簡(jiǎn)介 QUARK[12]最開(kāi)始是開(kāi)發(fā)作為無(wú)需用到全局模板結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)從頭結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)的，開(kāi)始于從非冗余PDB結(jié)構(gòu)庫(kù)用無(wú)縫線串法得到的連續(xù)的分散片段集合。最后，這些片段被運(yùn)用復(fù)制-交換蒙特卡洛模擬由距離輪廓和基于物理學(xué)和經(jīng)驗(yàn)誘發(fā)復(fù)合指導(dǎo)下組裝成全長(zhǎng)模型。在新的開(kāi)發(fā)中，從LOMETS線串比對(duì)提取的空間限制被用于協(xié)助QUARK結(jié)構(gòu)重組模擬。
Zhang和Zhang-Server[13]方法是由I-TASSER與QUARK結(jié)合相互作用開(kāi)發(fā)的。本質(zhì)上是相同的，不同的是Zhang是采用的CASP10服務(wù)器上的模板，而后者采用的是內(nèi)部線串方法得到的模板。整體結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)包括以下三個(gè)基本步驟：①模型識(shí)別， 目標(biāo)序列來(lái)自非冗余PDB結(jié)構(gòu)庫(kù)，用LOMETS來(lái)確定合適的模板比對(duì)；②基于模板和從頭結(jié)構(gòu)組裝；③模型的選擇與改進(jìn)。運(yùn)用7-MQAP方案來(lái)選擇模型，包括I-TASSER 的C-得分，TM-得分，五個(gè)統(tǒng)計(jì)指標(biāo)（RW，RWplus， Dfire，Dope和verify3D）。最后，7個(gè)MQAP得分總和作為MQAP一致性得分，低一致性得分的模型最終被選擇出來(lái)用于提交。
PMS[14]是基于能量函數(shù)和蛋白質(zhì)3D模型質(zhì)量評(píng)估的全局優(yōu)化方法，在側(cè)鏈原子細(xì)節(jié)模建以及主鏈結(jié)構(gòu)模建的準(zhǔn)確性來(lái)說(shuō)相當(dāng)成功。PMS對(duì)于蛋白質(zhì)的3D模型的模建，開(kāi)發(fā)了一種新的洛倫茲型能量項(xiàng)取代在MODELLER中使用的高斯型或樣條函數(shù)用于結(jié)構(gòu)約束限制。利用構(gòu)象空間退火來(lái)優(yōu)化能量函數(shù)。對(duì)于模板選擇和比對(duì)，利用隨機(jī)森林算法開(kāi)發(fā)了一種新的質(zhì)量評(píng)估方法。在折疊識(shí)別步驟中，質(zhì)量評(píng)估方法被用于重新排序由FOLDFINDER產(chǎn)生的候選模板。
LEEcon[15]相似于PMS，但是考慮到從FOLDFINDER獲得其他模板。Leecon模建是利用SERVER預(yù)測(cè)方法即從CASP10的所有SERVER模型最大集群中選擇模型的一致性方法。進(jìn)行SERVER模型的結(jié)構(gòu)集群，并確定出最大的集群。對(duì)于序列查詢，F(xiàn)OLDFINDER用域從PDB中識(shí)別最佳模板。排除掉與模板有幾乎相同的結(jié)構(gòu)（TM-得分≥0.975）和很不相似的結(jié)構(gòu)（TM-得分
3 總結(jié)和展望
掌握蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息對(duì)于研究蛋白質(zhì)的功能及作用機(jī)制具有重要意義。對(duì)于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能， 雖然可以通過(guò)實(shí)驗(yàn)的方法來(lái)實(shí)現(xiàn)， 但當(dāng)前的蛋白檢測(cè)技術(shù)水平還遠(yuǎn)遠(yuǎn)跟不上由“人類基因組計(jì)劃”不斷發(fā)展所產(chǎn)生的海量生物信息，所以利用蛋白質(zhì)預(yù)測(cè)技術(shù)協(xié)助實(shí)驗(yàn)科學(xué)變得尤為重要。CASP作為蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)領(lǐng)域的世界前沿水平代表，可以客觀的反映蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)技術(shù)水平。CASP10所得到的最佳5種模板依賴型蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)方法：Zhang-Server，QUARK， PMS，LEEcon，Zhang可對(duì)研究蛋白質(zhì)組尤其是對(duì)那些通過(guò)實(shí)驗(yàn)難以測(cè)定結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)分析則具有理論意義與實(shí)用價(jià)值。并且首次出現(xiàn)一個(gè)由分子動(dòng)力學(xué)方法得出的預(yù)測(cè)小組能成功的提高所有靶蛋白的準(zhǔn)確度，顯示出更多的物理學(xué)衍生的方法可為模建做出貢獻(xiàn)?？傊?，藥物生物信息學(xué)對(duì)蛋白結(jié)構(gòu)和功能的預(yù)測(cè)與實(shí)驗(yàn)科學(xué)的發(fā)展結(jié)合起來(lái)，將給蛋白質(zhì)設(shè)計(jì)、藥物設(shè)計(jì)等生命科學(xué)領(lǐng)域提供巨大的幫助。
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Turbidimetric Immunoassay Method and Dry-slide Bromocresol Green Method in(ALB)Serum Albumin Determination:
A Methodological Comparison and Bias Assessment
FENG Pin-ning,GAO Ling,YU Xiong-wen,et al.
Laboratory Medicine Department of the First Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University,Guangzhou 510080,China
【Abstract】 Objective The article compares the bias assessments of turbidimetric immunoassay method and dry-slide bromocresol green method in ALB detection, and discusses whether the bias of the two detection results are within the range permitted, so as to ensure the comparability of the results.Method According to NCCLS standardization document EP9-A2 [1], firstly 8 clinical samples are daily taken and tested duplicates under each method, altogether five days. Next the outlier points are excluded and correlation coefficients and expected deviations are calculated. The value is restricted by 1/2 of the error that external quality assessment allows(ALB+10%)by CLIA’88 as the method comparison result system error, and then it is bias assessed.Results The results of comparison between dry-slide bromocresol green method and turbidimetric immunoassay method are as follows: r2=0.934,when medical decisions are 20 g/L,35 g/L and 52 g/L,the expected relative deviations of dry-slide bromocresol green method are 10.4%,6.8%,3.2% respectively. When Xc=20 g/L and Xc=35 g/L, there are significant differences between the results of two methods.Conclusion Turbidimetric immunoassay is regarded as the methodology in comparison. Dry-slide bromocresol green method, however, proves positive deviations in the results of ALB determination. Its value of bias increases with the decline of ALB concentration, and it is more apparent when the concentration turns low. These two methods have poor correlation. Therefore, when different analysis methods are utilized in the detection of the same object, it is suggested different methodological comparisons and bias assessments be used in each method to make clear the disparities among them and then establish each reference range, especially the concentration reference values of different methods in different medical decisions, to insure the comparability of the detection results.
【Key words】 (ALB)serum albumin; Turbidimetric immunoassay method; Dry-slide bromocresol green method;Bias
作者單位:510080中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)部
血清白蛋白測(cè)定是醫(yī)院常規(guī)的生化檢驗(yàn)項(xiàng)目,可作為診斷某些疾病(腎病綜合征,肝硬化等)和評(píng)估預(yù)后的指標(biāo),其值的高低也可作為血液透析,腎移植患者生存期等的預(yù)測(cè)指標(biāo)[2]。是一種非特異性的,具有預(yù)后價(jià)值的標(biāo)志物。
目前測(cè)定白蛋白的方法有電泳法,免疫法和染料結(jié)合法。不同的方法測(cè)定ALB的結(jié)果存在一定的差異,在某些疾病的患者(腎衰竭),不同方法的測(cè)定結(jié)果可以存在較明顯的偏倚 [2],特別是在低濃度時(shí)尤為顯著。其差異將對(duì)臨床的診療觀察和療效預(yù)后帶來(lái)誤導(dǎo),因此,血清ALB測(cè)定的準(zhǔn)確性對(duì)臨床醫(yī)療的意義十分重大。本文依據(jù)NCCLS標(biāo)準(zhǔn)化文件的EP9-A2,對(duì)干化學(xué)法及免疫透射比濁法測(cè)定ALB的結(jié)果進(jìn)行方法學(xué)比較及偏倚評(píng)估。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 儀器 由日本Hitachi公司提供的Hitachi7170A全自動(dòng)生化分析儀,美國(guó)強(qiáng)生公司提供的Vitros950生化分析儀。
1.1.2 試劑材料 Hitachi7170A免疫透射比濁法白蛋白試劑,質(zhì)控品,定標(biāo)液由基恩科技有限公司提供,批號(hào)分別為2364301,2322901,2323101。Vitros950白蛋白試劑,定標(biāo)液均由美國(guó)強(qiáng)生公司提供,批號(hào)分別為0935-2097,KiT4 0456;質(zhì)控品是英國(guó)RANDOX公司提供的Assayed human sera level Ⅰ和level Ⅱ質(zhì)控品,批號(hào)分別為482UN,292UE/2。
1.1.3 標(biāo)本 標(biāo)本來(lái)自中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院,選取健康人群或患者新鮮血清標(biāo)本40份,無(wú)明顯溶血,黃疸,脂濁,標(biāo)本的濃度分布范圍為ALB50 g/L(4份)。
1.2 方法
1.2.1 測(cè)定方法 免疫透射比濁法在Hitachi7170A上測(cè)定;干化學(xué)法(BCG法)在Vitros950上測(cè)定。
1.2.2 方法對(duì)比實(shí)驗(yàn) 依據(jù)EP9-A2文件,每天隨機(jī)選取8份標(biāo)本,先對(duì)標(biāo)本進(jìn)行隨機(jī)排序,按1-8編號(hào),每份標(biāo)本分別用免疫透射比濁法,干化學(xué)法進(jìn)行雙份測(cè)定,先按1-8的順序測(cè)定第一次,再按8-1的順序測(cè)定第二次,連續(xù)測(cè)定5 d,記錄數(shù)據(jù)。測(cè)定結(jié)果以免疫透射比濁法為比較方法進(jìn)行比較及偏倚評(píng)估。
1.2.3 結(jié)果繪圖
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)繪制四張圖:①Yi對(duì)Xi的散點(diǎn)圖 (圖1)② Yij對(duì)Xi的散點(diǎn)圖(圖2)③(Yi-Xi)對(duì)(Yi+Xi)/2的偏差圖(圖3)④(Yij+Xi)/2對(duì)(Yi+Xi)/2的偏差圖(圖4)。
1.2.4 判斷離群點(diǎn) 40個(gè)數(shù)據(jù)中只允許排除一個(gè)離群點(diǎn),若離群點(diǎn)多于一個(gè),則需增加8個(gè)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
1.2.4.1 目測(cè)線性及離群點(diǎn)
1.2.4.2 方法內(nèi)離群點(diǎn)的檢查 計(jì)算樣本雙份測(cè)定的差值絕對(duì)值的平均值(DX和DY)及樣本雙份測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)化差值絕對(duì)值的平均值(DX’和DY’),若Xi1-Xi2,Yi1-Yi2分別超過(guò)4DX,4DY界限且DX’,DY’分別超過(guò)4DX’, 4DY’則視為離群點(diǎn)。
1.2.4.3 方法間離群點(diǎn)的檢查
計(jì)算方法間測(cè)定的絕對(duì)差值的平均值(E)及方法間標(biāo)準(zhǔn)化絕對(duì)差值的平均值(E’),若Eij,E’ij分別超過(guò)4 E,4 E’則視為離群點(diǎn)。
1.2.5 線性回歸分析及偏倚評(píng)估
計(jì)算線性方程及相關(guān)系數(shù),根據(jù)線性方程計(jì)算給定醫(yī)學(xué)決定水平(Xc)的預(yù)期偏倚及95%的可信范圍。若r2預(yù)期偏差可信區(qū)間的上限(預(yù)期偏差可信區(qū)間的上、下限為負(fù)值時(shí),取其絕對(duì)值進(jìn)行比較),預(yù)期偏差小于可接受偏差的概率很高(>97.5%),試驗(yàn)方法與對(duì)比方法相當(dāng),可以接受;②預(yù)期偏差的可信區(qū)間的上限>EA>預(yù)期偏差的可信區(qū)間的下限,則數(shù)據(jù)未顯示試驗(yàn)方法的偏差有別于可接受偏差,試驗(yàn)方法與對(duì)比方法相當(dāng);③EA97.5%),試驗(yàn)方法與對(duì)比方法不相當(dāng),不能被接受。
2 結(jié)果
2.1 兩種方法測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1;繪制散點(diǎn)圖及偏差圖:見(jiàn)圖1～4。
表1
免疫透射比濁法與干化學(xué)法測(cè)定ALB結(jié)果
干化學(xué)法(Y)免疫透射比濁學(xué)(X)
Y1Y2Y1-Y2Yi X1X2X1-X2Xi
120.420.50.120.4519.619.10.519.35
234.334.3034.331.331.90.631.6
337.838.30.538.0532.733.30.633
436.836.90.136.8531.231.10.131.15
…
1240.841.70.941.2537.537.20.337.35
…
3947.747.20.547.4545.445.4045.4
4050.9510.150.955352.10.952.55
圖1 免疫透射比濁法與干化學(xué)法雙份測(cè)定均值的散點(diǎn)圖
圖2 免疫透射比濁法雙份測(cè)定均值對(duì)干化學(xué)法所有結(jié)果的散點(diǎn)圖
圖3 免疫法與干化學(xué)測(cè)定均值之差對(duì)兩方法重復(fù)測(cè)定均值的偏差圖
圖4 免疫透射比濁法與干化學(xué)法(Yij+Xi)/2 -(Yi+Xi)/2偏差圖
2.2 按照EP9-A2文件進(jìn)行方法內(nèi)及方法間離群點(diǎn)檢查,40份數(shù)據(jù)未發(fā)現(xiàn)有離群點(diǎn)。計(jì)算得到干化學(xué)法與免疫透射比濁法的r2=0.934
表2
干化學(xué)法在給定醫(yī)學(xué)決定水平的預(yù)期偏差及可信限
免疫透射比濁法(g/L)1/2 Xc允許誤差(g/L)干化學(xué)法(g/L)預(yù)期偏倚(g/L)Bc95%可信限
下限上限
相對(duì)偏倚(%)
20±122.082.081.302.8710.4
35±1.7537.042.041.852.236.8
52±2.653.641.641.172.113.2
3 討論
目前白蛋白的測(cè)定方法,在臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用最廣泛的常規(guī)方法是BCG染料結(jié)合法,染料結(jié)合法易受反應(yīng)液pH、ALB與染料結(jié)合的密切程度及球蛋白的非特異干擾,導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果偏高。在BCG法基礎(chǔ)上發(fā)展的干片BCG法因其簡(jiǎn)便快速,微量敏感,抗干擾能力強(qiáng),近年逐漸應(yīng)用于臨床急診分析,但國(guó)外文獻(xiàn)有報(bào)道,在威爾士室間質(zhì)評(píng)(WEQAS)中,干片BCG法測(cè)定值存在負(fù)偏差[3]。隨著現(xiàn)代免疫分析技術(shù)的發(fā)展,高特異性、高靈敏度的免疫比濁法越來(lái)越多的應(yīng)用于臨床測(cè)定血清白蛋白,該方法易受標(biāo)本本身濁度、抗血清質(zhì)量的影響。
免疫法測(cè)定ALB,是基于抗原抗體的特異性反應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)的,從方法學(xué)上來(lái)講是具有高度特異性的。因?yàn)锳LB的測(cè)定缺乏可供對(duì)照的參考方法,所以本研究以免疫透射比濁法作為比較方法,依據(jù)NCCLS的標(biāo)準(zhǔn)化文件EP9-A2,對(duì)免疫透射比濁法及干化學(xué)法測(cè)定ALB結(jié)果的進(jìn)行比較評(píng)價(jià)。通過(guò)數(shù)據(jù)的分析,表明干化學(xué)法測(cè)定ALB的結(jié)果與免疫透射比濁法相比存在正偏差,相對(duì)偏倚隨著ALB濃度的減低而增大,在低濃度時(shí)偏差更加顯著。
干化學(xué)法測(cè)定ALB是在一個(gè)完整配套、統(tǒng)一的檢測(cè)系統(tǒng)中進(jìn)行,其所用的儀器、試劑、定標(biāo)液、方法學(xué)、操作程序均是相配套且實(shí)行嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)化程序,方法可溯源至已核準(zhǔn)的NIST SRMR927c。但是,干化學(xué)法實(shí)質(zhì)是BCG法,BCG法由于與球蛋白存在非特異性反應(yīng)而使ALB測(cè)定結(jié)果偏高,雖然通過(guò)縮短反應(yīng)時(shí)間可以有效減少干擾。但有研究表明在α2球蛋白含量較高,尤其當(dāng)A/G
目前國(guó)際上還沒(méi)有臨床可接受性能的統(tǒng)一判斷標(biāo)準(zhǔn),CLIA’88室間質(zhì)量評(píng)估允許誤差指標(biāo)是世界上影響最大的法定允許誤差指標(biāo)[4],是很多國(guó)家臨床檢驗(yàn)的最低質(zhì)量指標(biāo),該指標(biāo)可用于檢測(cè)系統(tǒng)或檢測(cè)方法分析性能的評(píng)估,以評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)方法間檢測(cè)結(jié)果的可接受性。因此,本研究以CLIA’88規(guī)定的室間質(zhì)評(píng)(ALB+10%)允許誤差的1/2作為方法比較結(jié)果系統(tǒng)誤差的允許限值,通過(guò)方法間預(yù)期偏倚的計(jì)算,在Xc= 20 g/L及Xc=35 g/L時(shí),干化學(xué)法的預(yù)期偏差95%可信限的下限大于系統(tǒng)誤差允許限值,表明干化學(xué)法對(duì)比免疫透射比濁法,預(yù)期偏差大于可接受偏差的概率很高(>97.5%),測(cè)定結(jié)果存在顯著差異。但是,因?yàn)槊庖咄干浔葷岱ú皇菂⒖挤椒?所以并不能判斷ALB在此醫(yī)學(xué)決定水平濃度時(shí),干化學(xué)法的測(cè)定結(jié)果是否可以接受,也不能說(shuō)明兩種方法哪種更準(zhǔn)確,只能說(shuō)明兩者在低濃度水平時(shí)測(cè)定結(jié)果差異較顯著。
方法學(xué)比較實(shí)驗(yàn)是實(shí)現(xiàn)分析方法準(zhǔn)確度溯源及檢驗(yàn)結(jié)果可比性的一個(gè)重要途徑。由于方法間的差異,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該對(duì)不同檢測(cè)方法建立相應(yīng)的參考范圍,特別是建立不同方法在不同醫(yī)學(xué)決定水平濃度的參考值。當(dāng)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用不同分析方法對(duì)同一分析物進(jìn)行分析時(shí),應(yīng)該進(jìn)行方法學(xué)比較及偏倚評(píng)估,明確各種方法存在的差異,以保證測(cè)定結(jié)果的可比性。
參 考 文 獻(xiàn)
[1] Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples.Approved Guideline-SecondEdition.NCCLS,EP9-A2,2002.
[2] Alison Carfray1, Kieran Patel2, Paul Whitaker2, Paul Garrick2, et al. Albumin as an outcome measure in haemodialysis in patients: the effect of variation in assay method.Nephrol Dial Transplant,2000,15: 1819-1822.
[3] Michelle M Payn, David Lawrence, Roger Willis and Edmund J Lamb . Sample matrix is critical in the evaluation of a dry-slide bromocresol green method for human albumin.Ann Clin Biochem,2002,39:311- 313.
[4]叢玉隆,馮仁豐,陳曉東.臨床實(shí)驗(yàn)室管理學(xué).中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2004:111-118.
卡西歐FX一4500計(jì)算器是一款可以進(jìn)行編程的計(jì)算器，存儲(chǔ)器雖然只有1100字節(jié)，編程語(yǔ)言簡(jiǎn)單，也沒(méi)有復(fù)雜的邏輯判斷語(yǔ)句，但在施工測(cè)量時(shí)若能巧妙編輯一些實(shí)用小程序，可以達(dá)到事半功倍的效果。下面介紹“全站儀隨意擺”放樣法與卡西歐FX一4500計(jì)算器相結(jié)合應(yīng)用程序，期待同行提出寶貴意見(jiàn)，以便更好改進(jìn)。
這里的“任意擺”指的是：不一定將全站儀擺放在坐標(biāo)點(diǎn)上，而是在與兩個(gè)已知點(diǎn)通視(兩已知點(diǎn)不一定通視)的條件下，擺放在任意一個(gè)平整、干凈、開(kāi)闊的地方。這樣可以解決傳統(tǒng)測(cè)量放樣時(shí)，全站儀一定要擺放在一個(gè)已知坐標(biāo)點(diǎn)上，然后后視另一個(gè)已知坐標(biāo)點(diǎn)而帶來(lái)的諸多不便：
坐標(biāo)點(diǎn)不可能在施工的路基或橋梁上：
后視點(diǎn)被毀，與其它坐標(biāo)點(diǎn)又不通視，只能放棄。要么從其它兩個(gè)點(diǎn)打轉(zhuǎn)點(diǎn)，對(duì)點(diǎn)、整平、重新對(duì)后視，測(cè)量精度將會(huì)降低。
坐標(biāo)點(diǎn)即使在便道旁邊，與放樣點(diǎn)不通視，仍然要打轉(zhuǎn)點(diǎn)，即使與放樣點(diǎn)通視，由于施工車輛等外界干擾，仍不能夠滿足施工放樣需要。
而采用全站儀隨意擺可以解除以上煩惱，只要與兩個(gè)已知坐標(biāo)點(diǎn)通視就行，而兩個(gè)已知點(diǎn)也不要求通視，下圖為“全站儀隨意擺”放樣法示意圖：
由上圖情況，用傳統(tǒng)方法根本無(wú)法放樣，轉(zhuǎn)點(diǎn)也打不成，但是如上圖全站儀的擺放，則能輕松完成放樣任務(wù)，問(wèn)題是如何求出測(cè)站點(diǎn)的坐標(biāo)。
全站儀擺放點(diǎn)的坐標(biāo)可以通過(guò)卡西歐FX一4500計(jì)算器的程序計(jì)算出來(lái)，所需條件是兩個(gè)已知點(diǎn)坐標(biāo)A(0，P)，B(U，K)和全站儀到兩個(gè)已知點(diǎn)的距離A、B，原理如下圖：
A(0，P)，B(U，K)是已知點(diǎn)，其方位角W及間距D可以計(jì)算出來(lái)。
全站儀測(cè)出到A點(diǎn)、B點(diǎn)的距離分別為A、B，則D、A、B三條邊可以構(gòu)成一個(gè)三角形，運(yùn)用余弦定理求出交會(huì)角：
α=arcCos((A2+D2-B2)／(2*A*D))
β=arcCos((B2+D2-A2)／(2*B*D))
則測(cè)站點(diǎn)坐標(biāo)：
X=0+A*COS(W+α)
Y=P+A*Sin(W+α)
或：
X=U+B*Cos(W+180-β)
Y=K+B*Sin(W+180-β)
以上可以用卡西歐FX一4500計(jì)算器編制一個(gè)程序進(jìn)行計(jì)算．
以測(cè)站點(diǎn)起手，按順時(shí)針?lè)较虻膬蓚€(gè)已知點(diǎn)坐標(biāo)分別為A(0，P)、B(U，K)，與其間距依次為A、B。
程序清單如下：
NEWPOINT
Lb1 0
O=O+OPUKAB
Pol((U-O),(K-P)，
W>0=>(W)：≠>W=(360+W)
D=√((P K)2+(O U)2)
G=Cos-1((A2+D2-B2)＼(2*A*D))
X“X”=O+A*COS(W+G)
Y“Y”=P+A*Sin(W+G)
【關(guān)鍵詞】 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì); 鈍頂螺旋藻片; 多糖; 脫色; 脫蛋白
鈍頂螺旋藻Spirulina platensisl， 簡(jiǎn)稱SP， 是藍(lán)藻門(mén)、藍(lán)藻綱、斷增藻目、顫藻科中的螺旋藻屬低等水生植物。SP是種微藻， 體長(zhǎng)約200～ 500 μm，寬僅為5～ 10 μm，因藻體呈螺旋狀而得名。在SP的各種生物活性物質(zhì)中，螺旋藻多糖(簡(jiǎn)稱PSP) 由于具有廣泛而復(fù)雜的生物學(xué)活性而成為目前SP研究的熱點(diǎn)之一[1]。
“復(fù)方螺旋藻片(原名“云南天然鈍頂螺旋藻片”)”是云南大理學(xué)院研制的新型功能性保健食品[2]，已獲國(guó)家發(fā)明專利(專利號(hào)：ZL96107910.X)。研究表明，該保健品具有降低血糖[3]、調(diào)節(jié)血脂[4]、增強(qiáng)機(jī)體免疫力[5]等多種作用。多糖是該制劑的主要活性成分之一。為進(jìn)一步探討“復(fù)方螺旋藻片”的作用機(jī)制，本實(shí)驗(yàn)以該保健品為原料，采用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)其多糖進(jìn)行了初步分離純化并進(jìn)行含量測(cè)定。目前，植物多糖的提取通常采取水提醇沉[6]的方法，得到的多糖產(chǎn)品純度較低，主要雜質(zhì)有色素、蛋白質(zhì)和一些小分子的物質(zhì)。色素的存在不僅影響多糖的色澤，同時(shí)也影響“復(fù)方螺旋藻片”多糖的純度，從而影響其生物活性，阻礙了對(duì)多糖的組成及結(jié)構(gòu)與其生物活性關(guān)系的理論研究。為此本實(shí)驗(yàn)對(duì)該制劑中多糖的提取、除雜、脫色等工藝進(jìn)行研究，并且對(duì)不同脫色和脫蛋白方法的效果進(jìn)行比較和篩選，使粗多糖得到精制，為進(jìn)一步研究該保健食品的作用機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)研究基礎(chǔ)。
1 材料與儀器
1.1 藥品與試劑復(fù)方螺旋藻片(原名云南天然鈍頂螺旋藻片)產(chǎn)品，片劑，瓶裝(0.4 g/片×50片/瓶)，云南白藥集團(tuán)大理制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)：20081025。由大理學(xué)院左紹遠(yuǎn)教授提供。SephadexG-100凝膠，北京慧易得科技有限公司生產(chǎn);葡萄糖對(duì)照品、牛血清白蛋白為國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司進(jìn)口分裝;考馬斯亮藍(lán)G-250為北京鼎國(guó)生物技術(shù)有限公司進(jìn)口分裝;其他化學(xué)試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。
1.2 儀器 B600型低速自動(dòng)平衡離心機(jī)(上海醫(yī)用分析儀器廠);SH-2型磁力攪拌器(北京洪博達(dá)科技有限公司);BT-224S型電子分析天平(德國(guó)賽多利斯儀器公司);SHZ-3循環(huán)水多用真空泵(上海青浦滬西儀器廠);RE-52A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞?wèn)|生化儀器廠);FD-1型冷凍干燥機(jī)(北京博醫(yī)康技術(shù)有限公司);UV 2550型紫外分光光度計(jì)(日本島津蘇州儀器有限公司)。
2 方法
2.1 云南鈍頂螺旋藻粗多糖的提取用電子分析天平稱取50g云南鈍頂螺旋藻片劑，經(jīng)研缽充分研磨成細(xì)小顆粒狀，加入5倍體積的95%乙醇加熱(70℃)回流3次，2 h/次，去除脂類和其它醇溶性物質(zhì)，傾出上層液。藥渣于50℃烘箱烘干，15倍水量70℃回流提取2次，每次1 h，過(guò)濾，濾液離心(2 000 r/min， 10 min)，上清液濃縮，無(wú)水乙醇調(diào)含醇量終濃度為80%，4℃靜置過(guò)夜，離心(3 000 r/min， 20 min)后沉淀依次用無(wú)水乙醇、丙酮、乙醚反復(fù)清洗數(shù)次，抽濾后冷凍干燥，得云南鈍頂螺旋藻粗多糖。
2.2 云南鈍頂螺旋藻多糖的純化云南鈍頂螺旋藻粗多糖加水溶解至100 ml，加入活性炭，40℃下脫色15 min，濾除活性炭，室溫下加入1倍量體積的三氯乙酸，強(qiáng)烈振蕩30 min，靜置過(guò)夜，2 000 r/min離心10 min，取上層水相，上清液用NaOH調(diào)pH=7.0，對(duì)水透析后減壓濃縮至100 ml，重復(fù)上述過(guò)程3次得濃縮液，無(wú)水乙醇調(diào)含醇量為80%，4℃靜置過(guò)夜，離心后沉淀依次用無(wú)水乙醇、丙酮、乙醚反復(fù)清洗數(shù)次，抽濾后冷凍干燥，得除蛋白精制多糖。低溫烘干得多糖粉末，加水溶解至10 ml，經(jīng)SephadexG-100凝膠柱分離，蒸餾水洗脫，采用蒽酮-濃硫酸法定性，分段收集洗脫液，乙醇沉淀，干燥后得純化后的云南鈍頂螺旋藻多糖。
2.3 云南鈍頂螺旋藻粗多糖的脫色方法
2.3.1 過(guò)氧化氫脫色取經(jīng)脫蛋白多糖溶液(0.5 mg/ml)，以氨水調(diào)至pH=9.0，分別加入30%過(guò)氧化氫適量，使其溶液中的終濃度分別為0.5%，1%，1.5%，40℃保溫15 min。
2.3.2 活性炭脫色活性炭經(jīng)重蒸水清洗過(guò)濾，干燥(120℃，8h)冷凍備用。取經(jīng)脫蛋白多糖溶液(0.5 mg/ml)，分別加入0.5%、1%、1.5%的活性炭，40℃保溫15min。
2.4 云南鈍頂螺旋藻粗多糖脫蛋白的方法水提醇沉法得到的粗多糖含有一定量的蛋白質(zhì)，本實(shí)驗(yàn)以蛋白質(zhì)去除率及多糖損失率為指標(biāo)比較三氯乙酸-正丁醇法、三氯乙酸法和Sveage法3種脫蛋白方法。蛋白脫除率(%)=[(脫蛋白前蛋白質(zhì)量 -脫蛋白后蛋白質(zhì)量)/脫蛋白前蛋白質(zhì)量]×100%多糖損失率(%)=[(脫蛋白前多糖質(zhì)量-脫蛋白后多糖質(zhì)量)/脫蛋白前多糖質(zhì)量]×100%
2.4.1 三氯乙酸-Sevage 法取粗多糖溶液( 015 mg/ml) 50 ml，加入多糖溶液體積1倍量10%三氯乙酸和1 /5體積的Sevage試劑(氯仿∶正丁醇= 4∶1) ，攪拌1 h， 4 000 r/min離心10 min，分出上清液，測(cè)定蛋白質(zhì)和多糖含量。
2.4.2 三氯乙酸法取粗多糖溶液(0.5 mg/ml)50 ml，加入1倍量的20%三氯乙酸，攪拌30 min，靜置過(guò)夜，4 000r/min離心10 min，分出上清液，加1 mol/L NaOH調(diào)pH至7.0，乙醇沉淀后測(cè)定其蛋白質(zhì)和多糖含量。
2.4.3 Sevage法取粗多糖溶液(0.5 mg/ml)50 ml，加入1/4體積的Sevage試劑(氯仿：正丁醇= 4∶1)，攪拌1.5 h，倒入分液漏斗中靜置1.5 h，分出水層，測(cè)定蛋白質(zhì)和多糖含量。
2.5 多糖及蛋白質(zhì)含量測(cè)定方法 多糖含量采用蒽酮-濃硫酸法[7]，以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。蛋白質(zhì)含量采用考馬斯亮藍(lán)法[8]，以牛血清白蛋白為標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。鈍頂螺旋藻粗多糖提取率(%)=[粗多糖質(zhì)量(g)/原料質(zhì)量(g)] ×100%
3 結(jié)果
3.1 云南鈍頂螺旋藻多糖提取的工藝根據(jù)單因素初步實(shí)驗(yàn)，影響云南鈍頂螺旋藻多糖提取率的主要因素有水提溫度、水提時(shí)間、固液比，為綜合分析各因素的影響，按3因素3水平表采用L9(34)正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，各因素水平(見(jiàn)表1)每個(gè)實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，確定最佳提取工藝，對(duì)正交實(shí)驗(yàn)所得的最佳提取工藝進(jìn)行驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)。表1 因素水平表由表2可知，影響云南鈍頂螺旋藻多糖提取率的各因素排列為水提溫度(A)>水提時(shí)間(B)>固液比(C)，水提溫度對(duì)云南鈍頂螺旋藻多糖提取率的影響達(dá)到顯著水平。根據(jù)正交實(shí)驗(yàn)的觀點(diǎn)，只選取有顯著性意義因素的最好水平搭配，確定出最佳方案。而對(duì)于不顯著性的因素，原則上可以由實(shí)際條件酌情處理。綜合各因素K值和極差方差分析比較，得出云南鈍頂螺旋藻多糖的最佳工藝為：水提溫度80℃，水提時(shí)間2 h，固液比1∶15，此工藝條件下云南鈍頂螺旋藻多糖的提取率為2.18%，多糖含量為13.65%。表2 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)結(jié)果
3.2 云南鈍頂螺旋藻多糖脫色方法的比較脫色后的溶液于200～700 nm下進(jìn)行紫外分光光度法掃描，檢測(cè)脫色效果，葡萄糖溶液為對(duì)照品進(jìn)行比較，以多糖損失率為指標(biāo)考察不同濃度過(guò)氧化氫和活性炭脫色的效果[9]。比較不同濃度活性炭脫色和過(guò)氧化氫脫色效果及多糖損失率。結(jié)果見(jiàn)表3。表3 不同脫色方法對(duì)云南鈍頂螺旋藻多糖含量的影響從表3可知，活性炭對(duì)云南鈍頂螺旋藻多糖的吸附能力較強(qiáng)，其脫色效果比過(guò)氧化氫好，多糖損失率較低。脫色劑種類以及濃度對(duì)多糖脫色效果顯示出差異，而用量升高時(shí)候多糖損失率明顯增加，通常取0.5%～1%的活性炭能取得滿意的效果。
3.3 云南鈍頂螺旋藻多糖脫蛋白方法的比較多糖中的游離蛋白質(zhì)可用蛋白質(zhì)沉淀劑如三氯乙酸、鞣酸等除去，少量蛋白質(zhì)可選用Sevage法除去[9]。以蛋白質(zhì)去除率、多糖損失率為指標(biāo)比較三氯乙酸-正丁醇法、三氯乙酸法和Sevage法脫蛋白的效果，優(yōu)化篩選出適合工業(yè)生產(chǎn)的簡(jiǎn)單、高效的云南鈍頂螺旋藻多糖脫蛋白方法。比較上述3種方法脫蛋白的效果。結(jié)果見(jiàn)表4。表4 不同方法對(duì)云南鈍頂螺旋藻多糖脫蛋白效果比較從表4可知，3種脫蛋白質(zhì)方法中，蛋白質(zhì)去除率最高，效果最好的為三氯乙酸-Sevage法，蛋白質(zhì)去除率達(dá)60.26%，但該方法處理后的多糖損失率也較高，達(dá)到11.21%;采用Sevage法脫除蛋白質(zhì)的效果較差，蛋白質(zhì)去除率僅為17.85%，需要多次使用，而每次使用Sevage試劑除去蛋白質(zhì)的變性膠狀物時(shí)，不可避免溶有多糖，造成多糖損失率達(dá)63.51%。三氯乙酸作為一種有機(jī)酸，可以使得樣品中的蛋白質(zhì)因?yàn)橛袡C(jī)酸而變性沉淀，采用三氯乙酸法去除蛋白質(zhì)(52.03%)的同時(shí)多糖損失率(2.85%)較低，綜合考慮蛋白質(zhì)去除率和多糖損失率兩個(gè)指標(biāo)，三氯乙酸法是較理想的脫蛋白方法。
4 討論
實(shí)驗(yàn)中通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)水提醇沉法提取云南鈍頂螺旋藻多糖，提取過(guò)程中考察了不同的水提溫度(A)、水提時(shí)間(B)和固液比(C)對(duì)多糖提取量的影響，以最小的RB做誤差估計(jì)，RA、RC分別是RB的3.9 倍和3.3 倍。因此，A、C 是影響多糖得率的主要因素，B 則是次要因素， 結(jié)合各因素的K值(越大越好)可得優(yōu)選水提溫度80℃，水提時(shí)間2 h，固液比1∶15進(jìn)行提取，多糖產(chǎn)率較高。此外，在多糖的提取過(guò)程中還發(fā)現(xiàn)，冰乙醇用量越大，沉降時(shí)間越長(zhǎng)，多糖沉淀越徹底，得率越高。實(shí)驗(yàn)中控制溶液的醇濃度約80%，過(guò)夜沉降。溫度升高，不利于多糖的沉降，故選擇4℃冰箱中冷藏靜置。
提取出來(lái)的云南鈍頂螺旋藻粗多糖呈綠色，色素的存在影響色澤和純度，而多糖進(jìn)一步分離純化往往選用離子交換色譜法，殘留的色素會(huì)降低離子交換樹(shù)脂的交換能力，因此脫色在多糖純化過(guò)程中有著非常重要的作用。此外，云南鈍頂螺旋藻粗多糖中蛋白質(zhì)的存在會(huì)影響對(duì)多糖生物活性的進(jìn)一步研究，因此有必要進(jìn)行脫色和脫蛋白方法的研究。
過(guò)氧化氫脫色的原理是其在受熱過(guò)程迅速分解，產(chǎn)生初生態(tài)氧而破壞有色物質(zhì)，對(duì)多糖的脫色效果較活性炭差且多糖損失率較高?；钚蕴繛楹谏?xì)微粉末，無(wú)毒、無(wú)臭、無(wú)味，具有多孔結(jié)構(gòu)，能吸附糖液中的色素物質(zhì)，但同時(shí)也會(huì)吸附掉部分多糖，造成多糖的組分損失，所以在選擇脫色劑用量上，并不是用量越高越好，而應(yīng)同時(shí)考慮脫色效果與多糖損失兩者的綜合效應(yīng)。此外，實(shí)驗(yàn)還比較了同種方法對(duì)云南鈍頂螺旋藻多糖脫蛋白前后脫色效果。脫蛋白后進(jìn)行脫色，溶液透光率明顯提高，用1.5%活性炭40℃保溫15 min，糖溶液呈透明狀。蛋白質(zhì)的存在影響了色素的去除，這可能與色素的性質(zhì)有關(guān)，推測(cè)其大多為結(jié)合色素。
多糖主要以兩種形式存在，一是以純糖鏈，另一種是糖鏈與肽鏈結(jié)合，形成糖肽或糖蛋白，多糖脫蛋白并不是徹底去除蛋白質(zhì)，主要是去除游離蛋白質(zhì)，因此在選擇脫蛋白方法時(shí)應(yīng)該注意避免多糖-蛋白質(zhì)復(fù)合物的降解，從而造成多糖-蛋白質(zhì)特有的生理活性下降。粗多糖中蛋白質(zhì)的去除通常采用4種方法即酶法、Sevage法、三氟三氯乙烷法和三氯乙酸法[10] 。本文對(duì)三氯乙酸-Sevage法、三氯乙酸法和Sevage法3種脫蛋白方法進(jìn)行了比較，結(jié)果表明三氯乙酸法對(duì)云南鈍頂螺旋藻多糖的脫蛋白效果較好，而且多糖損失率較小。因此，選用三氯乙酸法進(jìn)行3次脫蛋白能夠較好的去除蛋白質(zhì)，但在一定程度上也有可能造成一部分多糖-蛋白質(zhì)復(fù)合物的損失，是否影響到多糖的活性，有待于進(jìn)一步研究。
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答：關(guān)于炒米煮粥的問(wèn)題，曾經(jīng)有人做過(guò)這樣的實(shí)驗(yàn)：將干燥狀態(tài)的粳米放入炒鍋中，用小火翻炒至米呈微黃色。加8倍水按正常煮粥方法烹調(diào)。用未炒過(guò)的精制粳米為對(duì)照。模擬小腸消化的條件，加入胰酶，測(cè)定各樣品的淀粉消化速率。
結(jié)果發(fā)現(xiàn)，炒米煮成的粥和生大米煮的粥相比，總淀粉水解指數(shù)有明顯上升。這個(gè)指數(shù)越高，意味著消化起來(lái)越容易、越徹底。炒米粥的總水解指數(shù)比生米煮成的大米粥高出13%，淀粉消化指數(shù)高出23.7%。測(cè)定淀粉組分也發(fā)現(xiàn)，和生米煮成的粥相比，炒米粥的抗性淀粉（2小時(shí)之后還不能消化的淀粉）降低了30%。同時(shí)，炒米粥的快速消化淀粉（20分鐘內(nèi)就完全消化的淀粉）比例上升了30%。這個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果意味著，炒過(guò)的米再煮粥消化起來(lái)會(huì)更容易、更徹底。
身體虛弱的產(chǎn)婦，或者生病引起消化能力下降的人，或有胃腸疾病的人，都適合喝炒米粥。它們不但可提供營(yíng)養(yǎng)，所形成的淀粉膠漿還具有良好的消化道黏膜保護(hù)作用，有很好的養(yǎng)胃功效。需要提醒的是，對(duì)于那些消化能力很強(qiáng)的人來(lái)說(shuō)，特別是糖尿病人和減肥者喝這些快速消化的炒米粥是不利的。因?yàn)樗鼈儠?huì)快速升高血糖，而且會(huì)令人很到饑餓。如果一定要吃用炒米做成的粥，那么建議加上一些豆子，可以有效降低血糖上升的速度。
新型驅(qū)蚊方法有效嗎？
問(wèn)：夏天到了，蚊蟲(chóng)又多起來(lái)了?，F(xiàn)在有很多的新型驅(qū)蚊方法，如驅(qū)蚊手環(huán)、聲光驅(qū)蚊器等，這些方法真的安全有效嗎？
答：人類和蚊蟲(chóng)“斗爭(zhēng)”了成百上千年，想出了無(wú)數(shù)驅(qū)蚊方法?？偟膩?lái)說(shuō)，安全的方法效果比較一般，而有效的方法安全性就要降低，新型驅(qū)蚊法也是如此。
驅(qū)蚊手環(huán)：專家認(rèn)為，驅(qū)蚊手環(huán)多是“商家玩噱頭”，并不成熟。手環(huán)聲稱所含的香茅、薰衣草等都屬于芳香型草，通過(guò)氣味來(lái)達(dá)到防蚊的效果，有一定的效果但作用不大。而且這些氣味能在手環(huán)上停留多久，有效性保持多久，都很難說(shuō)。
化學(xué)蚊香：盤(pán)香片類產(chǎn)品以殺蚊驅(qū)蚊為主，廣泛使用的是菊脂類的殺蟲(chóng)藥劑，以香料為載體，在加熱時(shí)，藥物會(huì)隨著香料擴(kuò)散，驅(qū)蚊花露水也是靠避蚊胺等化學(xué)成分起作用。這些化學(xué)產(chǎn)品都有一定的毒性，例如在六神驅(qū)蚊水上就可以看到“微毒”的說(shuō)明字樣，孕婦嬰幼兒也還是要避免使用。其他人使用時(shí)，也要注意房間通風(fēng)。
空調(diào)降溫：把溫度降低到一定范圍內(nèi)能減少蚊蟲(chóng)的活動(dòng)。因?yàn)槔ハx(chóng)有一個(gè)生存適宜溫度，氣溫在26℃到30℃時(shí)蚊子比較活躍，在13℃左右時(shí)蚊子會(huì)喪失飛行能力?？墒?，一般家用空調(diào)開(kāi)到13℃是不可能的，而開(kāi)到18℃的時(shí)候蚊子還有一定的活性，仍會(huì)咬人，且耗電量大。
聲光驅(qū)蚊：市場(chǎng)上有很多以超聲波或者燈光誘捕為原理的驅(qū)蚊器。且不論其原理是否靠譜，據(jù)使用者描述： “我曾試用過(guò)，一個(gè)晚上只捕捉到兩三只蚊子，自己依舊被蚊子咬到?！笨梢?jiàn)雖然聲光產(chǎn)品雖然沒(méi)有化學(xué)刺激，但效果差強(qiáng)人意。
鯽魚(yú)湯為什么會(huì)發(fā)苦？
問(wèn)：我煮的鯽魚(yú)湯為什么是苦的？
答：鯽魚(yú)湯發(fā)苦，第一，可能是把鯽魚(yú)的膽弄破了，第二可能是洗魚(yú)的時(shí)候沒(méi)有把魚(yú)腹腔內(nèi)的黑薄膜搓洗掉，黑膜如不清洗干凈，也是會(huì)帶苦味的。所以處理鯽魚(yú)的時(shí)候一定要把魚(yú)鰓、魚(yú)肚子里面的東西都去掉洗凈，尤其是肚皮里面不能有黑膜，否則很腥。如果是魚(yú)膽破了，可以用米酒、米醋或小蘇打水涂抹魚(yú)身，然后用自來(lái)水沖洗干凈即可。如果沒(méi)有酒、醋、小蘇打等，用雪碧、七喜等檸檬味的汽水處理，效果也很好。
收拾好的鯽魚(yú)要放置一會(huì)兒再烹飪，這樣做出的魚(yú)才鮮。起油鍋，放一點(diǎn)點(diǎn)油，油熱時(shí)把鯽魚(yú)放入鍋中，換中火。待魚(yú)身兩面變黃時(shí)，放入料酒，馬上蓋上鍋蓋燜半分鐘，這樣可以讓酒香味進(jìn)入魚(yú)中并去除魚(yú)腥味。然后加入清水，放入姜塊和蔥段，大火燒開(kāi)后改用小火慢慢熬半小時(shí)左右，關(guān)火前5分鐘放入一點(diǎn)鹽即可食用。魚(yú)湯做好之后，最好趁熱喝，其中魚(yú)肉也可以吃，而且肉質(zhì)很嫩，還有淡淡的清香和甜甜的味道。
怎樣挑選百香果？
問(wèn)：怎樣才能挑選到又香又甜的百香果？
答：百香果首先要選擇果形端正、沒(méi)有明顯外形缺陷或突起的果實(shí)，如果奇形怪狀，很有可能是用激素催熟的。成熟的百香果存放一段時(shí)間后，果皮會(huì)出現(xiàn)凹陷現(xiàn)象，此時(shí)的果瓤會(huì)更加香甜。百香果分山上種植和平地種植，山上成熟的百香果味道更甜且香氣更濃，平地種的果略酸，香氣略遜山地果。
從外觀上看，種在山上的百香果一般比種在平地的果顏色要深，因?yàn)樯缴系墓苋照諘r(shí)間長(zhǎng)，呈紫色，個(gè)頭均勻。平地的果多呈深紅色，個(gè)頭稍大。從果肉上分辨，山上種植的百香果果肉為深黃色，平地種植的果為淺黃色。
什么人不宜服用蜂王漿？
問(wèn)：什么人不宜服用蜂王漿？服用蜂王漿時(shí)應(yīng)該注意些什么？
答：蜂王漿的禁忌人群：
1.過(guò)敏體質(zhì)者。因?yàn)榉渫鯘{中含有激素、酶、異性蛋白，易引起過(guò)敏反應(yīng)。
2.長(zhǎng)期患低血壓與低血糖者。蜂王漿中含有類似乙酰膽堿的物質(zhì)，而乙酰膽堿有降壓、降血糖的作用。
3.腸道功能紊亂及腹瀉者。因蜂王漿可引起腸管強(qiáng)烈收縮，誘發(fā)腸功能紊亂，導(dǎo)致腹瀉、便秘等癥。
4.手術(shù)初期及婦女懷孕時(shí)。術(shù)后病人失血過(guò)多，身體嚴(yán)重虛弱，此時(shí)服用蜂王漿，易致出血。蜂王漿還能刺激子宮收縮，影響胎兒的正常發(fā)育。
5.凡肝陽(yáng)亢盛及濕熱阻滯者，或是發(fā)高熱、大吐血、黃疽性肝病者，均不宜服用蜂王漿。
6.兒童。兒童處于發(fā)育高峰周期，體內(nèi)的激素分泌處于復(fù)雜的相對(duì)平衡狀態(tài)，而且供應(yīng)較為充足，蜂王漿內(nèi)含有極少量的激素，如果飲用，有可能導(dǎo)致兒童微妙平衡的激素分泌失衡，進(jìn)而影響到兒童的正常發(fā)育。
服用蜂王漿時(shí)應(yīng)該注意些什么？
